Page 59 - 《中国药房》2022年9期

流速为 1 mL/min；检测波长为 360 nm；柱温为 30 ℃；进 GA-LNCs、NGA-LNCs 供试品溶液，各 6 份，分别加入
样量为10 μL。 GA 对照品 760.47 μg、NGA 对照品 526.48 μg，然后按
2.1.3 专属性试验 取“2.1.1”项下 GA、NGA 对照品溶 “2.1.2”项下色谱条件进样分析，记录峰面积，并计算加
液和 GA-LNCs、NGA-LNCs 供试品溶液适量，按“2.1.2” 样回收率。结果显示，GA、NGA的平均加样回收率分别
项下色谱条件进行分析，记录色谱图。结果显示，各样 为 98.94％、97.63％，RSD 分别为 2.05％、3.69％（n＝6）。
品中GA和NGA的峰形均较好，且不受辅料及空白溶剂 结果见表1。
的影响，结果见图1。 表1 加样回收率试验的测定结果（n＝6）
GA NGA 成分 样品中含量/μg 加入量/μg 测得量/μg 加样回收率/％ 平均加样回收率/％ RSD/％
40 40
GA 821.00 760.47 1 561.21 97.30 98.94 2.05
30 30 806.40 760.47 1 548.20 97.54
mAU 20 mAU 20 810.69 760.47 1 549.50 97.10
10 10
813.20 760.47 1 589.22 102.00
0 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 794.44 760.47 1 560.35 100.72
t/min t/min 802.64 760.47 1 554.21 98.83
A. GA对照品溶液 B. NGA对照品溶液 NGA 568.29 526.48 1 056.66 97.33 97.63 3.69
120 GA 120 579.02 526.48 1 097.24 97.54
100 100 NGA 556.44 526.48 1 067.76 97.16
80 80 587.00 526.48 1 104.76 102.04
mAU 60 mAU 60 566.98 526.48 1 102.11 100.72
40 40
20 20 568.33 526.48 1 065.49 98.83
0 0 2.2 GA-LNCs、NGA-LNCs的制备工艺研究
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
[25]
t/min t/min 2.2.1 纳米囊的制备 采用相转化法 进行制备。以
C. GA-LNCs供试品溶液 D. NGA-LNCs供试品溶液
中链甘油三酯为油相、水为水相、聚乙二醇单硬脂酸酯
图1 GA、NGA含量测定的专属性试验色谱图
[26]
为表面活性剂 ，按相应比例混合后，加入 GA 或 NGA
2.1.4 线性关系考察 取“2.1.1”项下 GA、NGA 对照品 原料药35 mg，于室温下匀速搅拌至药物溶解；控制搅拌
溶液适量，分别制成质量浓度均为0.01、0.02、0.04、0.08、 温度使其匀速上升或下降，完成室温→85 ℃→60 ℃→
0.12、0.16、0.20 mg/mL 的系列溶液，再按“2.1.2”项下色 85 ℃→60 ℃→85 ℃→72 ℃的循环，以形成稳定的均相
谱条件进样分析，以各对照品的质量浓度为横坐标（X）、 体系；当温度下降至70 ℃左右时，立即加入适量冰水并
峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归。结果显示，GA、 搅拌均匀，形成均一稳定的透明溶液，即得相应纳米囊。
NGA的回归方程分别为Y＝14 970X－33（R ＝0.999 6）、 2.2.2 载药量和包封率的测定 将葡聚糖凝胶 G-50 充
2
Y＝10 050X－17（R ＝0.999 6），检测质量浓度线性范围 分溶胀在水中 24 h，然后填入注射器使水分自然滤出，
2
均为0.01～0.20 mg/mL。 再将注射器置于 15 mL 离心管中，以 500 r/min 离心 1
2.1.5 精密度试验 分别精密吸取“2.1.1”项下 GA、 min，除去多余的水分，即得凝胶柱。取所制得的纳米囊
NGA对照品溶液适量，按“2.1.2”项下色谱条件连续进样 100 μL 均匀加入凝胶柱，洗脱 5 次，每次用 0.1 mL 水洗
6 次，记录峰面积。结果显示，GA、NGA 峰面积的 RSD 脱，收集洗脱液，置于 5 mL 量瓶中，加入乙腈定容，按
分别为0.87％、0.99％（n＝6），表明仪器精密度良好。 “2.1.2”项下色谱条件进样分析，并计算包入的药量 W1。
2.1.6 重复性试验 取 GA-LNCs、NGA-LNCs 适量，各 另取100 μL纳米囊，加入乙腈定容至5 mL，按“2.1.2”项
6 份，分别按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按 下色谱条件进样分析，并计算总药量 W2。 然后根据公
“2.1.2”项下色谱条件进样分析，记录峰面积，根据标准 式计算载药量和包封率：载药量＝W1/W3×100％（W3为纳
曲 线 计 算 GA、NGA 的 含 量 。 结 果 显 示 ，GA-LNCs、 米囊的总质量），包封率＝W1/W2×100％。
NGA-LNCs 中 GA、NGA 的平均含量分别为 9.01、8.64 2.2.3 网格法优化GA-LNCs、NGA-LNCs的处方 以包
mg/g，RSD 分别为 0.88％、1.42％（n＝6），表明该方法重 封率和载药量为优化指标，以水相、油相、表面活性剂的
复性良好。 比例为考察因素（固定总量为2 g），采用{3，2}单纯型网
2.1.7 稳定性试验 取 GA-LNCs、NGA-LNCs 适量，分 格设计法对 GA-LNCs、NGA-LNCs 的处方工艺进行优
[26]
别按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，然后于室温放置 化 。GA-LNCs、NGA-LNCs单纯型网格法实验设计和
0、4、6、12、24、48 h 后，按“2.1.2”项下色谱条件进样分 结果见表 2、表 3。进一步通过 Origin 作图分析，得到载
析，记录峰面积。结果显示，GA、NGA峰面积的RSD分 药量和包封率的三维图和等高线图，两者等高线图的叠
别为0.98％、1.66％（n＝6），表明这2种供试品溶液在室 加部分为载药量和包封率均较高的区域，即形成纳米囊
温放置48 h内稳定性良好。 的最优处方，结果见图2、图3。结果显示，当油相比例越
2.1.8 加样回收率试验 吸取已知 GA、NGA 含量的 小、水相比例越大时，GA-LNCs、NGA-LNCs的载药量和

中国药房 2022年第33卷第9期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9 ·1077 ·