Page 80 - 《中国药房》2022年21期

0.80 氧基葛根素、大豆苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、
0.60 异绿原酸A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷以及异绿原
AU 0.40
0.20 酸 C 的 平 均 加 样 回 收 率 分 别 为 98.73%、101.27%，
0 100.21%、102.51%、93.33%、94.75%、95.32%、98.99%，
0 10 20 30 40 50 60 70
t/min RSD分别为2.31%、1.39%、1.29%、2.06%、2.58%、2.39%、
A.供试品溶液
2.17%、2.36%（n＝3），表明该方法准确度良好。
0.80
2.6.10 样品含量测定 取10批复方茴芹颗粒，研细，按
0.60
“2.6.1”项下方法制备供试品溶液，按“2.6.3”项下色谱条
AU 0.40
0.20 件进样测定，采用外标法计算各成分的含量，平行测定3
0 份，取平均值。结果见表2。
0 10 20 30 40 50 60 70
t/min 表2 10 批复方茴芹颗粒中 8 种成分的含量测定结果
B.混合对照品溶液
（n＝3，mg/g）
1：绿原酸；2：葛根素；3：3′-甲氧基葛根素；4：大豆苷；5；木犀草素-
3′-甲氧基 木犀草素-7-O-β-D- 异绿原 芹菜素-7-O-β-D- 异绿原
7-O-β-D葡萄糖醛酸苷；6：异绿原酸A；7：芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸 批次 绿原酸 葛根素 葛根素 大豆苷 葡萄糖醛酸苷 酸A 葡萄糖醛酸苷 酸C
苷；8：异绿原酸C
S1 1.35 16.97 4.36 3.24 0.84 0.42 0.34 0.32
图5 专属性考察结果 S2 1.28 16.94 4.27 3.19 0.90 0.47 0.39 0.42
表1 各成分线性关系考察结果 S3 1.19 16.74 4.12 3.33 0.83 0.38 0.37 0.29
S4 1.27 15.54 3.28 3.17 0.69 0.36 0.23 0.36
成分 回归方程 线性范围/（μg/mL） r S5 1.34 20.09 3.21 3.76 0.53 0.47 0.26 0.37
绿原酸 Y＝1 409.4X+33 074 14.5～145 0.999 5 S6 1.49 21.23 3.28 4.10 0.71 0.42 0.29 0.23
葛根素 Y＝5 291.8X+497 059 63～630 0.999 7 S7 1.26 15.31 3.05 4.03 0.84 0.38 0.31 0.23
3′-甲氧基葛根素 Y＝3 398.5X+179 861 32～320 0.999 4 S8 1.23 15.85 3.13 4.17 0.72 0.35 0.28 0.35
大豆苷 Y＝3 750.1X+147 486 34.8～348 0.999 3 S9 1.29 20.07 3.27 3.28 0.69 0.40 0.27 0.28
木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 Y＝3 371.6X+1 078.8 9.4～94 0.999 2 S10 1.33 15.46 3.08 3.39 0.74 0.41 0.33 0.33
异绿原酸A Y＝1 753.3X+35 754 12.6～126 0.999 3 均值 1.30 17.42 3.51 3.57 0.75 0.41 0.31 0.32
芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 Y＝1 685.8X+269.69 4.7～47 0.999 1
异绿原酸C Y＝4 221.0X+264 529 10.8～108 0.999 4 3 讨论
2.09%、1.23%、2.17%、1.64%、2.15%、2.27%（n＝6），表明 本研究首先对乙腈-水、甲醇-水、乙腈-0.1% 甲酸溶
该方法精密度良好。 液、乙腈-0.2% 磷酸溶液等流动相进行了考察。结果发
2.6.7 稳定性试验 取同一供试品溶液（样品S1），于室 现，当使用乙腈-水、甲醇-水或乙腈-0.1% 甲酸溶液作为
温放置 0、3、6、9、12、15 h 后，按“2.6.3”项下色谱条件进 流动相时，色谱峰分离效果较差；当使用乙腈-0.2%磷酸
样测定，测得绿原酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆 溶液作为流动相时，出峰数较多，色谱峰分离度较好且
苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸A、芹菜 基线平滑，故选择乙腈-0.2% 磷酸溶液作为流动相。随
素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷以及异绿原酸 C 峰面积的 后笔者在 200～400 nm 下进行全波长扫描，结果显示，
RSD分别为1.02%、1.18%、1.96%、1.07%、2.09%、2.04%、 在278 nm波长下色谱信息全面，色谱峰出峰较多且特征
2.28%、2.36%（n＝6），表明供试品溶液在室温放置 15 h 性强，故选择278 nm为检测波长。
内稳定性良好。 本研究建立了复方茴芹颗粒的指纹图谱，共确定了
2.6.8 重复性试验 取同一批复方茴芹颗粒（样品S1）6 26 个共有峰，并指认出 11 个共有峰，分别为没食子酸、
份，研细，分别按“2.6.1”项下方法制备供试品溶液，按 新绿原酸、绿原酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、
“2.6.3”项下色谱条件进样测定，采用外标法测得绿原 木犀草素-7-O-β-D 葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 A、芹菜素-
酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、木犀草素-7-O-β- 7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 C 及大豆苷元。经相
D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖 似度评价发现，10 批复方茴芹颗粒样品的整体差异较
醛酸苷以及异绿原酸 C 的平均含量分别为 1.35、16.97、 小。进一步经聚类分析和主成分分析发现，10批复方茴
4.36、3.24、0.84、0.42、0.34、0.32 mg/g，RSD 分 别 为 芹颗粒可聚为 4 类，其中 S2、S3、S6 为一类，S4、S8、S10
2.15%、1.67%、1.75%、1.63%、2.16%、2.12%、2.28%， 为一类，S7 为一类，S1、S5、S9 为一类，这提示复方茴芹
2.19%（n＝6），表明该方法重复性良好。 颗粒不同批次间的化学成分含量可能存在一定差异。
2.6.9 加样回收率试验 称取已知各成分含量的复方 结合文献资料发现，该方君药羊红膻中含有绿原酸、木
茴芹颗粒（样品 S1）9 份，每份 0.5 g，精密称定；按照 1∶ 犀草素-7-O-β-D 葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 A、芹菜素-7-
[11]
0.5、1∶1、1∶1.5 质量比加入各成分对照品，每个比例 3 O-β-D-葡萄糖醛酸苷及异绿原酸 C 等成分 ；臣药葛根
份，分别按“2.6.1”项下方法制备供试品溶液，按“2.6.3” 中含有绿原酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷等成
项下色谱条件进样测定，计算得绿原酸、葛根素、3′-甲 分 ，这8种成分均具有抗前列腺增生、抗炎、抗氧化、降
[12]

·2630· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21 中国药房 2022年第33卷第21期