Page 34 - 《中国药房》2022年16期

A B C
a
a
400 a
a
TRAP阳性细胞/个 200
300
100
0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
D E F
A：对照组显微图（×200）；B：模型组显微图（×200）；C：MT-2 提取物低质量浓度组显微图（×200）；D：MT-2 提取物中质量浓度组显微图
（×200）；E：MT-2提取物高质量浓度组显微图（×200）；F.各组破骨细胞数量柱形图；Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：MT-2提取物低质量浓度组；Ⅳ：MT-2
提取物中质量浓度组；Ⅴ：MT-2提取物高质量浓度组；a：组间比较，P＜0.05
图4 MT-2提取物对破骨细胞分化和数量的影响

[11]
明显的破骨细胞分化现象；而各药物组多为体积较小的 酶 1 通路来抵抗地塞米松诱导的成骨细胞凋亡 ；松脂
单核圆形细胞，且 TRAP 染色不明显，说明 MT-2 提取物 醇二葡萄糖苷可促进骨细胞的增殖 ；皂苷类成分可通
[12]
具有抑制破骨细胞分化的作用。 过促进血管新生来发挥抗骨质疏松作用 ；羟基红花黄
[13]
对破骨细胞进行计数，考察不同组别破骨细胞的增 色素 A 可增强成骨细胞活性，并可促进骨矿化的发
殖情况；同时，采用SPSS 19.0软件对各组破骨细胞数量 生 。结合网络药理学结果可认为，本研究以绿原酸等
[14]
进行单因素方差分析和 Bonferroni 检验，检验水准α＝ 7种成分作为提取工艺评价指标，既可体现成分-药效的
0.05。结果（图 4F）显示，与对照组比较，模型组破骨细 相关性，又有助于全面地评价提取工艺优劣。
胞数量显著增多（P＜0.05）；与模型组比较，各药物组破 此外，本研究采用的Box-Behnken设计-响应面法不
骨细胞数量均显著减少（P＜0.05），且这种抑制作用有
局限于“点对点”优化，可直观阐释多种因素的交互作
随药物质量浓度增加而增强的趋势。
用 [15－16] 。结果显示，各因素对综合评分的影响依次为 C
3 讨论
（提取时间）＞A（乙醇体积分数）＞B（料液比）。究其原
以往对于蒙药提取工艺的优化多以单因素和正交
因，笔者认为可能与药材中有效成分的溶出度、溶胀度、
实验设计为主，对工艺优劣评价也多以单一成分或少数
溶解性有关；同时，由于有效成分的溶出度随时间延长
成分的含量为指标，未能有效关联成分含量与药物疗
而变化明显，因此提取时间对提取的影响更为显著；而
效 [5，7－8] ，无法全面体现蒙药复方“多成分、多靶点整合起
溶胀度随水醇比例变化的速率高于溶解度随料液比变
效”的作用特点。网络药理学是在多向药理学和系统生
化的速率，因此乙醇体积分数对提取效果的影响大于料
物学快速进步的基础上发展而来的一门从网络层面观
液比。
[9]
察药物对疾病影响的新学科 ，将其用于预测蒙药复方
破骨细胞介导的骨吸收与成骨细胞介导的骨形成
的有效成分既能解决成分-疗效脱节难题，也能节省各
失衡是骨质疏松的主要发病原因 [17－18] 。其中，RANKL
单一成分药效评价的实验成本。故本研究采用网络药
介导的破骨细胞功能失调在绝经后骨质疏松中的关键
理学方法预测 MT-2 的有效成分，并以各成分的度值来
赋予指标权重，不仅可综合考察 MT-2 成分与疾病靶点 作用已被证实 [19－20] 。因此，抑制过度激活的破骨细胞分
的相关性，而且可均衡评估各信息的实际重要程度，确 化是抗骨质疏松的重要途径，也是相关药物治疗效果体
[10]
保综合评价结果的合理性、科学性 。随后，本研究通 外评价的重要指标。本研究结果显示，RAW264.7 细胞
过药效学实验验证了最优工艺所得MT-2提取物的有效 经 RANKL 诱导后，出现了大量的 TRAP 染色阳性多核
性，初步构建了“成分-工艺-药效”的关联网络。 细胞，即破骨细胞；而给予按最优工艺制备的MT-2提取
经查阅文献发现，本研究经网络药理学筛选所得 7 物后，破骨细胞数量明显减少，提示该提取物可抑制
种有效成分中的 5 种在骨质疏松治疗领域具有一定活 RANKL诱导的破骨细胞分化，且随着给药剂量的增加，
性：绿原酸可通过激活核因子E2相关因子2/血红素加氧 破骨细胞数量随之减少，有一定的剂量依赖趋势。

·1948 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16 中国药房 2022年第33卷第16期