Page 52 - 《中国药房》2022年16期

2.7 6种成分的含量与抗氧化活性的相关性分析 3.2 混合对照品溶液稳定性的考察
2.7.1 灰色关联度分析 采用Excel 2010软件，对23批 本研究预实验考察了混合对照品溶液在 5 d 和 2、3
地稔药材中6种成分的含量与抗氧化活性进行灰色关联 个月内的稳定性。结果显示，没食子酸、原儿茶酸、异牡
度分析。结果显示，没食子酸、原儿茶酸、牡荆素、异牡 荆素、芦丁溶液放置3个月的fs/i的RSD均小于3.00％，表
荆素、芦丁、鞣花酸含量与抗氧化活性的关联系数均大 明稳定性较好；鞣花酸溶液在上述 3 个时间段的 fs/i 的
于 0.6，表明关联度较高 。6 种成分对 DPPH 自由基清 RSD 分别为 2.36％、3.70％、7.00％，表明稳定性相对较
[13]
除率贡献大小顺序为异牡荆素＞鞣花酸＞牡荆素＞ 差。由于鞣花酸同时含有亲脂结构（4个环）和亲水结构
芦丁＞原儿茶酸＞没食子酸，对ABTS自由基清除率贡 （4 个酚基和 2 个内酯环），导致其亲水性及亲脂性均较
献大小顺序为异牡荆素＞芦丁＞牡荆素＞鞣花酸＞原 差，微溶于水和醇，溶于二甲基亚砜，故制备鞣花酸对照
品溶液时需加适量二甲基亚砜助溶 。本研究还发现，
[14]
儿茶酸＞没食子酸，对 FRAP 值贡献大小顺序为异牡
鞣花酸的 fs/i会随放置时间延长而增大，故不宜保存过
荆素＞牡荆素＞芦丁＞鞣花酸＞原儿茶酸＞没食子
久，尽量在5 d内测定。
酸。结果见表5。
3.3 地稔中6种成分的抗氧化活性分析
表 5 地稔中 6 种成分含量与抗氧化活性的灰色关联
酚类化合物中羟基的数量、位置、相关的糖基化以
系数
及其他取代基在很大程度上决定了其自由基清除活性，
成分 DPPH自由基清除率 ABTS自由基清除率 FRAP值
没食子酸 0.749 8 0.727 6 0.730 7 其中邻二羟基是所有酚类化合物显示出高活性最重要
[15]
原儿茶酸 0.768 3 0.749 0 0.745 8 的结构特征 。黄酮类化合物骨架中2，3-双键、4-酮基、
牡荆素 0.796 1 0.784 6 0.801 2 3′，4′-邻二酚羟基和C-3位羟基结构对抗氧化活性起重
异牡荆素 0.866 9 0.851 2 0.857 4 [16－17]
芦丁 0.787 9 0.793 0 0.800 6 要作用 。已有研究报道，鞣花酸、没食子酸对地稔
鞣花酸 0.804 3 0.778 8 0.782 9 抗氧化活性贡献显著，原因可能与其含量及结构中邻二
[3]
2.7.2 双变量相关性分析 采用SPSS 25.0软件进行双 酚羟基有关 。灰色关联度分析结果显示，6种成分的含
变量相关性分析。结果显示，牡荆素、异牡荆素、芦丁含 量与抗氧化活性均有较高关联度，其中异牡荆素与抗氧
量与DPPH自由基清除率呈显著正相关（P＜0.05或P＜ 化活性关联度最高，没食子酸与抗氧化活性关联度最
0.01），原儿茶酸含量与DPPH自由基清除率呈显著负相 低；双变量相关性分析结果显示，芦丁与抗氧化活性相
关（P＜0.05）。在 ABTS 自由基清除率和 FRAP 值分析 关性最显著，而鞣花酸与抗氧化活性无显著相关性。这
中，牡荆素、异牡荆素、芦丁含量与抗氧化活性呈显著正 一结果差异可能是因为制备的地稔供试品溶液未经水
相关（P＜0.05 或 P＜0.01），没食子酸、原儿茶酸含量与 解，致使没食子酸含量偏低，而鞣花酸理化性质特殊，单
抗氧化活性呈显著负相关（P＜0.05）。结果见表6。 纯使用75％甲醇提取率较低所致。
表6 地稔中6种成分含量与抗氧化活性的双变量相关 综上所述，本研究成功建立了QAMS法同时测定地
系数 稔中6种成分的含量，测定结果与外标法无显著差异；地
稔中6种成分与抗氧化活性均有较高相关性。
成分 DPPH自由基清除率 ABTS自由基清除率 FRAP值
没食子酸 －0.342 －0.515 a －0.467 a 参考文献
原儿茶酸 －0.459 a －0.460 a －0.463 a [ 1 ] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草：9[M].
牡荆素 0.475 a 0.437 a 0.530 b 上海：上海科学技术出版社，1999：628.
异牡荆素 0.502 a 0.414 a 0.500 a
芦丁 0.642 b 0.606 b 0.659 b [ 2 ] 明惠仪，麻秀萍，杨菁，等.民族药地稔研究的现状分
鞣花酸 0.340 0.544 0.241 析[J].中国实验方剂学杂志，2018，24（11）：228-234.
a：P＜0.05；b：P＜0.01 [ 3 ] TONG Y P，JIANG Y，CHEN X B，et al. Extraction，
3 讨论 enrichment，and quantification of main antioxidant agly-
3.1 供试品溶液制备条件及检测波长的筛选 cones of flavonoids and tannins from Melastoma dodecan-
本研究预实验对供试品溶液的制备条件[提取方式 drum lour.：guided by UPLC-ESI-MS/MS[J]. J Chem，
2019，2019：2793058.
（回流、超声）和甲醇体积分数（25％、50％、75％、100％）]
[ 4 ] 麻秀萍，张明昶，徐文芬，等.黔产地稔药材中没食子酸和
进行了比较，并对不同检测波长进行了考察。以6种成
芦丁含量的测定与评价[J].贵州农业科学，2012，40（4）：
分的提取率为指标，综合优选采用75％甲醇回流提取制 59-62.
备供试品溶液。6种成分在254 nm和260 nm波长下均有 [ 5 ] 曹丹，姜岩，林瑞超，等. HPLC法测定地菍药材中牡荆素
较大吸收，牡荆素和异牡荆素在260 nm波长下较254 nm 和异牡荆素的含量[J].世界科学技术-中医药现代化，
波长下响应值高，因此选择检测波长为260 nm。 2015，17（5）：1012-1015.

·1966 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16 中国药房 2022年第33卷第16期