Page 26 - 《中国药房》2022年14期

2.2.2 质谱条件 离子源为电喷雾离子源（electron spray 2.3.3 精密度试验 称取八味小檗皮胶囊内容物（批号
ionization，ESI），正、负离子模式下选择多重反应监测 20190502），按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按
（multiple reaction monitoring，MRM）模式测定各成分含 “2.2”项下色谱与质谱条件于同日内连续进样测定6次，
量；毛细管电压分别为 4 000 V（+）、2 500 V（－）；干燥 记录峰面积。结果显示，木兰花碱、小檗碱、蟾蜍色胺、
气为氮气，干燥气流速为 11 L/min，温度为 300 ℃，压力 阿魏酸 4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等 25 种成分峰面积的
为 15 psi；碰撞气为高纯氮气。详细的质谱参数信息见 RSD均小于3.00％（n＝6），说明仪器精密度较好。

表 1。 2.3.4 重复性试验 取八味小檗皮胶囊内容物（批号
表1 25种成分的质谱参数 20190502），共6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，
再按“2.2”项下色谱与质谱条件进样测定，记录峰面积并
化学成分 母离子m/z 子离子m/z 碎裂电压/V 碰撞能量/eV 电离模式
木兰花碱 342.1 264.9 130 24 + 按标准曲线法计算样品含量。结果显示，木兰花碱、小
药根碱 338.0 322.0 140 27 + 檗碱、蟾蜍色胺、阿魏酸 4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等 25 种
小檗碱 336.0 320.1 135 27 +
巴马汀 351.9 336.0 145 32 + 成分含量的RSD均小于3.00％（n＝6），说明方法重复性
蟾蜍色胺 205.1 160.0 90 8 + 较好。
蟾蜍特尼定 219.0 160.0 100 7 + 2.3.5 稳定性试验 取八味小檗皮胶囊内容物（批号
胡椒碱 286.0 201.0 155 16 +
甘草酸 823.3 453.1 150 7 + 20190502），按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，于室温
阿魏酸 193.0 134.0 90 10 － 下放置 0、2、4、8、10、12、24 h 后按“2.2”项下色谱与质谱
阿魏酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 355.1 193.2 130 6 －
羟基红花黄色素A 611.1 490.7 160 32 － 条件进样测定，记录峰面积。结果显示，木兰花碱、小檗
绿原酸 353.1 191.0 90 8 － 碱、蟾蜍色胺、阿魏酸 4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等 25 种成
没食子酸 169.0 124.9 120 12 － 分峰面积的RSD均小于3.00％（n＝7），说明供试品溶液
诃子鞣酸 953.1 301.0 270 36 －
柯里拉京 633.0 300.8 180 32 － 于室温下放置24 h内稳定性较好。
鞣花酸 300.9 144.9 170 40 － 2.3.6 加样回收率试验 取已知含量的八味小檗皮胶
甘草素 255.0 119.1 130 13 － 囊内容物（批号 20190502），共 6 份，每份约 0.05 g，精密
甘草苷 417.2 255.0 160 13 －
芦丁 609.1 299.9 220 34 － 称定，按已知含量的 100％加入各单一对照品溶液，按
槲皮素 300.9 150.9 140 25 － “2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2”项下色谱与
甘氨胆酸 464.4 74.1 190 42 －
胆酸 407.3 407.4 250 10 － 质谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率。结
甘氨鹅脱氧胆酸 448.2 74.2 190 41 － 果显示，木兰花碱、小檗碱、蟾蜍色胺、阿魏酸 4-O-β-D-
甘氨脱氧胆酸 448.3 74.0 180 40 － 吡喃葡萄糖苷等 25 种成分的加样回收率均在 80％～
熊去氧胆酸 391.3 391.2 220 5 －
115％之间，RSD均小于3.00％（n＝6），表明该方法准确
2.3 方法学考察
可靠。
2.3.1 专属性考察 取“2.1”项下各单一对照品母液及
2.4 样品含量测定
供试品溶液（批号 20190502），以 70％甲醇作为空白溶
取 3 批八味小檗皮胶囊内容物约 0.1 g，精密称定，
液，按“2.2”项下色谱与质谱条件进样，记录色谱图。结
按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，各批样品平行制备
果显示，空白溶液对所测成分无干扰，且供试品溶液中
3 份，按“2.2”项下色谱与质谱条件进样测定，记录峰面
25种成分的出峰时间与对照品溶液中的基本一致，说明
积并按标准曲线法计算样品含量。结果显示，木兰花
该方法专属性较好。木兰花碱、小檗碱、蟾蜍色胺、阿魏
碱、药根碱、小檗碱、巴马汀、蟾蜍色胺、蟾蜍特尼定、胡
酸 4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等 8 种成分的 MRM 色谱图见
椒碱、甘草酸、阿魏酸、阿魏酸 4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、
图1（其余成分的MRM色谱图略去）。 羟基红花黄色素 A、绿原酸、没食子酸、诃子鞣酸、柯里
2.3.2 线性关系考察及定量限、检测限测定 精密量取 拉京、鞣花酸、甘草素、甘草苷、芦丁、槲皮素、甘氨胆酸、
“2.1.1”项下混合对照品溶液适量，用甲醇稀释成系列工 胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、熊去氧胆酸的含
作溶液。取上述系列工作溶液和混合对照品溶液，按 量分别为 16.94～20.82、3.78～5.17、9.11～11.43、0.24～
“2.2”项下色谱与质谱条件进样，记录峰面积。以各待测 0.30、0.20～0.39、0.74～1.16、0.79～0.89、3.26～3.35、
成分质量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线 0.48～0.66、11.96～13.35、2.30～3.12、0.19～0.21、6.07～
性回归。以峰高信号为基线噪音信号的 10 倍测定定量 8.83、10.42～10.48、1.43～1.64、4.17～4.76、0.14～0.15、
限，以峰高信号为基线噪音信号的3倍测定检测限。结 0.46～0.52、0.04、0.01、0.59～0.63、0.20～0.23、0.02、
果见表2。 0.15～0.16、0.01 mg/g。结果见表3。

·1684 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 14 中国药房 2022年第33卷第14期