Page 41 - 《中国药房》2022年9期
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日内精密度 RSD；重复操作 2 d，计算日间精密度 RSD。                    白释放介质制成 EVO 混悬液。分别取 EVO 混悬液和
        结果显示，上述3种样品中EVO峰面积的日内精密度和                          EVO-PC-SMEDDS 适量（EVO 含量均为 2 mg），置于透
        日间精密度的 RSD 均小于 2％（n＝6），表明该方法精密                     析袋（截留相对分子质量为35 000 Da）中，两端扎紧；然
        度良好。                                               后分别置于100倍体积的释放介质中（加入10％无水乙
        2.4.5  重复性试验       精密量取同一批次的 EVO-PC-               醇助溶），于37.0 ℃、100 r/min恒温振荡器中振荡0、1、2、
        SMEDDS适量，按“2.4.2”项下方法平行制备6份供试品                     4、6、8、16、24、48 h后取样（同时补充同温等量的释放介
        溶液，按“2.4.1”项下色谱条件进样分析，记录峰面积，并                      质）。将取样液过0.22 μm微孔滤膜，取续滤液按“2.4.1”
        根据标准曲线计算 EVO 含量。结果显示，EVO-PC-                       项下色谱条件进样分析，根据标准曲线计算 EVO 的含
        SMEDDS 中 EVO 的平均含量为 196.4 μg/mL，RSD 为              量，并计算累积释放率，绘制累积释放曲线（见图 5）；利
        0.72％（n＝6），表明该方法的重复性良好。                            用Origin 9.0软件拟合EVO-PC-SMEDDS的体外释放模
        2.4.6  稳定性试验      精密量取“2.4.2”项下供试品溶液               型（见表2）。
        适量，于室温放置0、2、6、8、12、24、36、48 h后，按“2.4.1”                  100
        项下色谱条件进样分析，记录峰面积。结果显示，EVO
                                                                  80
        峰面积的 RSD 均小于 2％（n＝8），表明供试品溶液在室                                                       EVO原料药
        温放置48 h内的稳定性良好。                                           60                         EVO-PC-SMEDDS
        2.4.7  加样回收率试验          精密量取“2.4.2”项下已知                 累积释放率/％  40
        EVO含量的供试品溶液，共9份，置于50 mL量瓶中，分
                                                                  20
        为3组；每组分别加入“2.4.2”项下EVO对照品溶液 2.5、
        1.25、0.625 mL，然后加甲醇定容，按“2.4.1”项下色谱条                        0
                                                                    0  4  8  12  16  20 24 28  32 36 40  44 48
        件进样分析，并计算加样回收率。结果显示，EVO 的平                                                  t/h
        均加样回收率为 98.97％～100.27％，RSD 为 0.48％～                图 5 EVO 原料药和 EVO-PC-SMEDDS 的累积释放
        2.21％（n＝3），结果见表1。                                        曲线
                 表1 加样回收率试验的测定结果
                                                             表2   EVO-PC-SMEDDS的体外释放模型拟合结果
        已知含量/μg 加入量/μg 测得量/μg 加样回收率/％ 平均加样回收率/％ RSD/％                                               2
          196.40   500   693.60   99.44     98.97   0.48    体外释放模型               方程                 R
          196.30   500   691.50   99.04                     零级动力学             Q＝6.242t+52.119     0.879 4
                                                            一级动力学             Q＝25.027lnt+47.730  0.975 2
          195.40   500   687.80   98.48
          195.60   250   441.60   98.40    100.21   2.10    Peppas 方程         lnQ＝0.138lnt+4.249  0.894 4
                                                                                    1/2
          196.50   250   445.80   99.72                     Higuchi 方程        Q＝8.658 1t +63.650  0.653 2
          196.40   250   452.70  102.52                        由 图 5 可 知 ，与 EVO 原 料 药 相 比 ，EVO-PC-
          195.60   125   324.10  102.80    100.27   2.21   SMEDDS 的体外累积释放率提高了 6.83 倍；EVO-PC-
          196.90   125   320.90   99.20
          196.10   125   319.60   98.80                    SMEDDS在4 h时的累积释放率为80.16％，远高于EVO
                                                           原料药（累积释放率为 14.56％）。由表 2 可知，EVO-
        2.4.8 EVO-PC-SMEDDS 载药量和包封率的测定               采
                                                                                             2
        用超滤离心法测定 EVO-PC-SMEDDS 的载药量和包封                     PC-SMEDDS 一级动力学释放模型的R 值为0.975 2，相
          [18]
        率 。分别精密量取 EVO-PC-SMEDD 1 mL 于超滤管                   较于其他模型，其拟合度更好、可信度更高。这提示该
        内（截留相对分子质量为50 000 Da），以3 500 r/min离心               制剂在胃液中的释放更符合一级动力学模型。
        30 min，取超滤液，按“2.4.1”项下色谱条件进样分析，并                   2.5 EVO-PC-SMEDDS体外胃黏膜渗透性实验
        计算EVO的含量（Wfree ）。另取EVO-PC-SMEDDS适量，                2.5.1  胃黏膜渗透装置的构建           实验前将3只大鼠禁食
        置于 10 mL 量瓶中，加适量甲醇超声破乳并定容，再按                       不禁水12 h，用异氟烷麻醉后处死，取出胃，并沿外侧胃
       “2.4.1”项 下 色 谱 条 件 进 样 分 析 ，计 算 EVO 的 含 量           大弯剖开，收集胃内容物；将胃内侧朝上展开固定在手
       （W add ）。根据公式计算EVO-PC-SMEDDS的载药量和包                  术台上，用37 ℃生理盐水清洗干净后，先向胃黏膜层浅
        封率。其中，包封率（％）＝（W add－Wfree ）/W add×100，载药量          层带与胃肌固有层中间注射适量生理盐水（以形成水
       （％）＝（W add－Wfree ）/W all×100（W all表示EVO-PC-SMEDDS   垫，便于两层剥离），再用微型手术刀分离得到大鼠胃黏
        的总质量）。结果显示，EVO-PC-SMEDDS 的载药量为                     膜层。将大鼠胃黏膜层无缝隙地嵌入夹片中，插入尤斯
       （19.30±1.21）mg/g，包封率为（95.25±0.97）％。                 灌流室的中间槽，备用。另外，将上述胃内容物置于离
        2.4.9 EVO-PC-SMEDDS的体外释放考察 以0.1 mol/L              心管中，以2 000 r/min离心10 min，取上清液，备用。
        盐酸溶液为释放介质，采用动态透析法进行 EVO-PC-                        2.5.2  体外胃黏膜渗透性实验            分别在尤斯灌流室的
                             [19]
        SMEDDS 体外释放考察 。取 EVO 原料药适量，以空                      供体室和接受室中加入胃内容物上清液与磷酸盐缓冲

        中国药房    2022年第33卷第9期                                              China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9  ·1059 ·
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