Page 33 - 《中国药房》2022年17期
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（C-16″）。经 SciFinder 在线数据库（http：//scifinder.cas.     验结果，用10％DMSO溶解并配制成质量浓度为40 μg/
        org/）检索查询，最终确定化合物 8 为新天然产物 5，5′-                   mL的溶液，备用。
       （4，7-hexadecadlene-1，16-diyl）bisresorcinol。         2.3.2  细胞活力的检测          采用 MTT 法进行检测。将
        2.2.9  化合物 9   化合物 9 的分子式为 C13H18O3，为黄色            RAW264.7 细胞用完全培养基制成细胞密度为 1×10                   5
        固 体 ；ESI-MS：m/z 221.1[M － H] ；H-NMR（CD3OD，         个/mL 的细胞悬液，然后按 4 000 个/孔的细胞密度接种
                                     －
                                        1
        400 MHz）δ H：6.46（1H，t，J＝2.2 Hz，H-4），6.86（2H，d，     于96孔板中。常规培养12 h后，将细胞分为空白对照组
                                                                                               [15]
        J＝2.2 Hz，H-3和H-5），0.85～0.96（3H，m，H-7′），1.23～       （空白培养基）、脂多糖组（1 µg/mL脂多糖 ）、阳性对照
        1.43（6H，m，H-4′、H-5′和 H-6′），1.66（2H，dd，J＝4.2、       组（1 µg/mL 脂多糖+40 μg/mL 地塞米松）和不同质量浓
        8.2，11.1 Hz，H-3′），2.89（2H，t，J＝7.3 Hz，H-2′）。        度的化合物 1～11 组（1 μg/mL 脂多糖+80、40、20、10、5
        13 C-NMR（CD3OD，100 MHz）δ C：107.4（C-4），108.8（C-2    μg/mL的化合物1～11），每组设置4个复孔；另设不加细
        和 C-6），140.4（C-1），160.0（C-3 和 C-5），203.3（C-1′），    胞只加培养基的调零孔。各组细胞加入药物/空白培
        23.6（C-6′），23.8（C-5′），25.7（C-3′），30.1（C-4′），39.6   养基后，继续培养 24 h，然后加入 10 µL MTT 溶液（5
       （C-2′），14.4（C-7′）。以上波谱数据与文献[12]报道的已                 mg/mL）继续培养4 h，采用全波长酶标仪在450 nm波长
        知化合物基本一致，故鉴定化合物 9 为 1-（3，5-dihy-                   处检测各孔的光密度（OD）值，并计算细胞存活率：细
        droxyphenyl）heptan-1-one。                          胞存活率（％）＝（OD 实 验 组－OD 调 零 孔）/（OD 空 白 对 照 组－
        2.2.10  化合物 10    化合物 10 的分子式为 C13H20O2，为          OD 调零孔）×100％。实验重复 3 次。采用 GraphPad Prism
        紫 色 粉 末 ；ESI-MS：m/z 207.1[M － H]     －  ；H-NMR     8 软件对数据进行统计分析。数据以 x±s 表示，采用单
                                                1
       （CD3OD，400 MHz）δ H：6.08（1H，t，J＝2.2 Hz，H-2），6.12     因素方差分析和 Dunnett 检验进行组间比较；检验水准
       （2H，d，J＝2.2 Hz，H-4 和 H-6），0.83～0.97（3H，m，           α＝0.05。结果见表 1（表 1 中仅展示活性较好的化合物
                                                           的检测结果）。
        H-13），1.22～1.40（10H，m，H-8、H-9、H-10、H-11 和
                                                13
        H-12），2.43（2H，dd，J＝6.7、8.6 Hz，H-7）。 C-NMR          表 1   化合物 2、8～10 对脂多糖诱导 RAW264.7 细胞活
                                                                 性的影响（x±±s，n＝4，％％）
       （CD3OD，100 MHz）δ C：101.1（C-2），146.4（C-5），108.1
                                                            组别             细胞存活率    组别            细胞存活率
       （C-4 和 C-6），159.4（C-1 和 C-3），14.5（C-13），23.8
                                                            空白对照组            100    化合物8（5 μg/mL）组  156.99±14.87
       （C-12），30.4（C-9 和 C-10），32.5（C-8），33.1（C-11），37.1    脂多糖组          165.43±14.30 a  化合物9（80 μg/mL）组  118.18±10.94 b
       （C-7）。以上波谱数据与文献[13]报道的已知化合物基                         阳性对照组         118.67±9.49 b  化合物9（40 μg/mL）组  122.35±11.54 b
