Page 29 - 《中国药房》2022年11期

3.2 黄芩素和汉黄芩素对 HepG2 细胞中 ATP 浓度的 别为－7.904、－7.626 kJ/mol，亲和力较强；黄芩素和汉
影响 黄芩素与 HK、PFK 对接的最大能量值的绝对值均小于
ATP检测结果显示，与空白对照组[（148.10±12.48） 7，亲和力较弱。
nmol/mg pro]比较，黄芩素组[（127.74±6.05）nmol/mg 进一步分析黄芩素和汉黄芩素与 PKM2 的作用力
pro]、汉黄芩素组[（122.65±4.71）nmol/mg pro] HepG2 发现，黄芩素与PKM2的作用以氢键、范德华力为主，而
细胞中 ATP 浓度显著降低（P＜0.05），提示黄芩素和汉 汉黄芩素与 PKM2 之间的作用力主要为范德华力。分
黄芩素均能明显降低HepG2细胞中的ATP浓度。 析原因为：黄芩素有 2 个芳香环、3 个相邻羟基，在分子
3.3 黄芩素和汉黄芩素对HepG2细胞糖酵解的影响
结构上共轭程度强，电子传递能力强，易与糖酵解关键
糖酵解压力测试结果显示，与空白对照组比较，黄
酶形成稳定氢键，结合力更强；而汉黄芩素只有2个相邻
芩素组、汉黄芩素组HepG2细胞基础酸化率均显著降低
[18]
羟基，与糖酵解关键酶形成稳定氢键的结合力较弱 。
（P＜0.05），表明其能明显降低细胞糖酵解水平；且给予
该结果部分解释了黄芩素和汉黄芩素对糖酵解的抑制
寡霉素抑制 ATP 合成酶的活性后，2 个给药组细胞最大
机制。
酸化率均较空白对照组显著降低（P＜0.01），提示黄芩
3.5 黄芩素和汉黄芩素对HepG2细胞糖酵解能量代谢
素和汉黄芩素不仅能直接抑制糖酵解，还能抑制细胞在
关键酶表达的影响
应激状态下能量代谢表型的转变。进一步比较黄芩素
Western blot 检测结果显示，与空白对照组比较，汉
组、汉黄芩素组的结果显示，汉黄芩素组细胞基础酸化
黄芩素组 HepG2 细胞中 HK、PFK、PKM2 的蛋白表达水
率较黄芩素组显著降低（P＜0.05），提示汉黄芩素对糖
酵解的抑制作用较黄芩素更强。结果见图2。 平显著降低（P＜0.05或P＜0.01），提示下调糖酵解关键
3.4 黄芩素和汉黄芩素影响糖酵解能量代谢关键酶的 酶表达是汉黄芩素抑制 HepG2 细胞能量代谢的重要机
靶点预测结果 制；黄芩素组糖酵解关键酶的蛋白表达水平虽有下降趋
分子对接评估黄芩素和汉黄芩素与糖酵解能量代 势，但与空白对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05），
谢关键酶HK、PFK、PKM2相互作用的结合能量值，结果 综合分子对接结果，提示黄芩素可能通过抑制PKM2蛋
显示，黄芩素和汉黄芩素与PKM2对接的最大能量值分 白活性进而抑制糖酵解。结果见图 3。

500 葡萄糖 寡霉素 2-DG 空白对照组 500 空白对照组 500 空白对照组
（ mpH/mg pro ） 400 黄芩素组 （ mpH/mg pro ） 400 黄芩素组 （ mpH/mg pro ） 400 b b 黄芩素组
汉黄芩素组
汉黄芩素组
汉黄芩素组
300
300
300
细胞外酸化率/ 200 基础酸化率/ 200 a bc 最大酸化率/ 200
100
0 100 100
0 20 40 60 80 100 0 0
时间/min 组别 组别
A.糖酵解压力测试总图 B.基础酸化率检测结果 C.最大酸化率检测结果
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05；c：与黄芩素组比较，P＜0.05
图2 黄芩素和汉黄芩素对HepG2细胞糖酵解的影响（x±±s，n＝6）
1.0
HK 102 kDa
空白对照组
0.8
黄芩素组
汉黄芩素组
PFK 58 kDa 0.6
蛋白表达水平
PKM2 72 kDa 0.4 a
a
0.2 b
β-actin 43 kDa
0
空白对照组 黄芩素组 汉黄芩素组 HK PFK PKM2
A.蛋白表达电泳图 B.蛋白表达水平柱状图
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05
图3 黄芩素和汉黄芩素对HepG2细胞糖酵解能量代谢关键酶表达的影响（x±±s，n＝3）

中国药房 2022年第33卷第11期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 11 ·1303 ·