Page 43 - 《中国药房》2022年19期

1.5 135 150
a
120 IC 50 ＝47.89 μmol/L
蛋白表达水平 0.1 105 100 b
90
0.5
75
0 抑制率/％ 60 细胞存活率/％ 50
45
Huh7 Huh7-SR
细胞 细胞 30
15 （20，10.68）
G6PD
0 0
β-actin 0.1 1 10 100 1 000 对照组 索拉非 6AN+索拉
6AN/（μmol/L） 尼组 非尼组
A.细胞中G6PD蛋白表达水平的检测结果 B. 6AN对Huh7-SR细胞的抑制率与浓度拟合曲线 C.细胞存活率的检测结果
a：与Huh7细胞比较，P＜0.05；b：与索拉非尼组比较，P＜0.01
图2 G6PD对Huh7-SR细胞索拉非尼敏感性的影响结果
3.3 G6PD过表达对Huh7细胞索拉非尼敏感性的影响 PI3K/Akt 信号通路参与了 Huh7-SR 细胞对索拉非尼的
结果 耐药。采用 G6PD 抑制剂 6AN 干预后，Huh7-SR 细胞中
在索拉非尼干预下，与 Huh7-CT 细胞比较，Huh7- PI3K、Akt 蛋白的磷酸化水平均显著降低（P＜0.05），表
G6PD细胞存活率显著升高（P＜0.01），细胞凋亡率显著 明 G6PD 抑制剂能抑制 PI3K/Akt 信号通路的激活。此
降低（P＜0.01），表明 G6PD 过表达降低了 Huh7 细胞对 外，与Huh7-CT细胞比较，Huh7-G6PD细胞中PI3K、Akt
索拉非尼的敏感性。结果见图3。 蛋白的磷酸化水平和 G6PD 表达水平均显著升高（P＜
3.4 G6PD调控肝癌细胞索拉非尼耐药的机制考察结果 0.01），表明G6PD过表达能激活PI3K/Akt信号通路。由
与 Huh7 细胞比较，Huh7-SR 细胞中 PI3K、Akt 蛋白 此可知，G6PD可通过激活PI3K/Akt信号通路诱导Huh7
的磷酸化水平均显著升高（P＜0.05），表明活化后的 细胞索拉非尼耐药。结果见图4。
Huh7-CT细胞 Huh7-G6PD细胞
100 10 7 10 7 40
a Huh7细胞 10 6 6
80 Huh7-SR细胞 10 5 10 5 30
细胞存活率/％ 60 a PI 10 4 3 10 4 3 细胞凋亡率/％ 20 a
10
40
20 a 10 2 10 2 10
10
10
0 10 1 10 1 0
3
4
3
5
5
4
2
1
1
2
3 10 30 10 10 10 10 10 10 6 10 7.2 10 10 10 10 10 10 6 10 7.2 Huh7- Huh7-G6PD
索拉非尼/（μmol/L） FITC CT细胞 细胞
A.细胞存活率的检测结果 B.细胞流式散点图 C.细胞凋亡率的检测结果
a：与Huh7-CT细胞比较，P＜0.01
图3 G6PD过表达对Huh7细胞索拉非尼敏感性的影响结果
p-Akt 56 kDa p-Akt 56 kDa p-Akt 56 kDa
Akt 56 kDa Akt 56 kDa
Akt 56 kDa
p-PI3K 84 kDa p-PI3K 84 kDa
p-PI3K 84 kDa
PI3K 84 kDa PI3K 84 kDa
PI3K 84 kDa
G6PD 60.5 kDa G6PD 60.5 kDa
β-actin 42 kDa β-actin 42 kDa β-actin 42 kDa
Huh7细胞 Huh7-SR细胞 对照组 6AN组 对照组 6AN组
A. 2种细胞中PI3K、Akt蛋白表达的 B. 6AN干预后 Huh7-SR细胞中 C. 2种细胞中PI3K、Akt、G6PD蛋白
电泳图 PI3K、Akt、G6PD蛋白表达的电泳图 表达的电泳图
2.5 1.5 对照组 5
a Huh7细胞 Huh7-CT细胞
Huh7-SR细胞 6AN组 c
2.0 0.1 b b 4 Huh7-G6PD细胞
蛋白磷酸化水平 1.5 a 蛋白磷酸化水平 b 蛋白磷酸化水平 3 2 c
0.1
0.5 0.5 1 c
0 0 0
p-Akt/Akt p-PI3K/PI3K G6PD p-Akt/Akt p-PI3K/PI3K G6PD p-Akt/Akt p-PI3K/PI3K
D. 2种细胞中PI3K、Akt蛋白的磷酸 E. 6AN干预后 Huh7-SR细胞中PI3K、Akt蛋白 F. 2种细胞中 PI3K、Akt蛋白的磷酸化
化水平检测结果 的磷酸化水平和G6PD的表达水平检测结果 水平和G6PD的表达水平检测结果
a：与Huh7细胞比较，P＜0.05；b：与对照组比较，P＜0.05；c：与Huh7-CT细胞比较，P＜0.01
图 4 G6PD 调控肝癌细胞索拉非尼耐药的机制考察结果

中国药房 2022年第33卷第19期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 19 ·2341·