Page 37 - 《中国药房》2022年16期
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effective fraction groups were significantly decreased （P＜0.05）. CONCLUSIONS The mechanism of Xiongma decoction in
        preventing and treating migraine with hyperactivity of liver-yang and blood stasis may be related to inhibit the activity of
        TRPV1-CGRP/CGRP receptor signaling pathway in TCC.
        KEYWORDS     Xiongma decoction；effective fraction；hyperactivity of liver-yang；migraine of blood stasis；transient receptor
        potential vanilloid 1；calcitonin generelated peptide


            芎麻汤源于《圣济总录》的大芎丸，由川芎（一斤）、                       （以 C26H26F2N2计）]购自西安杨森制药有限公司；二氨基
        天麻（四两）组成。方中川芎主入肝胆经，行气开郁，活                          联苯胺（DAB）显色试剂盒（货号 ZLI-9018）购自北京中
        血、祛风、止痛，善治头痛，自古有“头痛不离川芎”之说；                        杉金桥生物技术有限公司；超敏化学发光（ECL）液（货
        天麻专入肝经，平肝息风，通络止痛，主治头风头痛，为                          号 K-12045-D50）购自美国 Advansta 公司；兔 TRPV1 抗
        治头痛要药。芎麻汤可平肝息风、活血止痛、祛风通络，                          体、山羊 CGRP 抗体（货号分别为 ab6166、ab36001）均购
        主治“偏正头痛、头风眩晕、目系眩急、身体拘倦”，为临                         自英国 Abcam 公司；兔 CRLR 抗体（货号 A11979）购自
        床治肝阳上亢头痛证、瘀血头痛证或瘀血挟肝阳上亢头                           美国 Abclonal 公司；兔 RAMP1 抗体、小鼠β-肌动蛋白
        痛证之基础方      [1－2] 。本课题组前期研究已发现，芎麻汤                 （β-actin）抗体、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球
        有效部位（乙酸乙酯及正丁醇提取部位）能降低偏头痛                           蛋白G（IgG）二抗（R）、辣根过氧化物酶标记的山羊抗小
        模型大鼠三叉神经颈髓复合体（trigeminal cervical spi-             鼠 IgG 二抗（M）（货号分别为 10327-1-AP、66009-1-Ig、
        nal complex，TCC）内降钙素基因相关肽-降钙素受体样                   SA00001-1、SA00001-2）均购自美国 Proteintech 公司；
        受体/活性修饰蛋白受体 1（calcitonin generelated pep-          TRPV1、CGRP、CRLR、RAMP1 的 PCR 引物序列由生工
        tide-calcitonin receptor-like receptor/receptor-associated  生物工程（上海）股份有限公司合成（见表 1）；其余试剂
        membrane proteins 1，CGRP-CRLR/RAMP1）信号通路的          均为分析纯或实验室常用规格。
        活性，减少CGRP的释放，缓解偏头痛；芎麻汤不同提取                                        表1    PCR引物序列
        物能下调新生大鼠三叉神经节神经元瞬时受体电位香                             基因  上游（5′→3′）          下游（5′→3′）         引物长度/bp
        草 酸 亚 型 1（transient receptor potential vanilloid 1，  TRPV1 AACTTTGCCCTGGTTCCCCTT  CAAAGACCCCGCATTGATCCCT  187
                                                            CGRP ATAGCCCCAGAAAGAAGGTTACACA ACAACACGATGCACAATAGCCAAC  199
                     [3－4]
        TRPV1）的表达       。同时有研究发现，在偏头痛三叉神
                                                            CRLR ACTGCCCCACTGAACACT  CATTTGAGGGCTTTCTTCATGGTA  200
        经系统中，TRPV1激活会导致C纤维释放CGRP；随后，                        RAMP1 CCTCTGCCCTTTCATTGTGCTC  GGACACCTACACGATGCCCTC  100
        CGRP作用于A 纤维表面的CRLR和RAMP1[二者统称                       β-actin ACATCCGTAAAGACCTCTATGCC  TACTCCTGCTTGCTGATCCAC  223
                     δ
        为 CGRP 受体（CGRP receptor，CGRP-R）]，导致三叉神             1.3  动物
                          [5]
        经系统敏化引起头痛 。基于此，本研究团队推测芎麻                               SPF级雄性SD大鼠70只，体质量220～250 g，购自
        汤可能通过干预 TRPV1- CGRP/CGRP-R 信号通路防治                  湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实验动物使用许可
        偏头痛。本实验采用附子汤灌胃联合电刺激三叉神经                            证号为 SYXK（湘）2015-0016，生产许可证号为 SCXK
        节复制肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型，以探讨芎麻汤有                           （湘）2019-0004。本动物实验研究符合中国伦理委员会
        效部位对该模型大鼠 TCC 内 TRPV1-CGRP/CGRP-R 信                有关动物研究指导原则。
        号通路的影响，为芎麻汤治疗偏头痛的临床及作用机制                           2 方法
        研究提供实验依据。                                          2.1  药物提取
        1 材料                                                   附子汤（批号20191110）制备方法：取制附子饮片20
        1.1  主要仪器                                          g，加2倍量水（mL/g）浸泡30 min，煎煮2次，过滤，合并药
            本研究所用主要仪器有 ALC-H 型脑立体定位仪                       液后蒸发浓缩至质量浓度为2 mg/mL的药液（以生药计）。
       （江苏赛昂斯生物科技有限公司），YD-315 型轮转式切                            芎麻汤有效部位（批号20191220）制备方法：取川芎
        片机（金华市益迪医疗设备有限公司），BA410-T型生物                       饮片2 kg、天麻饮片0.5 kg，依次以8倍量（mL/g）、6倍量
        显微镜（麦克奥迪实业集团有限公司），DYY-6C 型电泳                       （mL/g）水煎煮 2 次，合并滤液并浓缩至 10 L 后，依次采
        仪（北京六一生物科技有限公司），PIKOREAL96型荧光                      用等体积乙酸乙酯、正丁醇萃取（每种溶剂重复萃取 3
        定 量 PCR 仪（美 国 Thermo Fisher Scientific 公 司），       次），分别得到乙酸乙酯、正丁醇提取物，经旋转蒸发仪
        YLS-9A型生理、药理电子刺激仪（北京冀诺泰科技发展                        回收有机溶剂、水浴挥干、烘箱烘干后，得乙酸乙酯提取
        有限公司）等。                                            物26.46 g、正丁醇提取物55.19 g。
        1.2  主要药品与试剂                                       2.2 动物分组及给药剂量
            制附子、川芎、天麻饮片（批号分别为 1912068、                         70只大鼠按体质量随机分为7组：正常组，模型组，
        20061、200301）均购自长沙老百姓大药房；盐酸氟桂利                     阳性对照组（盐酸氟桂利嗪胶囊 0.9 mg/kg，根据成人临
        嗪胶囊[国药准字 H10930003，批号 KFJ3S2S，规格 5 mg              床剂量换算而得的等效剂量），芎麻汤乙酸乙酯提取物


        中国药房    2022年第33卷第16期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16  ·1951 ·
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