Page 67 - 《中国药房》2022年18期

液对测定无干扰（图略）；藁本内酯的回归方程为 y＝ 表1 归桂混合挥发油在不同辅料中的溶解度（x±s，
2
18 283.01x－329 124.40（R ＝0.999 7），其检测质量浓度 n＝3）
的线性范围为 25～125 μg/mL；精密度、稳定性（12 h）、 辅料 藁本内酯/（mg/mL） 桂皮醛/（mg/mL）
EL-40 5.32±0.04 2.14±0.02
重复性、加样回收率试验的RSD均小于2%。
TW-80 4.19±0.02 1.77±0.01
2.4 桂皮醛的含量测定 RH-40 3.86±0.02 1.47±0.01
2.4.1 色谱条件 色谱条件参考文献[11]：以 Waters CO-40 4.17±0.01 0.78±0.01
乙醇 7.62±0.05 1.65±0.02
Symmetry C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，以乙 PEG400 5.76±0.02 1.32±0.01
腈-0.1%磷酸溶液（34∶66，V/V）为流动相；柱温为25 ℃； PG 3.90±0.01 0.75±0.01
流速为1 mL/min；检测波长为290 nm；进样量为10 μL。 油/TW-80/PEG400的伪三元相图（可形成自微乳的区域
2.4.2 溶液的制备 （1）取桂皮醛对照品20 mg，用乙腈 用黑色表示）。结果（图 1）显示，当以 EL-40 为乳化剂、
溶解并定容于 2 mL 量瓶中，制得桂皮醛质量浓度为 10 乙醇为助乳化剂时，自微乳区域面积最大。同时笔者在
mg/mL的对照品储备液。（2）供试品溶液的配制同“2.3.2 前期研究中发现，当乳化剂和助乳化剂的质量比为1∶9、
（2）”项。（3）取当归挥发油-SMEDDS适量，按“2.3.2（3）” 2∶8、3∶7、4∶6时，只能形成白色的乳浊液体系；而当两者
项下方法制备阴性溶液。 质量比为9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5时，则可形成均一、透明
2.4.3 方法学考察 参照 2020 年版《中国药典》（四部） 的微乳液。因此，本研究确定EL-40为乳化剂、乙醇为助
相关要求进行专属性、线性关系考察和精密度、稳定性、 乳化剂，并结合前期预实验结果进一步将两者质量比的
[9]
重复性、加样回收率试验 。结果显示，供试品中桂皮醛 优化范围缩小为15∶2～9∶1。
色谱峰与相邻色谱峰的分离度均大于 1.5，且阴性溶 0 0
液对测定无干扰（图略）；桂皮醛的回归方程为 y＝ 0.25 0.9 0.25 0.9
2
61 936.90x＋906 046.75（R ＝0.999 8），其检测质量浓度 乙醇/％ 0.50 0.6 EL-40/％ PEG400/％ 0.50 0.6 EL-40/％
的线性范围为20～140 μg/mL；精密度、稳定性（8 h）、重
0.75 0.3 0.75 0.3
复性、加样回收率试验的RSD均小于2%。
1.00 1.00
2.5 乳化剂和助乳化剂的筛选 0 0.3 0.6 0.9 0 0 0.3 0.6 0.9 0
2.5.1 乳化剂和助乳化剂的初筛 取“2.1”项下归桂混 归桂混合挥发油/％ 归桂混合挥发油/％
A.归桂混合挥发油/EL-40/乙醇 B.归桂混合挥发油/EL-40/PEG400
合挥发油 0.5 g，与不同乳化剂（EL-40、TW-80、CO-40、 0 0
RH-40）或助乳化剂（乙醇、PEG400、PG）1 g混合，分别置 0.25 0.9 0.25 0.9
于具塞西林瓶中，涡旋混匀 24 h，以 10 000 r/min 离心 5 乙醇/％ 0.50 0.6 TW-80/％ PEG400/％ 0.50 0.6 TW-80/％
min，取上清液 0.1 mL，用乙腈定容于 10 mL 量瓶中，即
0.75 0.3 0.75 0.3
得归桂混合挥发油溶于不同辅料的样品溶液。取上述
1.00 1.00
样品溶液，分别按“2.3”“2.4”项下方法测定藁本内酯、桂 0 0
0 0.3 0.6 0.9 0 0.3 0.6 0.9
皮醛的含量并按下式计算两者溶解度：溶解度＝藁本内 归桂混合挥发油/％ 归桂混合挥发油/％
C.归桂混合挥发油/TW-80/乙醇 D.归桂混合挥发油/TW-80/PEG400
酯或桂皮醛的质量（mg）/溶剂体积（mL）。取溶解度大
图1 不同体系的伪三元相图
者为目标辅料，每份样品重复3次。结果（表1）显示，藁
本内酯在各辅料中的溶解度依次为乙醇＞PEG400＞ 2.6 AC-SMEDDS处方的优化
EL-40＞TW-80＞CO-40＞PG＞RH-40，桂皮醛在各辅料 结合前期研究和上述实验结果，本研究进一步以油
中的溶解度依次为 EL-40＞TW-80＞乙醇＞RH-40＞ 相（即归桂混合挥发油）占比（A）、乳化剂与助乳化剂质
PEG400＞CO-40＞PG，故初步确定 EL-40、TW-80 为待 量比（B）为因素，以平均粒径（Y1 ）、挥发油含量（即挥发
选乳化剂，乙醇、PEG400为待选助乳化剂。 油在 AC-SMEDDS 中的质量百分比，Y2 ）、乳化时间（Y3 ）
[12]
2.5.2 乳化剂与助乳化剂质量比的筛选 固定归桂混 为指标 ，采用中心复合设计-效应面（central composite
合挥发油、混合乳化剂[乳化剂和助乳化剂的质量比分 design-response surface methodology，CCD）法优化处方，
别为9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5]的总质量为1 g，涡旋混匀， 具体因素与水平见表2。采用层次分析法构建判断矩阵
加水100 mL，考察归桂混合挥发油与混合乳化剂质量比 并利用SPSSAU软件计算得Y1、Y2、Y3的权重系数分别为
为1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5时各体系的分散情况，绘制归 0.29、0.57、0.14，同时得最大特征根为 3，一致性比例因
桂混合挥发油/EL-40/乙醇、归桂混合挥发油/EL-40/ 子为0（＜0.01），提示权重系数赋值合理 。按下式对各
[13]
PEG400、归桂混合挥发油/TW-80/乙醇、归桂混合挥发 指标进行归一化处理：平均粒径的归一值（Y11 ）＝（200－

中国药房 2022年第33卷第18期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 ·2237·