Page 58 - 《中国药房》2022年9期
P. 58

the activities of SOD and GSH-Px and the serum content of HDL-C （P＜0.05 or P＜0.01） in model mice，and significantly
        decreased the fasting blood glucose and the serum contents of MDA， TC， TG and LDL-C （P＜0.05 or P＜0.01）.
        CONCLUSIONS GA-LNCs，NGA-LNCs prepared in this study are good in physical and chemical properties and have good
        anti-diabetes activity.
        KEYWORDS     gambogic acid；neogambogic acid；nanocapsules；diabetes；preparation


            糖尿病（diabetes mellitus，DM）是一种由遗传、环境              型纳米粒度电位仪（丹东百特仪器有限公司），TGL-16M
        和自身免疫等复合病因所引起的慢性代谢性疾病，其可                            型低速离心机（上海科雅生物科技有限公司），DNM-
        诱发微血管和大血管病变、神经系统并发症等 。2020                          9602型酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司），活力型
                                                 [1]
        年全国流行病学统计显示，我国糖尿病患者总人数约                             罗氏血糖仪（杭州欧英米电子商务有限公司）。
        1.298 亿，且患病率保持持续增长的趋势 。目前，治疗                        1.2 主要药品与试剂
                                           [2]
        DM 的药物只能短暂地使患者血糖水平正常化 。因                                GA、NGA原料药由本实验室自制（质量分数均大于
                                                   [3]
        此，从天然产物中寻找治疗DM且毒副作用小的药物是                            98％）；本研究所用其他药品与试剂有：大孔吸附树脂
        当今研究的热点。                                            D101（天津市光复精细化工研究所，批号1021Q011），中
            藤黄为双子叶植物藤黄科藤黄属植物藤黄 Garci-                       链甘油三酯、葡聚糖凝胶G-50、二甲双胍（上海源叶生物
                                    [4]
        nia hanburyi Hook. f.的胶状树脂 ，早在《海药本草》中就              科 技 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 20111028、413B052、
        有记载，现收录于《中药大辞典》中，其味酸涩、性凉、有                          H20051277），聚乙二醇单硬脂酸酯（上海麦克林生化科
        毒，具有治疗痈疽肿毒、顽癣恶疮、损伤出血等功效                     [5－6] 。  技有限公司，批号 20150905），D-甘露醇（北京酷来博科
        现代研究表明，藤黄还具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、                          技有限公司，批号20110603），链脲佐菌素（streptozocin，
        神经保护等作用        [7－11] ；其主要含有以藤黄酸（gambogic           STZ，美国Sigma 公司，批号WXBC6558V），超氧化物歧
        acid，GA）和新藤黄酸（neogambogic acid，NGA）为代表              化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialde-
        的笼状氧杂蒽酮类成分           [12－13] 。这2种成分均具有较好的           hyde，MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxi-
        抗肿瘤效果，可通过多途径抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭、                           dase，GSH-Px）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰
        迁移，并诱导细胞凋亡 。另外，本课题组也首次发现，                           甘油（triacylglycerol，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-
                            [14]
        GA和NGA均具有降血糖作用，且该项研究成果已获国                           density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆
                                                     [15]
        家授权发明专利（专利号为 ZL 2014 1 0092956.9） 。                 固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）试剂盒
        但这2种成分均具有一定刺激性，且难溶于水、生物利用                          （南京建成生物工程研究所，批号分别为 20180608、
        度较低、血管刺激性较大           [16－17] ，因此极大地限制了其临           20210417、20120323、20181129、20181116、20181129、
        床应用。                                                20181116）；GA、NGA对照品（成都德思特生物技术有限
            纳米制剂包括纳米粒、纳米囊等，粒径介于1～1 000                      公司，批号分别为DT0015、DX0071，纯度均大于98％）；
        nm，性质稳定、制备简便 ；且其对人体无毒，生物相容                          其余试剂为实验室常用规格，水为纯净水。
                              [18]
        性较好，包载药物后可降低对正常器官、组织及全身的副                           1.3  动物
        作用，并改善难溶性药物的溶解度               [19－21] 。纳米囊根据成           本研究所用动物为 SPF 级 C57BL/6J 小鼠，共 60
        囊材料的不同可分为聚合物纳米囊和类脂纳米囊                      [22－23] 。  只，雄性，体质量为18～22 g，购自北京华阜康生物科技
        其中，类脂纳米囊是核-壳结构的新型载药系统，类似脂                           股 份 有 限 公 司 ，动 物 生 产 许 可 证 号 为 SCXK（京）
                                     [24]
        蛋白的结构，主要包裹亲脂药物 。基于此，本研究采                            2019-0008。将小鼠饲养于温度 20～26 ℃、相对湿度
                  [25]
        用相转换法 将GA、NGA制成纳米囊（即类脂纳米囊），                         40％～70％的条件下，期间自由饮水与摄食，适应性饲
        对其粒径、微观形态、Zeta电位、X-射线衍射等理化性质                        养 1周后进行实验。
        以及体外抗 DM 活性进行考察，以期为 DM 新药开发提                        2 方法与结果
        供依据。                                                2.1 GA、NGA的含量测定
        1 材料                                                2.1.1  溶液的配制 （1）对照品溶液的配制：分别精密
        1.1 主要仪器                                            称取GA、NGA对照品2.00 mg，置于10 mL量瓶中，以乙
            本研究所用主要仪器有 1260 型高效液相色谱仪                        腈定容，分别制成 GA、NGA 质量浓度均为 0.20 mg/mL
        （美国 Agilent 公司），2489 型紫外可见光分光光度计                    的对照品溶液，备用。（2）供试品溶液的配制：分别精密
        （美国Waters公司），BS210S型万分之一电子天平（德国                     吸取“2.2.1”项下 GA 纳米囊（GA-LNCs）、NGA 纳米囊
        Sartorius 公司），FD-IC50 型真空冷冻干燥机（北京博医                （NGA-LNCs）0.1 mL至不同10 mL量瓶中，以乙腈定容，
        康实验仪器有限公司），MIX15 eco 型磁力加速搅拌器                       即得GA-LNCs、NGA-LNCs供试品溶液。
        （常州市国旺仪器制造有限公司），FEI G2 120KV型透射                     2.1.2  色谱条件      色谱柱为 Silversil C18 （250 mm×4.6
        电镜、m3000型马尔文激光粒度分析仪、BeNano 90 Zeta                  mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液（90∶10，V/V）；


        ·1076 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9                                   中国药房    2022年第33卷第9期
   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63