Page 48 - 《中国药房》2022年9期
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4 讨论 AD模型小鼠脑组织中PUMA、NF-κB p65蛋白表达。
[20]
NLRP3 炎症小体是目前 AD 药物研发的新靶点 。 综上所述，癫痫清颗粒可能通过抑制NLRP3炎症小
NLRP3炎症小体与AD患者的BBB通透性密切相关—— 体信号通路，有效改善 AD 模型小鼠的 BBB 损伤，有望
[21]
抑制 NLRP3 炎症小体表达，可降低 BBB 通透性 。 为临床治疗AD提供新的思路和靶点。本课题组后续将
MCC950 是目前最为有效的选择性 NLRP3 炎症小体小 进一步探讨癫痫清颗粒是否能通过抑制 Aβ沉积和 Tau
分子抑制剂，其通过抑制 NLRP3 炎症小体的形成和激 蛋白磷酸化来降低NLRP3炎性小体的激活，从而发挥其
活，改善 AD 患者的 BBB 功能 [22－23] 。盐酸多奈哌齐片作 维持BBB完整性的作用。
为胆碱酯酶抑制剂，多用于AD的治疗，可改善AD患者 参考文献
[15]
的行为学变化 。因此，本研究选择 MCC950 和盐酸多 [ 1 ] NAJM R，JONES E A，HUANG Y D. Apolipoprotein E4，
奈哌齐片同时作为阳性对照药。 inhibitory network dysfunction，and Alzheimer’s disease
小胶质细胞是神经胶质细胞的一种类型，活化的小 [J]. Mol Neurodegener，2019，14（1）：24.
胶质细胞可促进 AD 患者的炎症进程。NLRP3 广泛表 [ 2 ] KRAUSE D L，MÜLLER N. Neuroinflammation，microglia
达于小胶质细胞中，在启动炎症反应中扮演重要角 and implications for anti-inflammatory treatment in
[24]
色 。紧密连接蛋白是构成 BBB 基本结构并维持其功 Alzheimer’s disease[J]. Int J Alzheimers Dis，2010，2010：
能的主要部分，在保持BBB通透性方面起到了较为重要 732806.
[ 3 ] ZHEN H，ZHAO L Z，LING Z J，et al. Wip1 regulates
[25]
的作用 。小胶质细胞活化后，NLRP3 的表达量增加，
blood-brain barrier function and neuro-inflammation in-
[26]
紧密连接蛋白（ocln、cldn5 和 ZO-1）表达降低 ，BBB 通
duced by lipopolysaccharide via the sonic hedgehog sig-
[27]
透性增强，导致学习记忆功能障碍 。IBA-1 参与小胶
naling signaling pathway[J]. Mol Immunol，2018，93：
质细胞骨架形成，是小胶质细胞的特异性标志物，其表
31-37.
达量的多少与小胶质细胞活性密切相关 。在伊文思
[28]
[ 4 ] 尚俊奎，李巍，张杰文.血脑屏障损伤在正常衰老过程中
蓝渗漏实验中，可以通过测定小鼠脑组织内的伊文思蓝
的作用[J].中华实用诊断与治疗杂志，2022，36（1）：99-
含量来评估BBB的完整性 。本研究结果显示，与假手 101.
[29]
术组比较，模型组小鼠脑组织内的伊文思蓝含量明显增 [ 5 ] ZENARO E，PIACENTINO G，CONSTANTIN G. The
加，小鼠自发交替反应率明显降低；且脑组织中的 blood-brain barrier in Alzheimer’s disease[J]. Neurobiol
IBA-1、NLRP3 蛋白表达明显上调，ocln、cldn5、ZO-1 蛋 Dis，2017，107：41-56.
白表达明显下调。以上结果提示，AD 模型小鼠脑组织 [ 6 ] ZHANG Y，DONG Z，SONG W. NLRP3 inflammasome
中 NLRP3 表达上调可促使 BBB 通透性增强，导致其学 as a novel therapeutic target for Alzheimer’s disease[J].
习记忆功能受损。癫痫清颗粒干预后可以显著提高AD Signal Transduct Target Ther，2020，5（1）：1-7.
模型小鼠的自发交替反应率，减少其脑组织内的伊文思 [ 7 ] LIU N，YU Z Y，XUN Y，et al. Amyloid-β25-35 upregu-
蓝含量，并可显著下调脑组织中 IBA-1、NLRP3 蛋白表 lates endogenous neuroprotectant neuroglobin via NF-κB
达，上调其脑组织中ocln、cldn5、ZO-1蛋白表达。 activation in vitro[J]. J Alzheimers Dis，2018，64（4）：
以往研究表明，PUMA 作为一种凋亡调控因子，具 1163-1174.
[30]
有强大的促凋亡作用 。近期研究发现，PUMA与BBB [ 8 ] WARD R，LI W G，ABDUL Y，et al. NLRP3 inflamma-
some inhibition with MCC950 improves diabetes-media-
完整性密切相关 ，敲除PUMA基因能够显著抑制脑血
[31]
ted cognitive impairment and vasoneuronal remodeling
[32]
管内皮细胞凋亡，起到保护 BBB 完整性的作用 ；而沉
after ischemia[J]. Pharmacol Res，2019，142：237-250.
默 NF-κB 基因可抑制 PUMA 过表达引起的紧密连接蛋
[ 9 ] WENG C Y，CHIOU S Y，WANG L S，et al. Arsenic
白（ocln、cldn5、ZO-1）表达量的降低，说明 PUMA 是
trioxide induces unfolded protein response in vascular
NF-κB 的上游调控因子，可调节 BBB 通透性 。NF-κB
[33]
endothelial cells[J]. Arch Toxicol，2014，88（2）：213-226.
作为一条经典的炎症信号转导通路，当外源性刺激存在
[10] DEMPSEY C，RUBIO ARAIZ A，BRYSON K J，et al. In-
时，可促使 NF-κB p65 进入细胞核内，使 NLRP3 表达增 hibiting the NLRP3 inflammasome with MCC950 pro-
加，而抑制 NF-κB p65 的核转录可以减少 AD 模型小鼠 motes non-phlogistic clearance of amyloid-β and cogni-
脑组织中 NLRP3 的表达，降低 BBB 通透性，从而改善 tive function in APP/PS1 mice[J]. Brain Behav Immun，
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AD 模型小鼠的学习记忆障碍 。本研究结果显示，与 2017，61：306-316.
假手术组比较，模型组小鼠脑组织中PUMA、NF-κB p65 [11] LIU L M，WANG N，KALIONIS B，et al. HMGB1 plays
蛋白表达均明显上调；癫痫清颗粒干预后可以显著下调 an important role in pyroptosis induced blood brain barrier
·1066 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9 中国药房 2022年第33卷第9期
