Page 78 - 《中国药房》2022年21期
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肾气、化血瘀的功效，可用于治疗良性前列腺增生 。复                           素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 A、芹菜素-7-O-β-
                                                     [1]
          方茴芹颗粒处方成分复杂，且尚缺乏质量控制研究。中                            D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 C 及大豆苷元对照品适量，
          药指纹图谱能较全面地反映中药内在化学成分的种类                             精密称定，置于同一25 mL容量瓶中，加入适量甲醇，超
          与数量，评价和控制中药材及复方的质量                  [2―3] ；其结合化     声使其完全溶解，放冷后用甲醇定容，摇匀，滤过，即得
          学模式识别技术能够对高效液相色谱（HPLC）数据进行                          上述成分质量浓度分别为 0.024、0.037、0.073、0.317、
          综合处理和分析，科学、全面地反映中药及中药复方的                            0.116、0.102、0.047、0.063、0.035、0.054、0.047 mg/mL 的
              [4]
          质量 。此外，多成分含量测定可以更全面地反映制剂                            混合对照品溶液。
                [5]
          的质量 。因此，本研究在完成复方茴芹颗粒（原名“羊                           2.2 色谱条件
                                                     [6]
          红膻癃闭平颗粒”）制备工艺及中试生产的基础上 ，建                               色谱柱为 SunFire   TM  C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）；
          立复方茴芹颗粒的HPLC指纹图谱，并结合化学模式识                           柱温为30 ℃；流动相为乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B），梯
          别技术对该颗粒质量进行评价，同时测定该颗粒中绿原                            度洗脱（0～25 min，5%A→10%A；25～35 min，10%A→
          酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、木犀草素-7-O-β-                     15%A；35～46 min，15%A→17%A；46～60 min，17%A→
          D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸 A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖                     22%A；60～80 min，22%A→42%A）；流速为 1.0 mL/min；
          醛酸苷及异绿原酸 C 8 种有效成分的含量，旨在为全面                         检测波长为278 nm；进样量为10 μL。
          有效地控制该颗粒制剂质量以及新药开发提供依据。                             2.3 方法学考察
          1 材料                                                2.3.1  精密度试验      取同一复方茴芹颗粒供试品溶液
          1.1 主要仪器                                           （样品 S1），按“2.2”项下色谱条件连续进样 6 次，记录色
              2695 型 HPLC 仪及配套的 2998 PAD 检测器、Em‐              谱图。以10号峰（葛根素的色谱峰，该峰出峰时间居中、
          power2色谱工作站均购自美国Waters公司；AB135-S型                   峰形好，下同）为参照峰，测得26个共有峰的相对保留时
          十万分之一分析天平购自瑞士 Mettler Toledo 公司；                    间、相对峰面积的 RSD 分别为 0.07%～0.30%、0.57%～
          FA2104型万分之一分析天平购自上海精密科学仪器有                          1.72%（n＝6），表明该方法精密度良好。
          限公司天平仪器厂；SB-800 DTD 型超声波萃取仪购自                       2.3.2  稳定性试验      取同一复方茴芹颗粒供试品溶液
          宁波新芝生物科技股份有限公司。                                    （样品 S1），于室温放置 0、3、6、9、12、15 h 时，按“2.2”项
          1.2  主要药品与试剂                                        下色谱条件进样测定，记录色谱图。以 10 号峰为参照
              葛根素、木犀草素-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、绿原酸、                     峰，测得 26 个共有峰的相对保留时间、相对峰面积的
          大豆苷、大豆苷元、没食子酸的对照品均购自中国食品                            RSD 分别为 0.06%～0.48%、0.72%～1.83%（n＝6），表明
          药品检定研究院（批号分别为 110752-201816、111968-                 供试品溶液在室温放置15 h内稳定性良好。
          201602、110753-201413、111738-201904、111502-202003、   2.3.3  重复性试验      取同一批复方茴芹颗粒（样品S1）6
          110831-201906，纯度均大于99%）；3′-甲氧基葛根素、新                 份，分别按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2”
          绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C的对照品均购自成都普                           项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以10号峰为参照
          菲德生物技术有限公司（批号分别为17111305、19081403、                  峰，测得 26 个共有峰的相对保留时间、相对峰面积的
          19120606、18070401，纯度均大于99%）；芹菜素-7-O-β-D             RSD 分别 0.46%～1.78%、0.93%～2.31%（n＝6），表明该
          葡萄糖醛酸苷对照品（批号20120601，纯度大于99%）购                      方法重复性良好。
          自上海诗丹德标准技术服务有限公司。复方茴芹颗粒                             2.4  指纹图谱的建立及相似度分析
          样品共10批（编号S1～S10），均由山西中医药大学附属                        2.4.1  指纹图谱的建立        按“2.1.1”项下供试品溶液的
          医院提供，批号分别为 20190506、20190724、20190725、              制备方法及“2.2”项下色谱条件建立10批复方茴芹颗粒
          20190726、20191103、20191104、20191105、20201114、       的指纹图谱。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件
          20201116、20201118，规格为10 g/袋。                       （2012版）》对10批复方茴芹颗粒的HPLC图进行分析处
          2 方法与结果                                             理，采用中位数法生成对照指纹图谱。结果显示，10 批
          2.1 溶液的制备                                           复方茴芹颗粒样品共有26个共有峰。10批复方茴芹颗
          2.1.1  供试品溶液的制备          取复方茴芹颗粒约 1 g，研             粒样品的HPLC指纹图谱和对照指纹图谱（R）见图1。
          细，精密称定，精密加入 75% 甲醇 25 mL，称质量；超声                     2.4.2  共有峰的标定与指认           取“2.1.2”项下混合对照
          萃取（功率250 W，频率40 kHz，下同）30 min，放冷，再次                 品溶液适量，按“2.2”项下色谱条件进样测定，即得混合
          称定质量，用 75% 甲醇补足减失的质量，摇匀，用 0.22                      对照品溶液的色谱图（图 2）。根据 10 批复方茴芹颗粒
          μm微孔滤膜滤过，即得。                                        HPLC 指纹图谱中各色谱峰的相对保留时间，并结合图
          2.1.2  混合对照品溶液的制备             取没食子酸、新绿原             2，指认出11个共有峰，分别为没食子酸、新绿原酸、绿原
          酸、绿原酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、木犀草                         酸、葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、木犀草素-7-O-β-


          ·2628·   China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21                                 中国药房    2022年第33卷第21期
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