Page 33 - 《中国药房》2022年20期
P. 33

3 讨论                                               次市售样品中 nepasaikosaponin K 的含量偏离感冒清热
          3.1 感冒清热颗粒差异标志物的选择                                 颗粒标准样品参考线，掺伪比例分别为9.91%和13.40%，
              课题组前期分别对各模拟样品中nepasaikosaponin K               说明市售样品存在掺伪现象，应予以关注。现有研究表
          的含量进行测定，结果显示，nepasaikosaponin K 在缺柴                明，藏柴胡因价格低、产量高的优势常掺伪或混入北柴
                                                                   [5]
          胡阴性样品中未被检出，而藏柴胡阳性样品中该成分的                           胡使用 ；而且其柴胡皂苷含量显著高于其他品种，具有
                                                                            [9]
          含量为标准样品的 25～115 倍。因此，nepasaikosaponin              一定的毒性风险 ，因此本研究建立的方法可对感冒清
          K 可作为感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪检测方法的差异                           热颗粒中藏柴胡掺伪情况进行有效排查和控制。
          标志物。                                                   综上所述，本研究建立了以 nepasaikosaponin K 为
          3.2 检测条件优化                                         指标的感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪的检测方法，初步拟
          3.2.1  供试品溶液制备方法          课题组前期以甲醇（含浓              定了藏柴胡掺伪限度为10%，并对市售感冒清热颗粒中
          氨试液）为提取溶剂，考察了不同超声时间（30、45、60                       nepasaikosaponin K含量和藏柴胡掺伪比例进行了调查，
          min）、溶剂体积（25、50、75 mL）及浓氨试液体积分数                    可为该制剂质量评价及藏柴胡掺伪筛查提供检测手段，
         （2%、5%、10%）对感冒清热颗粒供试品溶液中待测成分                        同时也为中成药掺伪检测技术研究提供新的思路与
          定量离子对对应色谱峰峰面积的影响，最终确定了甲醇                           方法。
          所含浓氨试液的体积分数为 5%，提取溶剂用量为 25                         参考文献
          mL，超声时间为30 min。                                    [ 1 ]  国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部[S]. 2020
                                                                  年版.北京：中国医药科技出版社，2020：293，1796-1797.
          3.2.2  色谱条件     课题组分别考察了水、甲醇、乙腈、甲
                                                             [ 2 ]  中国科学院中国植物志编辑委员会 . 中国植物志：第五
         （乙）酸溶液等不同流动相体系的分离效果。结果显示，
                                                                  十五卷：第一分册[M].北京：科学出版社，1979：215.
          当以甲醇为有机相时，基线噪声较大，色谱响应值偏低，
                                                             [ 3 ]  赵佳琛，翁倩倩，张悦，等. 经典名方中柴胡药材的本草
          且分离度小于1.5；采用乙腈为有机相，上述问题均有所
                                                                  考证[J]. 中国中药杂志，2020，45（3）：697-703.
          改善；同时，为改善待测成分色谱峰的峰形，课题组尝试                          [ 4 ]  贵州省药品监督管理局. 贵州省中药材、民族药材质量
          在流动相中加入一定量的酸。最终确定流动相为 0.1%                              标准：2003年版 [S]. 贵阳：贵州科技出版社，2003：165.
          甲酸溶液-含 0.1% 甲酸的乙腈，并建立了“2.1.1”项下梯                   [ 5 ]  刘潇潇，陈馥，林锦锋，等. 含柴胡中成药的质量控制方
          度洗脱程序。课题组还考察了不同柱温（30、35、40 ℃）                           法探讨[J]. 中国药学杂志，2019，54（17）：1452-1456.
          对供试品溶液中待测成分色谱峰峰面积及分离度的影                            [ 6 ]  夏玉英，李菁，李楚源，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS分
          响，最终确定柱温为40 ℃。                                          析感冒清热颗粒化学成分 [J]. 中药材，2022，45（02）：
          3.2.3  质谱条件     课题组分别考察了电喷雾正、负离子                        359-367.
          模式下对照品溶液和供试品溶液中目标成分的检出情                            [ 7 ]  张东阁，王凤霞，杨宇杰，等. 感冒清热颗粒挥发油包合
          况。结果显示，采用负离子模式可检出nepasaikosaponin                       工艺的优化[J]. 中国药房，2021，32（14）：1734-1740.
                                                             [ 8 ]  樊洪利，刘亚雄，乔莉，等 . 基于顶空-气相色谱-离子迁
          K 的分子离子峰 m/z 943.6[M－H] 、氯离子加合峰 m/z
                                       －
                    －
                                                   －
          979.7[M+Cl] 和羧基加合峰m/z 989.6[M+HCOO] ，其中                 移谱的北柴胡与藏柴胡鉴别[J]. 广州中医药大学学报，
                                                                  2022，39（2）：417-421.
                                  －
          分子离子峰 m/z 943.6[M－H] 的丰度最高；而采用正离
                                                             [ 9 ]  郭佳琪，杨印军，方伟，等. 藏柴胡以及种植北柴胡和竹
          子模式未能检测出 nepasaikosaponin K 色谱峰。因此，
                                                                  叶柴胡的皂苷含量研究[J]. 中国现代中药，2018，20（1）：
                                         －
          最终选取母离子为 m/z 943.6[M－H] ，主要碎片离子为                        34-38.
                             －
                                                    －
          m/z 781.5[M－H－Glu] 、m/z 797.4[M－H－Rha] 、m/z        [10]  丁锤，徐莹，马孝熙，等 . 柴胡属 5 种易混药材的鉴别研
          635.5[M－H－Glu－Rha] 。课题组前期分别检测了对                         究[J]. 中药材，2016，39（9）：1975-1981.
                               －
          照 品 和 供 试 品 溶 液 中 m/z 943.6→635.5、m/z 943.6→       [11]  严华，董亚娟，程显隆，等. 南柴胡与常见混伪品的鉴别
          781.5、m/z 943.6→797.4特征离子对对应色谱峰，结果显                     方法研究[J]. 中国药学杂志，2015，50（2）：109-114.
          示，3 组特征离子对均能被检出；其中 m/z 943.6→635.5                 [12]  杨印军，郑伟，郭佳琪，等 . 北柴胡、竹叶柴胡、藏柴胡与
          对应色谱峰峰面积最大、信噪比高、分离度好，故选择其                               小叶黑柴胡化学成分比较研究[J].中国中药杂志，2019，
          作为定量离子对。                                                44（2）：332-337.
          3.3  市售感冒清热颗粒中 nepasaikosaponin K 含量及              [13]  FANG W，YANG Y J，GUO B L，et al. Anti-influenza tri-
                                                                  terpenoid saponins（saikosaponins）from the roots of
          藏柴胡掺伪情况分析
                                                                  Bupleurum marginatum var. stenophyllum[J]. Bioorg Med
              采用本研究建立的感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪检
                                                                  Chem Lett，2017，27：1654
          测方法，对6家生产企业的15批市售感冒清热颗粒样品
                                                             [14]  国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：四部[S]. 2020
          中 nepasaikosaponin K 的含量进行检测，结果表明，1 批                   年版.北京：中国医药科技出版社，2020：29.
          次样品超出拟定限度，不合格率为6.67%。同时，本研究                                       （收稿日期：2022-05-10 修回日期：2022-08-09）
          对感冒清热颗粒中掺伪比例进行了调查，结果表明，2批                                                               （编辑：曾海蓉）


          中国药房    2022年第33卷第20期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 20  ·2459·
   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38