Page 30 - 《中国药房》2022年20期
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藏柴胡阳性样品溶液：取藏柴胡1 g，北（南）柴胡9 g，其 含量的感冒清热颗粒样品（编号S7）9份（每份约相当于
余同“2.2.3（1）”项下处方、制法，制得掺伪10%藏柴胡阳 柴胡0.5 g），分别加入低（1.01 μg/mL）、中（10.10 μg/mL）、
性样品溶液。 高（50.50 μg/mL）质量浓度的对照品溶液（按“2.2.1”项
2.2.4 感冒清热颗粒掺伪混合样品溶液 取感冒清热 下方法配制）1 mL，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，
颗粒样品，研细，混匀，精密称取样品适量（相当于柴胡 再按“2.1”项下检测条件进样测定，记录峰面积并计算加
0.45 g），精密加入藏柴胡粉末0.05 g，其余同“2.2.2”项下 样回收率。结果显示，上述溶液中 nepasai-kosaponin K
处方、制法，制得感冒清热颗粒掺伪混合样品溶液。 的平均加样回收率为 97.58%，RSD 为 2.09%（n＝9），表
2.3 方法学考察 明方法准确度良好。
2.3.1 专属性试验 分别取 1.010 μg/mL nepasaikosa‐ 2.3.7 检测限与定量限考察 取感冒清热颗粒供试品
ponin K对照品溶液、缺柴胡阴性样品溶液、标准样品溶 溶液（编号 S7），适当稀释后按“2.1”项下检测条件进样
液（含北柴胡或南柴胡）、掺伪50%藏柴胡阳性样品溶液 测定。结果显示，当含量为0.59 μg/g时，nepasaikosaponin
（含北柴胡）和藏柴胡阳性样品溶液，按“2.1”项下检测条 K定量、定性离子对对应色谱峰的信噪比均大于3；当含
件进样测定。总离子流（total ion current，TIC）图和典型 量为 1.75 μg/g 时，nepasaikosaponin K 定量离子对对应
MRM 图如图 2 所示，在与 nepasaikosaponin K 对照品溶 色谱峰的信噪比大于 10。综合考虑样品间差异及方法
液相应保留时间位置上，缺柴胡阴性样品溶液中3对特 偏差，拟定感冒清热颗粒中 nepasaikosaponin K 的检测
征离子对峰均未检出，说明缺柴胡阴性样品对检测无干 限为0.60 μg/g，定量限为1.80 μg/g。
扰。标准样品溶液检出微量nepasaikosaponin K，与其余 2.4 感冒清热颗粒模拟样品中 nepasaikosaponin K 的
色谱峰的分离度均大于 1.5；掺伪 50% 藏柴胡阳性样品 含量
溶液、藏柴胡阳性样品溶液均检出 nepasaikosaponin K， 分别取“2.2.3”项下各模拟样品溶液（掺伪10%藏柴
其色谱峰峰面积分别约为标准样品的 12 倍和 25 倍，与 胡阳性样品溶液除外）适量，按“2.1”项下检测条件进样
其余色谱峰的分离度均大于1.5。 测定，记录峰面积并按外标法计算各样品中nepasaikosa‐
2.3.2 线性关系考察 分别取“2.2.1”项下系列对照品 ponin K的含量，结果见表2。
溶液，按“2.1”项下检测条件进样测定。以对照品质量浓 2.5 感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪比例检测方法的建立
度为横坐标（X）、定量离子对对应色谱峰峰面积为纵坐 及验证
标（Y）进行线性回归，得回归方程为Y＝3 113.2X+19.084 2.5.1 感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪比例线性关系的考
（r＝0.999 1），表明 nepasaikosaponin K 检测质量浓度的 察 取藏柴胡和北柴胡饮片适量，其余同“2.2.3（1）”项
线性范围为0.051～20.200 μg/mL。 下处方、制法，分别制得藏柴胡掺伪比例 5%、8%、10%、
2.3.3 精密度试验 取“2.2.1”项下质量浓度为 1.010 20%、40%、50%、70%、90%、100% 的感冒清热颗粒掺伪
μg/mL的对照品溶液，按“2.1”项下检测条件连续进样6 样品溶液共9份，按“2.1”项下检测条件进样测定。以掺
次，记录峰面积。结果显示，nepasaikosaponin K 定量离 伪样品溶液中藏柴胡掺伪比例为横坐标（a）、nepasaiko‐
子对对应色谱峰峰面积的RSD为1.51%（n＝6），表明仪 saponin K定量离子对对应色谱峰峰面积为纵坐标（Y）进
器精密度良好。 行 线 性 回 归 ，得 回 归 方 程 为 Y＝26 147a+44.603（r＝
2.3.4 重复性试验 按“2.2.3（5）”项下方法平行制备掺 0.990 9），表明感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪比例在5%～
伪 10% 藏柴胡阳性样品溶液（含北柴胡），共 6 份，按 100%范围内与峰面积成良好的线性关系。
“2.1”项下检测条件进样测定，记录峰面积并以外标法计 2.5.2 感冒清热颗粒中藏柴胡掺伪比例测定方法的验
算样品中的 nepasaikosaponin K 含量。结果显示，该成 证 取感冒清热颗粒样品 3 批（编号分别为 S1、S6、
分含量的RSD为2.02%（n＝6），表明方法重复性良好。 S15），分别加入一定量的藏柴胡粉末，参照“2.2.4”项下
2.3.5 稳定性试验 按“2.2.3（5）”项下方法制备掺伪 方法制成藏柴胡比例分别为10%、20%、50%的掺伪混合
10%藏柴胡阳性样品溶液（含北柴胡），分别于室温下放 样品溶液，按“2.1”项下检测条件进样测定，记录峰面积
置 0、2、4、6、8、10、12、24 h 时按“2.1”项下检测条件进样 并代入“2.5.1”项下线性回归方程计算藏柴胡掺伪比例。
测定，记录峰面积。结果显示，nepasaikosaponin K 定量 结果显示，感冒清热颗粒掺伪混合样品中藏柴胡的理论
离子对对应色谱峰峰面积的RSD为1.89%（n＝8），表明 掺伪比例与实测掺伪比例的平均偏差为1.25%～1.53%，
掺伪10%藏柴胡阳性样品溶液在24 h内稳定性良好。 说明该方法能准确测定感冒清热颗粒中藏柴胡的掺伪
2.3.6 加样回收率试验 精密称取已知nepasaikosaponin K 比例。结果见表3。
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