Page 49 - 《中国药房》2022年11期
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2.3.2 细胞增殖活性的检测 参考文献[15]方法，取对 东、贵州、湖南、四川的17批山豆根的黄酮类成分进行含
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数生长期的细胞制成密度为2×10 mL 的细胞悬液，接 量测定，结果显示，山豆根中槲皮素含量为 0.02％～
种于96孔板中，每孔接种100 μL。实验分为顺铂组（阳 0.06％。由此可知，本研究预测的几种潜在活性成分除
性对照）、高丽槐素组、越南槐醇组、槲皮素组、山豆根素 槲皮素外，均在山豆根中含量较高。越南槐醇、山豆根
组，各组给药浓度均为 100 µmol/L（根据预实验结果设 素、高丽槐素在山豆根抗鼻咽癌化学成分-靶点网络中
置）。另设不加药物只加细胞的空白组、不加细胞和药 的Degree值均大于3.5，且与核心靶点的结合能较低；进
物的调零组，每组设6个复孔。各组细胞置于37 ℃、5％ 一步细胞实验结果也表明，这 3 种成分对人鼻咽癌
CO2细胞培养箱中培养至贴壁后，加入相应药物，每孔 CNE-1 细胞具有较好的抑制作用。由此推测，越南槐
100 μL；继续培养 24、48、72 h 后，分别向每孔加入 5 醇、山豆根素、高丽槐素可能是山豆根抗鼻咽癌的主要
mg/mL MTT 溶液 20 μL，培养 4 h 后，弃去上清液；每孔 活性成分。槲皮素在山豆根中含量较低，且对人鼻咽癌
加入 150 μL 二甲基亚砜，采用酶标仪于 510 nm 波长处 CNE-1细胞的抑制较弱，可能不是山豆根抗鼻咽癌的主
检测各孔吸光度值（A），并计算细胞增殖抑制率：细胞增 要活性成分。2-（2，4-二羟基苯基）-5，6-亚甲二氧基苯
殖抑制率＝[1－（A 实 验 组－A 调 零 组）/（A 空 白 组－A 调 零 组）]× 并呋喃在山豆根抗鼻咽癌化学成分-靶点网络中仅关联
100％。 4个靶点，而且与核心靶点无关联，也可能不是山豆根抗
结果显示，给药24 h时，顺铂、越南槐醇及山豆根素 鼻咽癌的主要活性成分。三叶豆紫檀苷在山豆根中含
对人鼻咽癌CNE-1细胞的抑制效果较好，细胞增殖抑制 量较高，且有研究报道，三叶豆紫檀苷可在大鼠体内代
[18]
率均大于 80％，而高丽槐素、槲皮素的抑制作用相对较 谢为高丽槐素 ，由此推测，三叶豆紫檀苷可能在体内
弱。给药 48、72 h 时，山豆根各活性成分的抑制作用均 转化为高丽槐素，进而发挥抗鼻咽癌作用。
有所提高，且抑制作用由大到小依次为越南槐醇＞山豆 综上所述，本研究初步确定越南槐醇、山豆根素、高
根素＞高丽槐素＞槲皮素。结果见表3。 丽槐素为山豆根抗鼻咽癌的主要药效物质基础，可为治
表 3 山豆根活性成分对人鼻咽癌 CNE-1 细胞增殖抑 疗鼻咽癌的新药开发提供参考。
制率的影响（x±±s，n＝6，％％） 参考文献
[ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]. 2020年
组别 24 h 48 h 72 h
顺铂组 87.66±0.67 98.53±1.61 100.19±0.28 版.北京：中国医药科技出版社，2020：28-29.
越南槐醇组 81.59±2.16 94.51±0.76 97.93±0.49 [ 2 ] 彭百承，黄健，李萍，等.山豆根颗粒及其饮片抗肿瘤作用
山豆根素组 83.20±2.40 85.28±5.78 91.74±3.93 及其机制[J].中国实验方剂学杂志，2014，20（23）：190-
高丽槐素组 21.39±2.69 68.70±1.62 84.00±2.35 193.
槲皮素组 10.80±1.64 45.84±2.08 64.97±1.96
[ 3 ] PAN Q M，LI Y H，HUA J，et al. Antiviral matrine-type
3 讨论
alkaloids from the rhizomes of Sophora tonkinensis[J]. J
鼻咽癌的新发病例大部分来自东亚和东南亚地区，
Nat Prod，2015，78（7）：1683-1688.
其中我国新发鼻咽癌病例占全世界的47.7％，主要分布 [ 4 ] 陈晓钟，黄爽.鼻咽癌的治疗进展[J].浙江医学，2021，43
[16]
在广东、广西、湖南、福建等省份 。山豆根主产于广 （2）：129-133.
[17]
西、广东、四川、贵州等地 ，对鼻咽癌具有一定的抑制 [ 5 ] WANG S，SONG Z J，GONG X M，et al. Chloroform ex-
作用，因此，筛选山豆根抗鼻咽癌的活性成分具有重要 tract from Sophora tonkinensis Gagnep. inhibit prolifera-
意义。 tion，migration，invasion and promote apoptosis of naso-
本研究利用网络药理学方法、分子对接技术，筛选 pharyngeal carcinoma cells by silencing the PI3K/AKT/
出山豆根抗鼻咽癌的活性成分有越南槐醇、槲皮素、山 mTOR signaling pathway[J]. J Ethnopharmacol，2021，
豆根素、苦参酮、山豆根色烯素、染料木素、高丽槐素等； 271：113879.
[ 6 ] 黄乐，姚彩云，梁莹，等.一测多评法测定山豆根中3个非
进一步考察其中结合能较低的越南槐醇、山豆根素、槲
生物碱成分含量[J].中国现代中药，2020，22（12）：2015-
皮素、高丽槐素对人鼻咽癌 CNE-1 细胞的增殖抑制作
2020.
用，结果显示，越南槐醇、山豆根素的体外抑制作用较
[ 7 ] JANG S M，BAE S H，CHOI W K，et al. Pharmacokinetic
强，接近阳性对照药顺铂。
properties of trifolirhizin，（-）-maackiain，（-）-sophora-
[6]
黄乐等 采用一测多评法对广西7个产地的山豆根 none and 2-（2，4-dihydroxyphenyl）-5，6-methylenedioxy-
成分含量进行测定，结果发现，山豆根中越南槐醇含量 benzofuran after intravenous and oral administration of
为0.08％～0.29％；韩国研究者制备了山豆根提取物，并 Sophora tonkinensis extract in rats[J]. Xenobiotica，2015，
测得其中三叶豆紫檀苷含量为4.76％、山豆根素含量为 45（12）：1092-1104.
3.17％、高丽槐素含量为1.84％ ；He等 对来自广西、广 （下转第1329页）
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中国药房 2022年第33卷第11期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 11 ·1323 ·
