Page 76 - 《中国药房》2022年19期
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KEYWORDS     Shangkeling spray；high performance liquid chromatography；characteristic chromatogram；matrine；oxymatrine；
          scopoletin；isoazinopyridine


              伤科灵喷雾剂为贵州省苗药特色产品，由抓地虎、                          2 方法与结果
          见血飞、仙鹤草、铁筷子、草乌、山豆根等10味药材组成。                         2.1 溶液制备
          方中抓地虎、铁筷子、山豆根具有清热、消肿的功效                     [1―3] ，  2.1.1  对照品贮备液的制备         分别精密称取苦参碱、氧
          见血飞、马鞭草具有活血化瘀的作用                [4―5] ，草乌抗炎镇痛       化苦参碱对照品各5 mg以及东莨菪内酯、异嗪皮啶对照
                  [6]
                                          [3]
          效果显著 ，白及、仙鹤草可收敛止血 ，莪术、三棱为行                          品各2.5 mg于不同5 mL容量瓶中，加适量甲醇超声（功
                      [7]
          气破血之要药 。成方后的制剂具有清热凉血、活血化                            率210 W，频率40 kHz，下同）5 min使溶解，加甲醇定容，
          瘀、消肿止痛的主治功效，且喷雾剂给药方便，可直接作                           摇匀，制得质量浓度为 1 mg/mL 的苦参碱、氧化苦参碱
          用于损伤部位，在软组织损伤、Ⅱ度烧烫伤、骨伤、湿疹、                          对照品贮备液和质量浓度为 0.5 mg/mL 的东莨菪内酯、
          疱疹等方面临床疗效确切。有效可靠的药品质量控制                             异嗪皮啶对照品贮备液。分别精密量取苦参碱、氧化苦
          是保证药物临床疗效的关键，伤科灵喷雾剂现行法定质                            参碱对照品贮备液各 1 mL 和东莨菪内酯、异嗪皮啶对
          量标准收载于《国家药品监督管理局国家药品标准》                             照品贮备液各 0.5 mL 于同一 5 mL 容量瓶中，加甲醇定
                                              [8]
          [WS-10226（ZD-0226）-2002-2012Z-20180] ，该标准中          容，摇匀，得苦参碱、氧化苦参碱、东莨菪内酯、异嗪皮啶
          薄层鉴别项仅对见血飞和来源于山豆根的苦参碱进行                             质量浓度分别为200、200、50、50 µg/mL的混合对照品贮
          了鉴别，含量测定项仅对苦参碱和氧化苦参碱进行了含                            备液，4 ℃冰箱保存，备用。
          量测定研究。现行标准过于简单，专属性不强，难以全                            2.1.2  供试品溶液的制备          精密量取伤科灵喷雾剂 5
          面控制制剂的内在质量，确保其用药安全和有效性。中                            mL，水浴蒸发除去溶剂，加浓氨水1 mL润湿，然后加入
          药特征图谱具有整体性和模糊性的特点，是一种综合                             三氯甲烷 70 mL，混匀，称质量，超声 30 min，冷却至室
          的、可量化的质量分析方法，能将中药制剂的内在质量                            温，再次称质量，加三氯甲烷补足减失的质量。取三氯
                                                  [9]
          综合地体现出来，在中药质量控制中应用广泛 。为了                            甲烷层，旋转蒸发仪浓缩除去溶剂，残渣加甲醇适量使
          更全面地控制伤科灵喷雾剂的质量，本研究拟采用高效                            溶解；用甲醇润洗 3 次，将溶液及润洗液均转移至 5 mL
          液相色谱（HPLC）法建立伤科灵喷雾剂的特征图谱，并                          容量瓶中，加甲醇定容，摇匀；用 0.22 µm 的微孔滤膜过
          建立同步测定山豆根中苦参碱、氧化苦参碱和铁筷子中                            滤，取续滤液，即得。
          东莨菪内酯、异嗪皮啶4个成分含量的HPLC法，旨在为                          2.1.3  阴性制剂供试溶液的制备             缺山豆根阴性制剂
          伤科灵喷雾剂的质量综合评价提供研究基础。                                及缺铁筷子阴性制剂根据处方量及工艺自制，并按
          1 材料                                               “2.1.2”项下方法制成各阴性制剂供试溶液。
          1.1  主要仪器                                           2.2  色谱条件与系统适用性试验
                                                                             ®
              本研究所用的主要仪器有 UltiMate 3000 型 HPLC                    采用 Ultimate XB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 µm）色
          仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司），ME104/02 型电       谱柱，以乙腈（B）-0.1%磷酸水溶液（A）为流动相进行梯
          子分析天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]，KQ-                        度 洗 脱（0～10 min，5%B；10～30 min，5%B→25%B；
          300DE 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公                          30～33 min，25%B→33%B；33～45 min，33%B；45～60
          司）等。                                                min，33%B→90%B）；检测波长为210 nm；柱温为35 ℃；
          1.2  主要药品与试剂                                        流速为 1.0 mL/min；进样量为 10 μL。分别精密吸取
              11 批伤科灵喷雾剂均由贵州恒霸药业有限责任公                        “2.1”项下混合对照品贮备液、供试品溶液、缺山豆根阴
          司 提 供 ，批 号 分 别 为 19030103、19050102、19060101、        性制剂供试溶液、缺铁筷子阴性制剂供试溶液，按上述
          19080202、19080402、20120101、20120102、20120103、       色谱条件进样测定，记录色谱图。结果，混合对照品贮
          21110101、21110102、21110103，编号S1～S11，规格分别            备液及供试品溶液中4个成分的理论板数均大于10 000，
          为 50 mL/瓶（S1）、70 mL/瓶（S2、S4）、100 mL/瓶（S3、           分离度均大于 1.5，供试品溶液中各色谱峰与混合对照
          S5～S11）；氧化苦参碱对照品（批号 GR-133-151-19，含                 品贮备液中各对应色谱峰的保留时间基本相同，且阴性
          量≥98%）购自南京广润生物制品有限公司；苦参碱对                           样品色谱图在对照品色谱图对应位置上无干扰峰，表明
          照品（批号 wkq21030302，含量≥98%）购自成都彼样生                    本方法的系统适用性较好。结果见图1。
          物科技有限公司；东莨菪内酯对照品（批号CHB201202，                       2.3 HPLC特征图谱的建立
          含量≥95%）、异嗪皮啶对照品（批号CHB210112，含量≥                     2.3.1  精密度试验      精密量取伤科灵喷雾剂（编号 S5）
          95%）均购自成都克洛玛生物科技有限公司；乙腈为色                           5 mL，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下
          谱纯，其余试剂均为分析纯，水为娃哈哈纯净水。                              色谱条件连续进样6次，记录各共有峰的保留时间及峰


          ·2370·   China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 19                                 中国药房    2022年第33卷第19期
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