Page 135 - 《中国药房》2022年17期
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LPS）部件脂质A上的游离磷酸基团直接结合，从而破坏                             CrrA/B 是一类新发现的可能与多黏菌素耐药机制
        细菌外膜的稳定性，导致菌体破裂、溶解，继而发挥杀菌                          有关的双组分系统，同样由感受器和调控因子组成，其
        作用  [4－6] 。除上述作用机制外，目前还有很多关于多黏                     所介导的多黏菌素耐药机制表现为调节CrrB基因临近
        菌素杀菌机制的假说，包括影响细菌的结构、呼吸作                            的 H239-3059 基因、H239-3062 基因（即 CrrC 基因，与糖
        用、核糖体结合和分裂以及诱导活性氧（reactive oxygen                  基转移相关）来影响LPS修饰 。Cheng等 研究发现，
                                                                                                [11]
                                                                                     [19]
                           [7]
        species，ROS）的产生等 。                                 CrrB 的氨基酸替换会降低肺炎克雷伯菌对多黏菌素的
                                                           敏感性，这是因为 CrrB 基因的突变可诱导 H239-3062
                                                           （即 CrrC）表达，而 CrrC 可通过 PmrA/B 促进 PmrC 和
                                                           PmrHFIJKLM 操纵子的表达，进而使细菌对多黏菌素
                                                           耐药。
                                                               综上，肺炎克雷伯菌对多黏菌素耐药的调控通路主
               A.多黏菌素B                   B.多黏菌素E           要包括 PhoP/Q、PmrA/B、CrrA/B 这 3 类双组分系统，且
                 图1 多黏菌素B、E的化学结构式                          三者之间存在密切联系（三者参与LPS结构修饰的机制
        2 多黏菌素的耐药机制                                        见图2）。
            由于多黏菌素的主要作用靶点是LPS，因此目前大
        多数多黏菌素耐药机制研究主要集中在 LPS 的结构修
            [3]
        饰上 。此外，荚膜多糖过表达、外排泵过表达等机制也
        被证实与耐多黏菌素肺炎克雷伯菌的出现有关                     [8－9] 。基
        于此，本文对这几种耐药机制进行归纳介绍。
        2.1  LPS的结构修饰
        2.1.1  染色体介导的 LPS 结构修饰           肺炎克雷伯菌的
        LPS 结构修饰主要是向脂质 A 添加 4-氨基-L-阿拉伯糖
       （4-amino-4-deoxy-L-arabinose ，L-Ara4N）或磷酸乙醇胺
                                                               +：活化；－：抑制
       （phosphoethanolamine ，pEtN），这 2 种修饰会导致 LPS
                                                                  图2 双组分系统参与LPS修饰的机制
        结构和电位发生改变，从而减少多黏菌素与肺炎克雷伯
        菌的结合    [10－11] 。                                  2.1.2 质粒介导的LPS修饰 除上述集中由染色体介导
            上述2种LPS结构修饰与PmrA/B以及PhoP/Q双组                   的耐药调控基因突变外，革兰氏阴性菌还可通过质粒介
        分信号转导系统激活密切相关。PmrA/B 与 PhoP/Q 均                    导的黏菌素可移动耐药（mobile colistin resistance，mcr）
                                                                                                        [20]
        为跨膜信号转导元件，其中 PhoQ 和 PmrB 为组氨酸激                     基因及其变异体在菌群间的水平传播而获得耐药 。
                                                                   [21]
        酶，可感应外界刺激，从而活化细胞质内的反应调控因                           在 Du 等 第一次发现携带 mcr-1 基因的耐多黏菌素肺
                                                                                             [24]
                                                                              [22]
                                                                                       [23]
        子 。PhoQ、PmrA、PmrB 基因的错义突变导致 PmrA/B                 炎克雷伯菌后，在中国 、意大利 、埃及 等地已有多篇
          [12]
        的活化，从而上调 PmrCAB 和 arnBCADTEF（也称为                   有关mcr基因及其变异体导致细菌对多黏菌素耐药的报
        PmrHFIJKLM）操纵子，进而促进 pEtN 和 L-Ara4N 的合              道，且来源包括了人、动物以及环境样本等。mcr基因的
        成以及向脂质A的转移。其中，pEtN可升高脂质A的电                         独特遗传结构在很大程度上造成了该基因的全球扩散。
        位，L-Ara4N 可直接中和脂质 A 的电荷             [13 － 15] 。另外，     mcr 基因多位于质粒（包括 IncI2、IncHI2、IncX4、
        PhoP/Q 双组分信号转导系统的负反馈调节因子 MgrB                      IncN 等）上，且基因结构中多包含有移动元件 ISApl1。
        基因的突变也被证实可导致细菌对多黏菌素耐药，其原                           mcr 基因具有可传播性，含有与以上几类质粒遗传结构
        因一方面在于 MgrB 对 PhoP/Q 双组分信号转导系统的                    类似的细菌更易于通过质粒结合获得耐药性，这也导致
                                                                                [25]
        抑制作用减弱，导致 eptE（pEtN 转移酶）促使 pEtN 向外                 了耐药菌株的快速扩散 。除 mcr-1 外，在肺炎克雷伯
        膜 3-脱氧-D-甘露糖醛酸残基转移，另一方面 MgrB 的                     菌 中 也 发 现 了 mcr-1 的 等 位 基 因 ，如 mcr-2、mcr-3、
        插入失活（如可移动元件ISKpn14序列）可活化PmrA调                      mcr-7、mcr-8、mcr-9 等 [24，26－28] 。以 mcr-1 为例，其编码的
        控因子，进而促进 L-Ara4N 的合成以及向脂质 A 的转                     pEtN转移酶可催化已合成的pEtN向脂质A磷酸基团转
        移 [16－17] 。PmrD 作为一类连接 PmrA/B 及 PhoP/Q 的信号         移，增加脂质 A 位点的阳离子电荷，从而减少多黏菌素
                                                                                                  [5]
        蛋白，可以阻断经PmrB活化后的磷酸化PmrA的固有去                        与LPS的结合，进而导致细菌对多黏菌素耐药 。
        磷酸化，从而促进PmrA下游基因的转录与表达，最终加                         2.2 荚膜多糖的过表达
                                                                        [29]
                               [18]
        强LPS结构修饰，导致耐药 。                                        Campos等 研究发现，当肺炎克雷伯菌暴露于多黏
        中国药房    2022年第33卷第17期                                             China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 17  ·2173 ·
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