Page 31 - 《中国药房》2022年14期
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素、槲皮素、槲皮苷和紫云英苷等成分                [5－6] 。其中，没食      于广西不同产地，经广西中医药大学药学院滕建北教授
        子酸乙酯、槲皮素、木犀草素和山柰酚可通过抑制α-葡                          鉴定为无患子科植物龙眼 D. longan Lour.的叶。8 批龙
        萄糖苷酶的活性，而发挥降血糖的作用 ；没食子酸和原                          眼叶药材来源信息见表1。
                                         [5]
        儿茶酸等酚酸类成分具有抗氧化活性                [7－9] 。这表明龙眼                  表1 8批龙眼叶药材来源信息

        叶的活性成分为黄酮类和酚酸类成分。虽然本课题组                             编号   产地    采集时间    批号   编号   产地   采集时间    批号
        前期已测定了龙眼叶中黄酮类成分的含量，但指标成分                            S1  广西贺州 2019年11月  20191101  S5  广西南宁 2019年11月  20191105
                                                            S2  广西柳州 2019年11月  20191102  S6  广西横州 2019年11月  20191106
        主要为槲皮素、木犀草素、山柰酚等成分 ，单一指标并                           S3  广西梧州 2019年11月  20191103  S7  广西平南 2019年11月  20191107
                                           [10]
        不能系统全面地反映龙眼叶的质量。因此以黄酮类和                             S4  广西钦州 2019年11月  20191104  S8  广西北海 2019年11月  20191108
        酚酸类成分作为考核指标，可以对龙眼叶提取工艺进行                           2 方法与结果
        更全面的评价。                                            2.1 没食子酸等成分的含量测定
            Box-Behnken响应面法能直观反映各影响因素之间                    2.1.1  混合对照品溶液的制备            分别精密称取没食子
        的交互关系，可对多因素、多水平结果进行分析，具有实                          酸、原儿茶酸、没食子酸乙酯、槲皮素、木犀草素和山柰
                                          [11]
        验次数相对较少、检测精确度高等优点 ；同时其可通                           酚对照品适量，用甲醇溶解并定容，制成上述各成分质
        过对各因素的显著性及相互作用进行分析，确定工艺条                           量浓度分别为 204.00、17.46、21.30、235.40、6.30、65.70
                    [12]
        件的最佳组合 。目前，有关龙眼叶提取工艺的研究较                           µg/mL的混合对照品溶液。
        少，主要为龙眼叶中总黄酮的提取工艺研究                   [13－14] 。基于  2.1.2  供试品溶液的制备          取龙眼叶药材粉末 2 g，精
                              [15]
        此，在前期研究的基础上 ，本研究采用高效液相色谱                           密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入乙醇-盐酸（体积
                                                                               [3]
       （high performance liquid chromatography，HPLC）法同时    比为 9 ∶ 1，下同）16 mL ，称定质量，水浴提取 90 min，
        测定了龙眼叶中没食子酸、原儿茶酸、没食子酸乙酯、槲                          放冷，再次称定质量，用乙醇-盐酸补足减失的质量，于
        皮素、木犀草素和山柰酚的含量；同时以乙醇体积分数、                          13 000 r/min离心10 min，取上清液，经0.22 μm微孔滤膜
        料液比、提取时间为考察因素，上述6种成分含量的综合                          滤过，取续滤液，即得。
        评分为考察指标，采用 Box-Behnken 响应面法优化龙眼                    2.1.3  色谱条件      以 InertSustain C18 （250 mm×4.6 mm，
        叶的提取工艺，旨在为龙眼叶的综合评价及资源开发提                           5 μm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.2％磷酸溶液（B）为流动

        供参考。                                               相 进 行 梯 度 洗 脱（0～14 min，10％ A→26％ A；14～26
        1 材料                                               min，26％A→28％A；26～38 min，28％A→40％A；38～
        1.1  主要仪器                                          54 min，40％A→75％A）；检测波长为280 nm（没食子酸、
            本研究所用主要仪器有 LC 2030 型 Plus HPLC 仪               原儿茶酸、没食子酸乙酯）、360 nm（槲皮素、木犀草素、山
       （日本 Shimadzu 公司），SQP 型万分之一电子分析天                     柰酚）；流速为1.0 mL/min；柱温为35 ℃；进样量为5 μL。
        平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]，XMTD-7000型                     2.1.4  系统适用性试验         取上述混合对照品溶液、供试
        电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪器有限公司），                           品溶液、空白对照溶液（甲醇）适量，按“2.1.3”项下色谱
        DZG-303A 型超纯水仪（重庆颐洋企业发展有限公司），                      条件进样测定，记录色谱图，详见图 1。由图 1 可知，各
        H1650-W型离心机（长沙高新技术产业开发区湘仪离心                        色谱峰的分离度均大于1.5，理论板数均不低于5 000，空
        机仪器有限公司）等。                                         白对照溶液不干扰测定。
        1.2 主要药品与试剂                                        2.1.5  线性关系考察        分别精密吸取“2.1.1”项下混合
            没食子酸对照品（批号 RP1911126，纯度 99.99％）、               对照品溶液 1、2、4、6、8、10 µL，按“2.1.3”项下色谱条件
        原儿茶酸对照品（批号RP190605，纯度99.99％）、没食子                   进样测定，记录色谱图。以各待测成分的进样量为横坐

        酸乙酯对照品（批号RP200120，纯度99.85％）、槲皮素对                   标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归。结果见表2。
        照品（批号 RP200602，纯度 99.25％）、木犀草素对照品                  2.1.6  精密度试验       取“2.1.1”项下混合对照品溶液，按
       （批号 RP191106，纯度 98.66％）、山柰酚对照品（批号                  “2.1.3”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
        RP200312，纯度99.83％）均购自成都麦德生科技有限公                    结果显示，没食子酸、原儿茶酸、没食子酸乙酯、槲皮素、
        司；甲醇、乙腈均为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为                          木 犀 草 素 和 山 柰 酚 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 0.10％ 、
        超纯水。                                               0.27％、0.52％、0.16％、0.32％、0.11％（n＝6），表明仪器
            8 批龙眼叶药材（编号 S1～S8）于 2019 年 11 月采集              精密度良好。


        中国药房2022年第33卷第14期                                                China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 14  ·1689 ·
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