Page 104 - 《中国药房》2022年8期

2.6 精密度与准确度试验 存在时待测成分峰面积/无基质存在时待测成分峰面
按“2.5”项下方法配制左乙拉西坦定量下限（0.5 积）/（有基质存在时内标峰面积/无基质存在时内标峰面
µg/mL）和低、中、高质量浓度（1.5、20、40 µg/mL），卡马 积）]×100％。结果显示，左乙拉西坦的平均内标校正基
西平定量下限（0.2 µg/mL）和低、中、高质量浓度（0.6、8、 质因子为 104.70％～110.00％（RSD≤5.03％，n＝6），卡
16 µg/mL）的模拟血浆样品，按“2.3”项下方法处理后，再 马西平的平均内标校正基质因子为 98.40％～101.60％
按“2.1”项下测定条件进样分析，每个质量浓度平行测定 （RSD≤3.8％，n＝6），提示左乙拉西坦和卡马西平的检
6份，计算日内精密度（以RSD表示）；连续测定3 d，计算 测不受基质的影响。
日间精密度（以 RSD 表示）。根据随行标准曲线计算血 2.9 稳定性试验
浆样品中左乙拉西坦、卡马西平的质量浓度，以实测质 按“2.7”项下方法配制左乙拉西坦、卡马西平低、中、
量浓度与理论质量浓度进行比较，计算准确度（以RE表 高质量浓度的混合血浆质控样品，按“2.3”项下方法处
示）。结果见表1。 理，分别于处理前在－20 ℃下放置14 d、－20 ℃～室温
循环冻融 3 次、室温放置 24 h，处理后在进样器中放置
表 1 左乙拉西坦和卡马西平定量分析的精密度、准确
度和提取回收率试验结果 24 h，再按“2.1”项下测定条件进样分析，每个条件平行
测定6次，考察稳定性（以RSD表示）。结果见表2。
日内（n＝6） 日间（n＝3） 提取回收率（n＝6）
理论质
待测成分 量浓度/ 实测质量浓 RSD/ RE/ 实测质量浓 RSD/ RE/ 结果（x±s）/ RSD/ 表2 左乙拉西坦和卡马西平定量分析的稳定性试验结
（μg/mL） 度（x±s）/ ％ ％ 度（x±s）/ ％ ％ ％ ％
（μg/mL） （μg/mL） 果（n＝6）
左乙拉西坦 0.5 0.49±0.02 4.08 －2.00 0.48±0.02 4.17 －4.00 －20℃下放置14 d 循环冻融3次 室温放置24 h 进样器放置24 h
1.5 1.44±0.05 3.47 －4.00 1.49±0.09 6.04 －0.67 95.60±5.65 5.91 理论质 实测质量浓 实测质量浓 实测质量浓 实测质量浓
量浓度/
20 19.63±0.37 1.88 －1.85 20.51±0.96 4.68 2.55 104.00±6.93 6.66 待测成分 （μg/mL） 度（x±s）/ RSD 度（x±s）/ RSD 度（x±s）/ RSD 度（x±s）/ RSD
/％
/％
/％
/％
40 38.73±0.39 1.01 －3.18 40.25±1.50 3.73 0.63 105.00±4.94 4.70 （μg/mL） （μg/mL） （μg/mL） （μg/mL）
卡马西平 0.2 0.20±0.01 5.00 0 0.20±0.02 10.00 0 左乙拉西坦 1.5 1.41±0.06 4.26 1.56±0.05 3.21 1.56±0.08 5.13 1.64±0.06 3.66
0.6 0.60±0.02 3.33 0 0.59±0.02 3.39 －1.67 100.90±3.54 3.51 20 18.15±0.47 2.59 19.40±0.37 1.91 20.80±0.70 3.37 21.73±0.68 3.13
8 8.29±0.15 1.81 3.63 8.24±0.13 1.58 3.00 102.00±3.91 3.83 40 36.43±2.04 5.60 43.99±0.87 1.98 39.23±0.77 1.96 39.72±0.65 1.64
16 16.37±0.16 0.98 2.31 16.31±0.40 2.45 1.94 102.30±2.78 2.72 卡马西平 0.6 0.59±0.03 5.08 0.59±0.02 3.39 0.60±0.02 3.33 0.61±0.02 3.28
8 8.24±0.11 1.33 8.24±0.15 1.82 8.18±0.09 1.10 8.41±0.35 4.16
2.7 提取回收率试验 16 16.28±0.57 3.50 16.27±0.49 3.01 16.30±0.53 3.25 15.90±0.71 4.47
按“2.5”项下方法配制左乙拉西坦低、中、高质量浓
2.10 测定方法的应用
度（1.5、20、40 µg/mL），卡马西平低、中、高质量浓度
收集22例患者的样本血浆，其中单用左乙拉西坦的
（0.6、8、16 µg/mL）的混合血浆质控样品，按“2.3”项下方
患者10例、单用卡马西平的患者10例、同时使用两种药
法处理后，再按“2.1”项下测定条件进样分析，记录待测
物的患者 2 例，收集其全血至少 1 mL（所有患者已连续
成分与内标峰面积比值R1。另取空白血浆，按“2.3”项下
服药1周并在下次服药前采集血样），置于含乙二胺四乙
方法处理（不加入内标）后，加入混合质控工作液及内标
酸的采血管中，以3 500 r/min离心10 min后分离上层血
溶液（1 µg/mL，按“2.2.2”项下方法制得，下同）适量，获
浆，按“2.3”项下方法处理，再按“2.1”项下测定条件进样
得与上述混合血浆质控样品中待测成分及内标相同质
分析，根据随行标准曲线计算患者血浆中左乙拉西坦和
量浓度的样品，按“2.1”项下测定条件进样分析，记录待
卡马西平的浓度，每个样本检测1次，结果见表3。结果
测成分与内标峰面积比值R2。每个质量浓度平行测定6
显示，所测血药浓度均在定量分析的线性范围内，左乙
份，按下式计算提取回收率：提取回收率＝（R1的平均
拉西坦的变异系数大，提示不同患者体内左乙拉西坦血
值）/（R2的平均值）×100％，结果见表1。 药浓度的差异大。
2.8 基质效应考察
表3 左乙拉西坦、卡马西平血药浓度测定结果
取6份来源不同的空白血浆，按“2.3”项下方法处理
结果（x±s）/ 中位数/ 最小值/ 最大值/ 四分位距/ 变异系数/
（不加入内标）得到空白基质，加入低、高质量浓度的混 待测成分 n （μg/mL） （μg/mL） （μg/mL） （μg/mL） （μg/mL） ％
合质控工作液及内标溶液（1 µg/mL），按“2.1”项下测定 左乙拉西坦 12 11.63±11.23 8.16 3.36 40.90 7.59 96.56
卡马西平 12 6.10±1.73 5.58 3.64 9.93 1.99 28.36
条件进样分析，记录待测成分与内标峰面积。另用甲醇
稀释低、高质量浓度的混合质控工作液，得到与上述样 3 讨论
品质量浓度相同的样品，加入等量内标，按“2.1”项下测 本文建立了同时测定左乙拉西坦、卡马西平血药浓
定条件进样分析，记录待测成分与内标峰面积。按下式 度的 HPLC-MS/MS 法，该方法操作简单、分析时间短，
计算内标校正基质因子：内标校正基质因子＝[（有基质 3.8 min内即可完成对两种药物的快速分析，大大缩短了

·990 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 8 中国药房 2022年第33卷第8期