Page 90 - 《中国药房》2022年20期

A. Sham组 B. I/R组 C. I/R+Asp组 D. I/R+Asp+in-miR-340-5p组 E. I/R+Asp+HMGB1组
图3 各组大鼠心肌组织中细胞凋亡情况的显微图（TUNEL法）
Sham组
1.5 I/R组 HMGB1 25 kDa
I/R+Asp组 1.5 miR-NC β-actin 42 kDa
miR-340-5p相对表达量 1.0 I/R+Asp+HMGB1组 c 相对荧光素酶活性 1.0 a HMGB1蛋白相对 表达量 0.5 a
I/R+Asp+in-miR-340-5p组
1.0
miR-340-5p
b
0.5
c
0.5
a
0
NC 340-
HMGB1 HMGB1 0 miR- miR-
0 WT MUT 5p
A.各组miR-340-5p相对表达量柱形图 A.荧光素酶活性检测结果柱形图 B. HMGB1蛋白表达检测电泳图和柱形图
a：与miR-NC组比较，P＜0.05
图5 miR-340-5p和HMGB1的靶向关系（x±s，n＝5）
HMGB1 25 kDa
4 讨论
TLR4 95 kDa
临床研究表明，心肌梗死是患者心血管疾病发生和
死亡的主要原因，而恢复心脏的血液供应被认为是心肌
β-actin 42 kDa
[12]
梗死最有效的治疗手段 。然而，再灌注本身会使心肌
Sham组 I/R组 I/R+ I/R+Asp+ I/R+Asp+
Asp组 in-miR- HMGB1 损伤进一步恶化，这种现象被称为心肌 I/R 损伤 。目
[13]
340-5p组 组
B.各组HMGB1、TLR4蛋白表达电泳图 前，心肌I/R损伤缺乏相应的治疗靶点，故寻找有效靶点
十分必要。
Sham组
1.5 I/R组 研究表明，心肌细胞内氧自由基大量产生、细胞黏
I/R+Asp组
附分子改变、钙离子超载、心肌能量代谢障碍、细胞凋亡
I/R+Asp+in-miR-340-5p组
I/R+Asp+HMGB1组 a 等都与心肌 I/R 损伤相关，这些机制的相互关联构成了
蛋白相对表达量 c c c c 一个复杂的信号网络，相互制约、平衡 [14―15] 。Asp属于非
1.0
a
甾体抗炎药，其导致闭塞性心血管事件发生的风险低于
0.5
b
b
传统的非甾体抗炎药，且可通过减轻炎症反应和线粒体
氧化损伤、减少心肌细胞凋亡来改善心肌 I/R 损伤 [8―9] 。
0
HMGB1 TLR4 为了探索 Asp 在心肌 I/R 损伤保护中的具体机制，本研
C.各组HMGB1、TLR4蛋白相对表达量柱形图 究检测了各组大鼠血清中心肌损伤指标以及心肌组织
a：与Sham组比较，P＜0.05；b：与I/R组比较，P＜0.05；c：与I/R+Asp
中炎症和氧化应激指标水平。结果表明，Asp 能通过抑
组比较，P＜0.05
制 LDH、CK-MB、cTnⅠ的表达，减轻炎症反应，抑制氧
图4 各组大鼠心肌组织中 miR-340-5p 和 HMGB1、
化应激反应，从而发挥对I/R损伤的保护作用。此外，本
TLR4蛋白表达的检测结果（x±s，n＝5）
研究发现，Asp 可明显改善 I/R 引起的心肌组织病理损
3.5 miR-340-5p与HMGB1的靶向关系 伤，并可缩小心肌梗死面积，抑制心肌组织中的细胞凋
miR-340-5p 与 HMGB1 的 3′-UTR 区（位 点 1364- 亡，与已有研究基本相似 。
[8]
1371）存在互补配对区，故推测HMGB1可能是miR-340- miR-340-5p 定位于人 5 号染色体长臂 5q35.3，可通
5p 的靶点。荧光素酶活性检测结果（图 5A）显示，在转 过靶向 c-Met、FHL2、ROCK1、SKP2 等多种癌基因来参
染 miR-340-5p 后，HMGB1 WT 的相对荧光素酶活性受 与肿瘤的发生和发展 ；可通过上调髓细胞性白血病 1
[16]
到显著抑制（P＜0.05）。此外，HMGB1蛋白表达检测结 的表达来减少氧化损伤和细胞凋亡，从而改善糖尿病性
果（图5B）显示，转染miR-340-5p可显著降低HMGB1蛋 心肌功能障碍 ；除此之外，miR-340-5p 表达的上调还
[17]
白的相对表达量（P＜0.05）。 可有效缓解小鼠的心肌 I/R 损伤 。本研究结果显示，
[5]

·2512· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 20 中国药房 2022年第33卷第20期