                                                            化合物2（80 μg/mL）组  120.34±11.12 b  化合物9（20 μg/mL）组  130.25±8.70 b
        本一致，故鉴定化合物10为5-heptylresorcinol。
                                                            化合物2（40 μg/mL组）  131.09±7.40 b  化合物9（10 μg/mL）组  142.45±9.47 c
        2.2.11  化合物 11    化合物 11 的分子式为 C15H24O2，为           化合物2（20 μg/mL）组  145.68±6.14 c  化合物9（5 μg/mL）组  150.41±9.74c
        白色粉末；ESI-MS：m/z 235.1[M－H] ；H-NMR（CDCl3，            化合物2（10 μg/mL）组  158.23±8.43  化合物10（80 μg/mL）组  117.17±13.28 b
                                         1
                                       －
                                                            化合物2（5 μg/mL）组  162.82±13.20  化合物10（40 μg/mL）组  119.18±8.51 b
        400 MHz）δ H：6.07（1H，t，J＝2.2 Hz，H-2），6.12（2H，d，      化合物8（80 μg/mL）组  118.98±13.14 b  化合物10（20 μg/mL）组  125.48±7.82 b
        J＝2.2 Hz，H-4 和 H-6），0.88（3H，t，J＝6.7 Hz，H-9′），       化合物8（40 μg/mL）组  125.30±8.33 b  化合物10（10 μg/mL）组  137.24±7.05 c
                                                            化合物8（20 μg/mL）组  135.66±10.46 c  化合物10（5 μg/mL）组  147.42±10.85 c
        1.25～1.37（12H，m，H-3′、H-4′、H-5′、H-6′、H-7′和
                                                            化合物8（10 μg/mL）组  149.09±13.73 c
        H-8′），1.53～1.60（2H，m，H-2′），2.43（2H，dd，J＝6.8、
                                                               a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与脂多糖组比较，P＜0.01；c：与
        8.5 Hz，H-1′）。 C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ C：100.9        脂多糖组比较，P＜0.05
                       13
       （C-2），107.9（C-4 和 C-6），146.3（C-5），159.3（C-1 和           由表1可知，与空白对照组比较，脂多糖组细胞的存
        C-3），14.4（C-9′），23.7（C-8′），30.3（C-3′），30.4（C-4′），  活率显著升高（P＜0.01）；与脂多糖组比较，除化合物 2
        30.5（C-5′），30.6（C-6′），32.4（C-2′），33.1（C-7′），37.0   的10、5 μg/mL组和化合物8的5 μg/mL组细胞的存活率
       （C-1′）。以上波谱数据与文献[14]报道的已知化合物基                       下降不显著外（P＞0.05），化合物 2、8、9、10 其余剂量组
        本一致，故鉴定化合物11为5-n-nonylresorcinol。                  细胞存活率均显著下降（P＜0.05或P＜0.01）。
        2.3 化合物11～1111的体外抗炎活性评价                            3 讨论
        2.3.1  溶液的制备 （1）样品溶液：精密称取化合物1～                         紫金牛属植物种类繁多且多具有药用价值，是民间
        11 各 2.0 mg，溶于 10％二甲基亚砜（DMSO）中，配制成                 常用药。目前，该属植物化学成分研究比较多的为朱砂
        质量浓度均为 1 mg/mL 的母液。根据预实验结果，用                       根，从中发现种类最多的成分为朱砂根皂苷类化合
        DMEM 培养基将各化合物的母液稀释成质量浓度分别                          物 。已有研究对纽子果的化学成分进行了研究，从中
                                                             [16]
        为 80、40、20、10、5 μg/mL 的样品溶液，备用。（2）阳性对              发现了苯酚类化合物 。然而有关纽子果的变种长叶
                                                                              [12]
        照品溶液：精密称取地塞米松对照品 2.0 mg，根据预实                       纽子果的化学成分及药理活性研究却鲜有报道。


        中国药房    2022年第33卷第17期                                             China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 17  ·2075 ·
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