Page 78 - 《中国药房》2022年19期

峰面积。结果，苦参碱、氧化苦参碱、东莨菪内酯、异嗪 化苦参碱的基础上增加了东莨菪内酯、异嗪皮啶的含量
皮啶峰面积的 RSD 分别为 1.46%、1.70%、0.95%、1.80% 测定，以更全面地控该制剂的质量。
（n＝5），表明供试品溶液在室温24 h内稳定。 3.2 供试品溶液制备方法及色谱条件的筛选
2.4.4 重复性试验 精密量取伤科灵喷雾剂样品 6 份 本研究比较了不同提取溶剂种类（乙醇、三氯甲烷、
（编号S5），每份5 mL，分别按“2.1.2”项下方法制备供试 甲醇）、不同提取溶剂用量（三氯甲烷30、40、50、70 mL）、
品溶液，再按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积， 不同氨水用量（1、2、3 mL）下的供试品溶液色谱图结果，
通过外标法计算含量。结果，苦参碱、氧化苦参碱、东莨 最终选择 1 mL氨水浸润后以 70 mL三氯甲烷超声提取
菪内酯、异嗪皮啶的含量分别为 30.40、47.66、13.60、 的方法进行供试品溶液的制备。据 2020 年版《中国药
12.39 µg/mL，RSD 分别为 1.79%、1.27%、1.36%、1.59% 典》（一部）及相关文献报道 [3，15―16] ，再结合二极管阵列检
（n＝6），表明该方法重复性良好。 测器全波长（190～400 nm）扫描发现，苦参碱、氧化苦参
2.4.5 加样回收率试验 取已知含量的伤科灵喷雾剂6 碱的最大吸收峰分别在 200.68、201.17 nm 处，东莨菪内
份（编号 S5），每份 2.5 mL，分别加入混合对照品贮备液 酯和异嗪皮啶的最大吸收峰在 203.81、207.48 nm 处，但
（含 90.00 µg/mL 苦参碱、125.00 µg/mL 氧化苦参碱、 4 个成分在 210 nm 处左右均有吸收。为减少在梯度洗
36.00 µg/mL 东莨菪内酯、32.00 µg/mL 异嗪皮啶）1 mL， 脱过程中变换波长引起基线漂移，本研究选择210 nm作
按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2”项下色谱 为检测波长。此外，笔者分别考察了以甲醇、乙腈作有
条件进样测定，分别计算 4 个成分的平均加样回收率。 机相和磷酸水、三乙胺水作水相组合的流动相洗脱效
结果，苦参碱、氧化苦参碱、东莨菪内酯、异嗪皮啶的平 果，结果以乙腈-0.1% 磷酸水系统洗脱可使伤科灵喷雾
均 加 样 回 收 率 分 别 为 102.36%、97.84%、103.02%、 剂样品得到较好地分离。最后，笔者分别对不同流速
99.52%，RSD 分别为 1.49%、1.85%、1.41%、1.42%（n＝ （0.8、1.0、1.2 mL/min）、不同柱温（25、30、35 ℃）进行了
6），表明本方法准确度良好。 考察，结果样品在柱温 35 ℃时以 1.0 mL/min 的流速进
2.4.6 样品含量测定 分别精密量取 11 批伤科灵喷雾 行分析可得到较好的分离效果。
剂样品，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项 3.3 HPLC特征图谱和含量测定结果的分析
下色谱条件进样测定，采用外标法计算4个成分的含量。 11 批伤科灵喷雾剂的 HPLC 特征图谱研究结果显
重复测定3次，取平均值。结果，4个成分的含量范围分 示，不同批次制剂共确认出18个共有峰，且各批次样品
别为 14.48～44.86、32.53～69.76、11.28～20.96、10.36～ 的相似度均≥0.990，表明制剂的质量较稳定。通过与混
22.49 μg/mL。结果见表1。 合对照品图谱比对，指认出了苦参碱、氧化苦参碱、东莨
表1 11 批伤科灵喷雾剂中 4 个成分的含量测定结果 菪内酯、异嗪皮啶 4 个共有特征峰。本研究采用 HPLC
（n＝3，µg/mL） 法测定11批伤科灵喷雾剂中上述4个成分的含量发现，
编号 苦参碱 氧化苦参碱 东莨菪内酯 异嗪皮啶 每 1 mL 样品中苦参碱与氧化苦参碱的总含量最低为
S1 16.55 56.89 11.51 12.34 0.061 mg，满足质量标准中要求的每1 mL含苦参碱与氧
S2 44.86 46.41 20.96 22.49 化苦参碱的总量不得低于0.035 mg的要求 。而东莨菪
[8]
S3 30.78 69.76 14.04 10.36
S4 36.92 57.39 17.11 14.48 内酯与异嗪皮啶两者的含量具有一定的相关性，即在东
S5 37.72 50.49 14.75 12.50 莨菪内酯含量较高的样品中异嗪皮啶的含量也相对较
S6 28.45 32.53 13.24 11.38 高；但不同批次样品间上述2个成分的含量存在差异，这
S7 27.56 43.18 13.52 12.00
S8 24.57 49.07 11.66 10.88 可能与制剂原药材批次不同有关。
S9 17.97 65.58 11.55 11.72 综上所述，本研究采用 HPLC 法，在同一色谱条件
S10 14.48 62.95 11.78 12.03
S11 16.09 67.30 11.28 12.18 下建立了伤科灵喷雾剂的特征图谱和同时测定苦参碱、
氧化苦参碱、东莨菪内酯、异嗪皮啶含量的方法，经方法
3 讨论
学验证，该方法稳定、可行；结合特征图谱和含量测定可
3.1 定量分析指标的选择
为伤科灵喷雾剂的整体质量控制提供参考。
伤科灵喷雾剂由 10 味药材组成，成分较复杂，原质
参考文献
量标准中测定了苦参碱和氧化苦参碱的含量，这2个成
[ 1 ] 贵州省中医研究所 . 贵州草药[M]. 贵州：贵州人民出版
[10]
分均来源于本制剂中的山豆根药材 。本品为贵州苗
社，1970：1014.
药特色药，而铁筷子为苗药习用药材，东莨菪内酯、异嗪 [ 2 ] 黄文平，温芝琪，王萌萌，等 . 山腊梅叶中 8 种成分含量
皮啶为铁筷子的主要活性成分 [2，11] ，具有抗菌抗炎、清热 测定及主成分分析[J]. 中药新药与临床药理，2018，29
解毒、活血散瘀等功效 [12―14] 。因东莨菪内酯与异嗪皮啶 （6）：799-803.
的作用与本品的功能主治相似，故本研究在苦参碱、氧 （下转第2377页）

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