Page 36 - 《中国药房》2022年9期

45 a
40 b
24 h a a b
35
48 h a b
a b b b
30
酪氨酸酶活性促进率/％ 25 a a b b
a
20
15
10
a a b
5 b
0
－5
祛白片正丁醇部位
祛白片正丁醇部位
祛白片正丁醇部位
祛白片正丁醇部位
模型组 溶媒组 8-MOP 8-MOP 8-MOP 8-MOP 8-MOP
祛白片正丁醇部位 50 μg/mL组 100 μg/mL组 150 μg/mL组 200 μg/mL组 10 μmol/L组 50 μmol/L组 100 μmol/L组 150 μmol/L组 200 μmol/L组
10 μg/mL组
a：与模型组比较，P＜0.01；b：与溶媒组比较，P＜0.01
图5 各组细胞酪氨酸酶活性促进率的检测结果（x±±s，n＝5）
3 讨论 甲素、8-牻牛儿醇基补骨脂素、柳杉醇。在这些成分中，
3.1 中药有效部位筛选 香豆素类化合物所占比例最大，黄酮类化合物次之，这
中药有效部位指从中药中提取出的一类或几类化 与本课题组前期对祛白片乙酸乙酯部位化学成分研究
[4]
学成分的混合物，是发挥疗效的物质基础，也是质量控 结果类似 。但祛白片正丁醇部位中有7种成分在乙酸
制的关键。通过分离纯化除去无效、低效或有毒的成 乙酯部位中未检出，分别为辛弗林、苜蓿素、柚皮苷、丹
分，来降低服用剂量和毒副作用，是中药创新药物发现 酚 酸 C、槲 皮 素 -3-O-β-D- 葡 萄 糖 苷 、大 黄 素 甲
的重要途径 [12－13] 。中药有效部位的研究内容为对中药 醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、苜蓿素和十六（烷）酸。经查阅文
或其制剂进行系统提取分离，根据功效采用相应药理学 献发现，香豆素类和黄酮类化合物均具有潜在的抗白癜
指标建立药理模型，确定具有活性的部位，同时采用现 风作用 [21－23] ，值得进一步深入研究。
代分析手段确定该部位所含化学成分的类型。中药有 3.3 脱黑色素模型的药效学结果分析
效部位的确定是中药新药研究开发的基础 。近年来， 小鼠 B16 黑色素瘤细胞目前在药理学研究中被广
[14]
多项国内外研究表明，中药有效部位的提取与筛选，对 泛应用 [24－25] 。本实验利用小鼠B16黑色素瘤细胞建立脱
揭示中药多组分、多靶点、多途径的特点及中药复方配 黑色素细胞模型，从细胞数量、促细胞活力、促黑色素生
伍内在规律具有重要意义 [15－17] 。本文遵循中药有效部 成3个方面，研究了祛白片正丁醇部位的药效学。首先，
位研究方法，旨在确定祛白片的活性部位，为进一步研 采用倒置显微镜观察细胞的数量变化，结果发现，祛白
发抗白癜风药物奠定基础。 片正丁醇部位可使细胞数明显增加，且增加趋势与作用
3.2 祛白片正丁醇部位化学成分分析 时间和给药浓度呈正相关。其次，研究了祛白片正丁醇
中药正丁醇部位化学成分和生物活性一直是近年 部位对细胞活性的影响，结果发现，祛白片正丁醇部位
来中药化学研究的热点 [18－20] 。本研究利用UPLC-MS技 可显著提高细胞的增殖率（P＜0.01）。为进一步探索祛
术，初步确定了祛白片正丁醇部位所含的 53 个化合物 白片正丁醇部位的作用机制，本研究检测其对酪氨酸酶
（正离子模式下29个，负离子模式下33个，重合9个），并 活性的影响，结果发现，祛白片正丁醇部位可显著升高
计算了相对百分含量。正离子模式下相对百分含量排 酪氨酸酶活性促进率，由此推测，该部位具有潜在的抗
名前 3 位的化合物分别为 7-O-（3，3-二甲基烯丙基）-东 白癜风作用，且可能是通过提高酪氨酸酶活性实现的。
莨菪素（34.37％）、比克白芷素（18.12％）和黄决明素 结合本课题组前期研究发现，祛白片乙酸乙酯部位也具
（8.73％）；负离子模式下相对百分含量排名前 3 位的化 有良好的抗白癜风作用，这提示在后续研究中可优化祛
合物分别为十六（烷）酸（28.35％）、十八碳酸（27.51％） 白片原有制备工艺，将祛白片水煎液用乙酸乙酯和正丁
和柚皮苷（24.12％）。另外，在正、负离子模式下均检出 醇分别萃取后，合并两部位制备成制剂，以达到既保留
的9种化合物分别为苜蓿素、比克白芷素、黄决明素、补 原有药效、又减小服用剂量的效果，从而更好地提高患
骨脂色烯查尔酮、异欧前胡内酯、补骨脂异黄酮、补骨脂 者的依从性。

·1054 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9 中国药房 2022年第33卷第9期