Page 36 - 《中国药房》2022年17期
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清胰合剂（Qingyi mixture，QM）是漯河市中心医院                 以 0.1％磷酸溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱
        消化内科医生根据临床经验总结而成的有效经验方，由                           （0～10 min，11％B；10～20 min，11％B→19％B；20～
        枳实、砂仁、蒲公英、牡丹皮、黄芩、厚朴、地黄、丹参、大                         50 min，19％ B；50～60 min，19％ B→28％ B；60～75
        黄、川芎、陈皮、败酱草共12味中药组成。方中蒲公英能                          min，28％B；75～95 min，28％B→55％B；95～100 min，
        清热解毒、消肿散结，尤善治湿热痈滞，丹参能活血祛                            55％B；100～101 min，55％B→11％B；101～110 min，
        瘀、凉血消痈，二者共为君药。全方理气与行血相合，清                           11％B）；柱温为 35 ℃；流速为 0.6 mL/min；检测波长为
        热与逐瘀共用，共奏逐瘀行血、清热通腑之功。                               254 nm；进样量为10 μL。
            QM 于 2021 年获得河南省医疗机构院内制剂备案                      2.2 溶液的制备
        批准文号（豫药制备字Z20210113000），但其现行质量标                     2.2.1  混合对照品溶液         精密称取绿原酸、阿魏酸、菊
        准仅为简单的薄层鉴别，无法有效反映该制剂的质量水                            苣酸、橙皮苷、黄芩苷、丹酚酸B、黄芩素和丹皮酚对照品
        平。为了有效控制该制剂的质量，笔者拟采用高效液相                            各适量，加甲醇制成质量浓度分别为 1.86、1.79、1.54、
        色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）法    2.14、1.96、2.11、2.26、2.13 mg/mL 的单一对照品贮备
        建立该制剂的指纹图谱，对其进行化学模式识别分析，                            液。精密量取以上各贮备液适量，混匀，制得绿原酸、阿
        同时拟测定该方君药蒲公英中绿原酸、菊苣酸和丹参中                            魏酸、菊苣酸、橙皮苷、黄芩苷、丹酚酸B、黄芩素和丹皮
        丹酚酸 B 等 8 种有效成分的含量，从定性和定量 2 个角                      酚质量浓度分别为 289.877、245.784、117.712、167.384、
        度为QM的质量标准研究提供科学依据。                                  780.605、109.242、200.592、136.521 μg/mL的混合对照品
        1 材料                                                溶液，密闭保存，备用。
                                                            2.2.2 供试品溶液 取15批QM各1 mL，以13 000 r/min
        1.1  主要仪器
                                                            离心3 min，取上清液，即得供试品溶液。
            本研究所用的主要仪器有 1260 型 HPLC 仪（美国
                                                            2.2.3  单味饮片供试液        依据QM制备工艺（药材加10
        Agilent 公司）、SB25-12D 型超声清洗机（宁波新芝生物
                                                            倍量水浸泡40 min后煎煮90 min，再加8倍量水煎煮60
        科技有限公司）、FAUW-120D 型分析天平（日本 Shima-
                                                            min）同法制备丹参、蒲公英、黄芩、牡丹皮等12味中药的
        dzu 公 司）、5810R 型 高 速 离 心 机（德 国 Eppendorf 公
                                                            提取液，再按“2.2.2”项下方法制得各单味饮片供试液。
        司）等。
                                                            2.3  QM指纹图谱研究
        1.2  主要药品与试剂
                                                            2.3.1  精密度试验      取供试品溶液（S1），按“2.1”项下色
            15 批 QM 来 自 漯 河 市 中 心 医 院 ，批 号 分 别 为
                                                            谱条件连续进样测定6次，记录色谱图。以黄芩苷峰（峰
        20200715、20200812、20200908、20201008、20201120、
                                                            14）为参照峰，测得各共有峰相对保留时间的 RSD≤
        20201230、20210202、20200310、20210420、20210610、
                                                            1.1％（n＝6），相对峰面积的RSD≤1.2％（n＝6），表明方
        20210710、20210811、20210909、20211009、20211115，编
                                                            法精密度良好。
        号为 S1～S15，规格均为 100 mL/瓶。 枳实、砂仁、蒲公
                                                            2.3.2  重复性试验      取同一批样品（S1），共6份，分别按
        英、牡丹皮、黄芩、厚朴、地黄、丹参、大黄、川芎、陈皮、败
                                                           “2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件
        酱草药材由漯河市中心医院提供。绿原酸对照品（批号
                                                            进样测定，记录色谱图。以黄芩苷峰（峰 14）为参照峰，
        110753-201817，纯 度 96.8％）、阿 魏 酸 对 照 品（批 号
                                                            测得各共有峰相对保留时间的 RSD≤0.9％（n＝6），相
        110773-201614，纯 度 99.0％）、黄 芩 苷 对 照 品（批 号
                                                            对峰面积的RSD≤1.5％（n＝6），表明方法重复性良好。
        112002-201702，纯 度 98.5％）、黄 芩 素 对 照 品（批 号
                                                            2.3.3  稳定性试验      取同一供试品溶液（S1），分别于室
        111514-201706，纯 度 98.9％）、丹 皮 酚 对 照 品（批 号            温下放置0、3、9、24、48 h时按“2.1”项下色谱条件进样测
        110708-201407，纯度 99.9％）均购自中国食品药品鉴定                  定，记录色谱图。以黄芩苷峰（峰 14）为参照峰，测得各
        研 究 院 ；菊 苣 酸 对 照 品（批 号 DSTDJ003901，纯 度              共有峰相对保留时间的 RSD≤1.2％（n＝5），相对峰面
        98.54％）、橙皮苷对照品（批号 DST200517-038，纯度                  积的 RSD≤1.4％（n＝5），表明供试品液在室温下放置
        98.79％）、丹酚酸 B 对照品（批号 DST190918-009，纯度               48 h内稳定。
        99.28％）均购自成都德斯特生物科技有限公司。乙腈、                         2.3.4  指纹图谱建立及相似度评价             取“2.2”项下15批
        甲醇为色谱纯，均购自美国 Thermo Fisher Scientific 公             供试品溶液（S1～S15）及混合对照品溶液，分别按“2.1”
        司；磷酸为色谱纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司；                           项下色谱条件进样测定，记录色谱图。取S1～S15的色
        水为饮用水或超纯水。                                          谱图，通过《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012
        2 方法与结果                                             版）》建立指纹图谱[设定时间窗宽度 0.1 min，进行多点
        2.1  色谱条件                                           校正和全谱峰匹配生成HPLC指纹图谱，采用中位数法
            采用Agilent SB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），        生成对照指纹图谱（R），图 1]并进行相似度评价。结果


        ·2078 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 17                                 中国药房    2022年第33卷第17期
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