Page 33 - 《中国药房》2022年9期

表1 祛白片正丁醇部位的化学成分分析结果（正离子模式）
序号 保留时间/min 准分子离子峰m/z 分子量 化合物名称 相对百分含量/％ 来源中药
1 2.88 287.1[M+H] + 286 异氧化前胡素 4.81 白芷
2 2.89 305.1[M+H] + 304 决明子内酯 0.95 决明子
3 2.90 261.1[M+H] + 260 7-O-（3，3-二甲基烯丙基）-东莨菪素 34.37 北沙参
4 2.97 255.1[M+H] + 254 大黄酚 1.16 制何首乌
5 3.10 355.1[M+H] + 354 D-芝麻素 0.13 黑芝麻
6 3.20 377.2[M+H] + 376 当归醇 A 0.18 独活
7 3.34 317.1[M+H] + 316 比克白芷素 18.12 白芷
8 3.39 299.1[M+H] + 298 异新补骨脂查尔酮 3.93 补骨脂
9 3.62 217.0[M+H] + 216 佛手苷内酯 0.58 独活、白芷
10 3.88 168.1[M+H] + 167 辛弗林 2.43 香橼
11 4.09 301.1[M+H] + 300 珊瑚菜素 0.74 白芷
12 4.19 321.1[M+H] + 320 补骨脂异黄酮 0.56 补骨脂
13 4.25 339.1[M+H] + 338 补骨脂异黄酮醇 2.46 补骨脂
14 4.29 331.1[M+H] + 330 苜蓿素 0.27 制何首乌
15 4.45 297.1[M+H] + 296 丹参酮ⅡB 0.25 丹参
16 4.84 289.1[M+H] + 288 二氢欧山芹醇乙酸酯 0.57 独活
17 4.85 229.1[M+H] + 228 川白芷素 1.39 白芷
18 4.88 359.1[M+H] + 358 黄决明素 8.73 决明子
19 4.91 323.1[M+H] + 322 补骨脂色烯查尔酮 0.75 补骨脂
20 5.27 325.1[M+H] + 324 补骨脂甲素 2.50 补骨脂
21 5.38 337.1[M+H] + 336 丹参新醌丁 0.30 丹参
22 5.42 271.1[M+H] + 270 异欧前胡内酯 0.72 丹参
23 5.60 279.1[M+H] + 278 次甲丹参醌 0.54 丹参
24 5.84 245.1[M+H] + 244 蛇床子素 3.48 独活
25 5.99 277.1[M+H] + 276 丹参酮Ⅰ 0.27 丹参
26 6.04 329.1[M+H] + 328 Columbianadin 0.37 香橼
27 6.22 339.2[M+H] + 338 8-牻牛儿醇基补骨脂素 7.78 北沙参
28 6.58 301.2[M+H] + 300 柳杉醇 0.39 丹参、北沙参
29 6.59 295.1[M+H] + 294 异丹参酮ⅡA 1.27 丹参

2.2 脱黑色素细胞模型的药效学研究 结果见图2。
2.2.1 供试品溶液的制备 精密称取 0.1 g 祛白片正丁 由图2可知，与模型组比较，祛白片正丁醇部位各浓
醇部位干浸膏，加不含血清的 DMEM 培养基定容至 10 度组细胞数均明显增加，且与作用时间和给药浓度呈正
mL，再以 0.22 µm 微孔滤膜过滤，即得祛白片正丁醇部 相关。其中，200 μg/mL的祛白片正丁醇部位（作用48 h
位母液，临用时稀释成所需浓度作为供试品溶液。 后）使黑色素细胞数量增加最明显。与溶媒组比较，
2.2.2 脱黑色素细胞模型的建立 参考文献[8]方法，将 8-MOP各浓度组细胞数也明显增加，也与作用时间和给
小鼠 B16 黑色素瘤细胞于 37 ℃、5％CO2培养箱中培养 药浓度呈正相关。
24 h后，将培养基更换为含0.1 mmol/L H2O2的DMEM培 2.2.4 细胞活性检测 采用 CCK-8 法检测细胞的活
养基，继续培养 4 h 后，吸弃培养基，即得脱黑色素细胞 性。取对数生长期小鼠B16黑色素瘤细胞，按“2.2.3”项
模型。 下方法接种、造模、分组与给药，另设只加培养基、不加
2.2.3 细胞数量观察 取对数生长期小鼠 B16 黑色素 细胞的本底对照组，每组设 5 个复孔。各组细胞培养
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瘤细胞，经胰酶消化后，制成单细胞悬液（1×10 个/mL）， 24、48 h后，吸去上清液，加入 CCK-8溶液，继续培养4 h
接种于 96 孔培养板中，每孔 100 µL，按“2.2.2”项下方 后，采用酶标仪于 450 nm 波长处测定各孔光密度值
法建立脱黑色素细胞模型，然后分为模型组、阳性对照 （OD），并取平均值，再计算细胞增殖率[细胞增殖率＝
不同浓度组（8-MOP，10、50、100、150、200 μmol/L，以 （OD 给 药 组－OD 本 底 对 照 组）/（OD 模 型 组 或 溶 媒 组－OD 本 底 对 照 组）×
DMSO溶解，浓度根据文献[5]设置，下同）、溶媒组（由于 100％ ]。采用 SPSS 22.0 软件对数据进行统计分析。
[9]
8-MOP以DMSO溶解，故本实验另设DMSO溶媒组，即 计量资料以 x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分
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以 DMSO 稀释 1×10 倍）和祛白片正丁醇部位不同浓度 析，组间两两比较采用 LSD-t 检验，检验水准α＝0.05。
组（10、50、100、150、200 μg/mL，质量浓度根据参考文 结果显示，与模型组比较，祛白片正丁醇部位各浓度组
献[5]设置）。模型组细胞加入DMEM培养基，其余各组 细胞增殖率均显著升高（P＜0.01）；与溶媒组比较，
加入相应药物或溶剂，于 37 ℃、5％CO2培养箱中培养 8-MOP各浓度组细胞增殖率均显著升高（P＜0.01）。结
24、48 h 后，采用倒置显微镜观察各组细胞数量变化。 果见图3。

中国药房 2022年第33卷第9期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9 ·1051 ·