Page 57 - 《中国药房》2022年21期

HP-5MS 弹 性 石 英 毛 细 管 柱（30 m×250 μm×0.25 结合表 1 和图 2 可以看出，从北苍术茎叶挥发油中
μm）；采用程序升温模式进行色谱分离，初始温度以 共鉴定出 42 种成分，有 20 种成分的相对含量大于 1%；
100 ℃保持 2 min，再以 3 ℃/min 升至 120 ℃并保持 2 其中以β-倍半水芹烯的相对含量（14.83%）最高，其次是
min，然后以 2 ℃/min 升至 150 ℃并保持 2 min，最后以 γ-荜澄茄烯（8.60%）、2-亚甲基-4，8，8-三甲基-4-乙烯基

10 ℃/min 升至 230 ℃；进样口温度为 250 ℃；载气为高 [5.2.0]壬烷（6.52%）。从北苍术根茎挥发油中共鉴定出
纯氦气（99.999%）；流速为 1.0 mL/min；分流比为 10∶1； 26 种成分，其中 4-联苯甲醛为根茎挥发油的主要成分，
进样量为 1 μL。质谱条件：离子源为电子轰击离子源， 其相对含量为 31.56%；此外，β-桉叶醇、β-倍半水芹烯、
离子源温度为230 ℃；四极杆温度为150 ℃；电子能量为 沉香螺萜醇、苍术酮等成分在根茎挥发油中的相对含量
70 eV；溶剂延迟时间为4 min；采用全扫描方式，扫描质 也较高，分别为 18.68%、7.16%、4.93%、4.60%。从北苍
量范围为m/z 50～550。 术须根挥发油中共鉴定出 21 种成分，其中 β-桉叶醇
2.1.3 北苍术不同部位挥发油成分分析 取“2.1.1”项 （44.39%）、4-联苯甲醛（18.14%）和沉香螺萜醇（11.41%）
下根茎、须根和茎叶部位的挥发油提取物各3份，分别按 的相对含量都在 10% 以上。北苍术须根与根茎挥发油
“2.1.2”项下条件进样分析，得到北苍术不同部位挥发油 中的共有成分有 21 种，包括 silphinene、modhephene、荜
化学成分的 GC-MS 总离子流图，见图 1。通过与 Quant 澄茄烯、异松香烯、berkheyaradulene、β-石竹烯、α-葎草

Analysis（B.09.00）定量分析软件、标准数据库 NIST17.0 烯等；根茎、茎叶和须根挥发油中的共有成分有8种，分
以及文献[8－11]比对进行成分鉴定，并采用峰面积归一 别为榄香醇、荜澄茄烯、沉香螺萜醇、巴伦西亚橘烯、石
化法计算不同部位挥发油中化学成分的相对含量，见表 竹素、β-倍半水芹烯、γ-桉叶醇和β-桉叶醇。
1。结果显示，从北苍术不同部位挥发油中共鉴定出 60 2.2 北苍术不同部位挥发油抗菌活性考察
种化学成分，主要为萜烯类、倍半萜类、醇类、酮类等化 2.2.1 挥发油抗菌效果测定 采用纸片扩散法测定北
合物。随后，将不同部位挥发油中化学成分的相对含量 苍术不同部位挥发油对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球
导入 Origin 2020 软件，以欧氏距离算法绘制聚类热图， 菌、枯草芽孢杆菌的抗菌活性。将上述3种供试菌接种
见图 2。结果显示，北苍术根茎和须根中挥发油的化学 到 NB 培养基（未加琼脂）中扩大培养，调整菌液密度至
成分组成更为相似；而根茎、须根与茎叶相比，挥发油的 1×10 CFU/mL。吸取上述菌液 100 μL 加到预先准备
7
化学成分组成差异较大。
好的 NA 培养基中，并用涂布器均匀涂满表面。为了让
×10 7
1.8 挥发油更好地吸附在滤纸上，按 1∶1（m/m）的比例加入
1.6 28
1.4 56
1.2 13 19 57 二甲基亚砜稀释挥发油，然后经 0.45 μm 微孔滤膜过滤
强度 1.0 23 27 36
0.8
0.6 6 15 22 24 26 58 除菌。在距 NA 培养基中心 2.5 cm 处，放置 3 张直径为
0.4 4 14 17 29 31 37 47 48 59
30
0.2 1 2 5 7 11 25 32 33 34 38 40 44 45 52 53 60
41
0 0.5 cm的圆形无菌滤纸，滴加5 μL质量浓度为5 mg/mL
4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40
[12]
t/min 的药液 ；以滴加5 μL二甲基亚砜的培养基作为阴性对
A.茎叶
1.4 ×10 7 照。将培养基置于37 ℃恒温培养箱培养24 h，然后使用
55
1.2
1.0 D7200 型尼康相机记录抗菌实验结果，使用 Image J
强度 0.8 48 1.8.0软件测量抑菌圈直径，抑菌圈直径越大表示抗菌效
0.6
0.4 28
0.2 3 8 9 10 12 14 16 18 21 29 32 35 43 45 46 49 51 54 果越好。实验重复3次。实验数据用Excel 2016软件整
33 37
20
0 39 42
4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40
t/min 理并制表，采用Graph Pad Prism 8.0软件进行统计分析；
B.根茎
采用单因素方差分析和 LSD 检验对北苍术不同部位挥
2.2 ×10 7 48
2.0 55 发油的抗菌效果进行比较；检验水准 α＝0.05。结果
1.8
1.6
1.4
强度 1.2 见图3。
1.0
0.8 46
0.6 32 45 图 3 结果显示，北苍术不同部位挥发油对白色葡萄
0.4 8 9 51
0.2 3 10 12 14 16 18 20 21 28 29 33 37 54
0 球菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有较好的抗菌
4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40
t/min 作用，但抗菌效果有所差异；二甲基亚砜对挥发油的抗
C.须根
图1 北苍术不同部位挥发油成分分析的 GC-MS 总离 菌活性无影响。其中，根茎挥发油的抗菌效果最佳，须
子流图 根挥发油的抗菌效果次之，茎叶挥发油的抗菌效果相对
中国药房 2022年第33卷第21期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21 ·2611·