Page 48 - 《中国药房》2022年11期

性，结果见表2（表中，1 kcal＝4.184 kJ）。在PubChem数
据库下载山豆根活性成分的 3D 结构，在 PDB 蛋白数据
库（https：//www.rcsb.org/）下载核心靶点的结构，并对活
性成分进行去除水分子以及加氢处理，借助Dockthor平
台（https：//dockthor.lncc.br/v2/）进行在线分子对接，采用
Pymol 软件将结合能力较好的对接结果进行可视化处
理，结果见图3。
表2 山豆根抗鼻咽癌核心靶点与潜在活性成分的分子
对接测试结果
分子对接结合能/ 分子对接结合能/
核心靶点 活性成分 核心靶点 活性成分
（kcal/mol） （kcal/mol）
EGFR 染料木素 －7.121 PIK3CA 高丽槐素 －7.360
苦参酮 －8.131 山豆根色烯素 －7.998
槲皮素 －6.901 越南槐醇 －8.271
山豆根色烯素 －8.561 苦参酮 －7.069
MAPK1 高丽槐素 －8.284 AKT1 越南槐醇 －8.061
山豆根素 －8.307 槲皮素 －7.473
山豆根色烯素 －7.981 MAPK8 苦参酮 －7.839
注：图中节点越大表示其在网络中越重要 越南槐醇 －8.005 MAPK3 越南槐醇 －7.562
图2 山豆根抗鼻咽癌的PPI网络图 苦参酮 －7.069 SRC 槲皮素 －8.393
JAK3 高丽槐素 －7.567 PTK2 槲皮素 －7.467
对山豆根抗鼻咽癌化学成分-靶点网络分析发现， MAP2K1 越南槐醇 －7.865
整个网络的平均 Degree 值为 3.5，网络中大于平均 De-
一般认为配体与受体结合的构象稳定时，发生作用
gree值的化学成分分别为越南槐醇、槲皮素、山豆根素、
的可能性越大；并且当结合能＜－7.0 kcal/mol 时，两者
苦参酮、染料木素、山豆根色烯素、高丽槐素。由此推
具有较好的结合活性，且结合能越低，对接效果越
测，这几种成分可能是山豆根抗鼻咽癌的潜在活性
[14]
好 。由表 1 可知，山豆根核心靶点与其对应的潜在活
成分。
性成分的结合能均低于－7.0 kcal/mol，表明这些成分均
由图2可知，图中Degree值排名前10位的靶点分别
具有一定的抗鼻咽癌活性。
是 SRC、PIK3CA、MAPK1、MAPK3、AKT1、MAPK8、
2.3 山豆根潜在活性成分对鼻咽癌细胞增殖活性的
MAP2K1、PTK2、EGFR、JAK3。由此推测，这些靶点可
能是山豆根抗鼻咽癌的核心靶点。 影响
2.2 山豆根抗鼻咽癌核心靶点与潜在活性成分的分子 2.3.1 细胞培养 将人鼻咽癌CNE-1细胞复苏，接种于
对接测试 培养瓶中，使用含 10％胎牛血清、1％双抗的 RPMI1640
采用半柔性对接方式，将“2.1”项下筛选的山豆根抗 培养基在 37 ℃、5％CO2的细胞培养箱中培养，隔夜换
鼻咽癌核心靶点与潜在活性成分进行分子对接测试，并 液，并观察细胞的生长状况，当细胞处于对数生长期时，
计算活性成分与核心靶点间的结合能，评估其结合活 进行细胞增殖实验。

A.山豆根素-MAPK1 B.槲皮素-SRC C.山豆根色烯素-EGFR D.越南槐醇-PIK3CA

E.苦参酮-EGFR F.高丽槐素-MAPK1 G.越南槐醇-MAPK1 H.越南槐醇-AKT1
图3 山豆根抗鼻咽癌潜在活性成分与关键靶蛋白的分子对接可视化图

·1322 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 11 中国药房 2022年第33卷第11期