Page 55 - 《中国药房》2022年16期
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from different habitats,the contents of the first 3 components in L. sinense from Ruichang are the highest,and the content of
E-ligustilide in samples from De’an is the highest.
KEYWORDS Ligusticum sinense;fingerprint;multivariate statistical analysis;content determination;quality evaluation;HPLC
伞形科植物茶芎Ligusticum sinense Oliv. cv. Chaxiong 63644-62-2,纯度≥98%)、洋川芎内酯 A 对照品(批号
为一年生草本植物,以根茎入药,主产于我国江西武宁、 Y08301903021,纯度≥98%)、洋川芎内酯Ⅰ对照品(批
瑞昌、德安等地。据《江西省中药材标准》记载,茶芎味 号 Y08501904030,纯度≥98%)、Z-藁本内酯对照品(批
辛、性温,归肝、心经,有活血行气、祛风止痛的功效,可 号 PCS-201104,纯度≥98%)均购自北京中科质检生物
用于月经不调、痛经、闭经、产后瘀阻腹痛、胸胁刺痛、头 技术有限公司;阿魏酸对照品(批号 110773-201915,纯
[1]
痛、风湿痹痛等 。现代研究表明,茶芎主要含有苯酞 度≥99.4%)购自中国食品药品检定研究院;乙腈为色谱
类、有机酸类、多糖类、氨基酸类和挥发油等成分。其 纯,甲醇、磷酸为分析纯,水为超纯水。
中,苯酞类物质包括洋川芎内酯Ⅰ、洋川芎内酯 A 和藁 12 批茶芎药材分别采自江西武宁、瑞昌、德安的 3
本内酯等,均有较好的抗炎、镇痛作用,尤以藁本内酯的 个中药基地,经江西中医药大学药学院付小梅教授鉴定
作用最为显著;有机酸类物质包括绿原酸、阿魏酸等,绿 均为茶芎 L. sinense Oliv. cv. Chaxiong 的成熟根茎。将
原酸可调节机体物质代谢、降低胆固醇,还具有抗氧化、 所采药材放至 55 ℃烘箱中烘干,粉碎,过四号筛,密封
抗菌作用,阿魏酸有抗血栓形成、促进血管舒张、延缓动 保存,备用。12批茶芎药材样品的来源信息见表1。
脉粥样硬化的作用 [2-6] 。可见,上述成分可能是茶芎的 表1 12批茶芎药材样品的来源信息
活性成分。 编号 产地 采集时间 编号 产地 采集时间
目前,关于中药质量评价和质量控制研究多集中于 S1 江西武宁 2021年7月 S7 江西瑞昌 2021年7月
S2 江西武宁 2021年7月 S8 江西瑞昌 2021年7月
单一或少数成分的定量分析,难以全面、客观地对药材
S3 江西武宁 2021年7月 S9 江西德安 2021年5月
进行评价,因此需要建立全面、有效的质量评价方法。中 S4 江西武宁 2021年7月 S10 江西德安 2021年5月
药指纹图谱能快速反映其化学成分信息,定性判断其真 S5 江西武宁 2021年7月 S11 江西德安 2021年5月
S6 江西瑞昌 2021年7月 S12 江西德安 2021年5月
实性;多元统计分析[聚类分析(cluster analysis,CA)、主成
分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小 2 方法与结果
二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discrimi- 2.1 茶芎药材HPLC指纹图谱的建立
nant analysis,OPLS-DA)]可对已有的化学成分信息进行 2.1.1 色谱条件 以 Venusil MP C18 (250 mm×4.6 mm,
定量评价 [7-10] 。可见,中药指纹图谱与多元统计分析相 5 μm)为色谱柱,以 0.1%磷酸溶液(A)-乙腈(B)为流动
结合,可全面、有效地对药材进行质量评价和质量控 相进行梯度洗脱(0~10 min,10%B→15%B;10~13
制。基于此,本研究拟采用高效液相色谱(HPLC)法建 min,15%B;13~23 min,15%B→20%B;23~26 min,
立12批茶芎药材的指纹图谱并进行相似度分析;同时, 20%B;26~36 min,20%B→30%B;36~39 min,30%B;
拟采用 CA、PCA、OPLS-DA 法对所得图谱信息进行分 39~47 min,30%B→40%B;47~53 min,40%B→55%B;
析,筛选影响药材质量的差异性成分并对其进行含量测 53~60 min,55%B→65%B;60~75 min,65%B);检测
定,旨在为全面进行茶芎质量评价和质量控制提供 波长为 280 nm;流速为 1.0 mL/min;柱温为 30 ℃;进样
参考。 量为10 μL;检测平衡时间为20 min。
1 材料 2.1.2 混合对照品溶液的制备 取绿原酸、阿魏酸、洋
1.1 主要仪器 川芎内酯A、洋川芎内酯Ⅰ、阿魏酸松柏酯、E-藁本内酯、
本文所用主要仪器包括 LC-20AT 型 HPLC 仪(日本 Z-藁本内酯对照品各适量,分别置于10 mL棕色量瓶中,
Shimadzu 公司)、LT-DHC160 型高速离心机[立德泰勀 加70%甲醇溶解并定容,即得各单一对照品贮备液。分
(上海)科学仪器有限公司]、KQ-200KDB 型高功率数控 别取上述各单一对照品贮备液适量,置于同一10 mL棕
超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、MS205DU 色量瓶中,加 70%甲醇定容,制成上述成分质量浓度分
型电子分析天平[梅特勒托利多科技(中国)有限公 别为 56.3、42.5、40.5、53.9、33.7、23.1、96.1 μg/mL 的混合
司]等。 对照品溶液。
1.2 主要药品与试剂 2.1.3 供试品溶液的制备 取茶芎样品粉末约0.5 g,精
E-藁本内酯对照品(批号 Z812557,纯度≥98%)购 密称定,置具塞锥形瓶中,加70%甲醇25 mL,称定质量,
自上海楷森生物科技有限公司;绿原酸对照品(批号 超声(功率200 W,频率40 kHz)提取30 min,放冷,再次称
327-97-9,纯度≥98%)、阿魏酸松柏酯对照品(批号 定质量,用 70%甲醇补足减失的质量,摇匀,以 13 000
中国药房 2022年第33卷第16期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16 ·1969 ·