Page 79 - 《中国药房》2022年21期
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2.5.2 主成分分析 利用SPSS 22.0、SIMCA 14.0软件,
1 100
1 000 首先将 10 批复方茴芹颗粒样品的 26 个共有峰进行 Z-
900 [8―10]
800 Score 标准化处理,然后导入软件进行主成分分析 。
700 结果显示,复方茴芹颗粒中共有4个主成分的特征值大
U/mV 600 R 于 1,方差贡献率分别为 47.144%、18.665%、16.737%、
500
S10
400 S9 8.781%,累计方差贡献率可达91.327%,这表明通过因子
S8
300 S7
S6 分析降维处理后所提取的4个主成分可代表复方茴芹颗
200 S5
S4
100 S3 粒指纹图谱中26个共有峰的主要信息,且主成分1的特
S2
0 S1
征值最大,所涵盖信息最多。进一步采用 SIMCA 14.0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84
t/min 软件分析发现,10批复方茴芹颗粒可聚为4类,第1类为
图1 10批复方茴芹颗粒样品的HPLC指纹图谱和对照 S2、S3、S6,第 2 类为 S4、S8、S10,第 3 类为 S7,第 4 类为
指纹图谱(R) S1、S5、S9(图4),由此可知,该主成分分析结果与聚类分
D葡萄糖醛酸苷、异绿原酸A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛 析结果一致。
酸苷、异绿原酸C、大豆苷元。
6
0.30 4
0.20 2
AU 0
0.10 t[2]
-2
0 -4
0 10 20 30 40 50 60 70 80 -6
t/min
-8
1:没食子酸;6:新绿原酸;8:绿原酸;10:葛根素;12:3′-甲氧基葛 -15 -10 -5 0 5 10
t[1]
根素;14:大豆苷;20:木犀草素-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷;21:异绿原酸
图4 10批复方茴芹颗粒的主成分分析图
A;22:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷;23:异绿原酸C;26:大豆苷元
图2 混合对照品溶液的色谱图 2.6 8种有效成分的含量测定
2.4.3 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评 2.6.1 供试品溶液的制备 制备方法同“2.1.1”项。
价软件(2012 版)》对 10 批复方茴芹颗粒进行相似度评 2.6.2 混合对照品溶液的制备 取绿原酸、葛根素、3′-
价,结果显示,10 批复方茴芹颗粒的相似度均大于 甲氧基葛根素、大豆苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸
0.900,表明这10批样品之间的化学成分基本一致,制剂 苷、异绿原酸A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原
工艺相对稳定,与对照指纹图谱相似度较高。 酸C的对照品各适量,精密称定,置于同一25 mL容量瓶
2.5 化学模式识别分析 中,加入适量甲醇,超声使其完全溶解,放冷后用甲醇定
2.5.1 聚类分析 利用 SPSS 22.0 软件,将 10 批复方茴 容,摇匀,滤过,即得上述成分质量浓度分别为 0.145、
芹颗粒指纹图谱中26个共有峰的峰面积作为参量,运用 0.630、0.320、0.348、0.094、0.126、0.047、0.108 mg/mL 的
[7]
Ward 法、平方欧氏距离法进行系统聚类分析 ,并绘制 混合对照品溶液。
树状图(图3)。结果显示,当平方欧氏距离为5时,10批 2.6.3 色谱条件 色谱条件同“2.2”项。
复方茴芹颗粒可聚为4类,第1类为S2、S3、S6,第2类为 2.6.4 专属性考察 取“2.6.1”“2.6.2”项下供试品溶液
S4、S8、S10,第3类为S7,第4类为S1、S5、S9。该聚类分 和混合对照品溶液,按“2.6.3”项下色谱条件进样分析,
析结果提示,虽然10批复方茴芹颗粒的指纹图谱相似度 记录色谱图。结果显示,各成分色谱峰与其相邻色谱峰
较好,但化学成分含量可能存在一定差异。 的分离度良好,说明该方法专属性良好。结果见图5。
2.6.5 线性关系考察 分别精密吸取“2.6.2”项下混合
平方欧氏距离
0 5 10 15 20 25 对照品溶液 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20、1.60、2.00
S2
mL,置于不同的 2 mL 容量瓶中,以甲醇定容,摇匀,按
S3
“2.6.3”项下色谱条件进样分析。以对照品质量浓度为
S6
S4 横坐标(X)、峰面积积分值为纵坐标(Y)进行线性回归,
S10 结果见表1。
S8
2.6.6 精密度试验 取同一份供试品溶液(样品S1),按
S7
“2.6.3”项下色谱条件连续进样测定6次,测得绿原酸、葛
S1
根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、木犀草素-7-O-β-D-葡
S5
萄糖醛酸苷、异绿原酸 A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸
S9
图3 10批复方茴芹颗粒样品的聚类分析树状图 苷以及异绿原酸C峰面积的RSD分别为0.86%、1.27%、
中国药房 2022年第33卷第21期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21 ·2629·