Page 97 - 《中国药房》2022年7期

50 24 h 48 h a
a a b b b b b
酪氨酸酶活性促进率/％ 30 a a a a a b b b b
40
a
a

20
10

0 b
模型对照组 溶媒对照组 部位10 μg/mL组 部位50 μg/mL组 祛白片乙酸乙酯 祛白片乙酸乙酯 10 μmol/L组 50 μmol/L组 100 μmol/L组 150 μmol/L组 200 μmol/L组
祛白片乙酸乙酯
祛白片乙酸乙酯
祛白片乙酸乙酯
8-MOP
8-MOP
8-MOP
8-MOP
8-MOP
部位100 μg/mL组
部位150 μg/mL组
部位200 μg/mL组
a：与模型对照组比较，P＜0.01；b：与溶媒对照组比较，P＜0.01
图5 药物对脱黑色素细胞中酪氨酸酶活性的影响（x±±s，n＝5）
4 讨论 8-MOP给药组均可使细胞数量逐渐增加，且作用时间越
4.1 祛白片乙酸乙酯部位化学成分分析 长，细胞增多越明显。CCK-8比色法和裂解法检测结果
祛白片传统工艺为水煎提取，临床效果较好，有效 显示，与模型对照组、溶媒对照组分别比较，祛白片乙酸
[4]
成分多为亲水性物质 。中药有效部位的研究原则为： 乙酯部位给药组、8-MOP给药组给药培养24、48 h，均可
如果在水提取液中的有效成分为亲水性物质，在亲脂性 显著提高脱黑色素细胞的细胞增殖率和促黑色素生成
溶剂中难溶解，就需要用弱亲脂性的溶剂（如乙酸乙酯、 率，初步证实祛白片乙酸乙酯部位的抗白癜风作用。进
[14]
丁醇等）对有效成分进行富集 。本文提取获得祛白片 一步研究祛白片乙酸乙酯部位对黑色素形成过程中限
乙酸乙酯部位，并采用UPLC-MS进行成分分析，初步确 速酶酪氨酸酶活性影响的结果显示，与模型对照组、溶
定了祛白片乙酸乙酯部位所含的64种化合物结构（正离 媒对照组分别比较，祛白片乙酸乙酯部位、8-MOP 给药
子模式下 37 种，负离子模式下 41 种），得各化合物的相 培养 24、48 h，均可显著提高脱黑色素细胞中酪氨酸酶
对百分含量。正离子模式下相对百分含量排名前3位的 活性，初步推测祛白片乙酸乙酯部位的抗白癜风作用是
化合物分别为：补骨脂色烯查尔酮（21.06％）、7-O-（3，3- 通过提高酪氨酸酶活性实现的，这一推测也为下一步药
二甲基烯丙基）-东莨菪素（16.31％）和比克白芷素 理机制研究奠定了基础。
（16.21％）；负离子模式下相对百分含量排名前3位的化 4.3 祛白片乙酸乙酯部位与祛白片全方对脱黑色素细
合物分别为：补骨脂色烯查尔酮（13.80％）、橙黄决明素 胞模型影响的对比分析
（11.13％）和罂酸（9.62％）。有14种化合物在正、负离子 有学者曾研究祛白片全方对小鼠 B16 脱黑色素细
模式下均有检出，分别为：补骨脂色烯查尔酮、7-O-（3，3- 胞模型的影响，结果表明，祛白片 50 μg/mL 作用 24 h 或
二甲基烯丙基）-东莨菪素、黄决明素、蛇床子素、8-牻牛 25 μg/mL作用48 h，均可提高脱黑色素细胞中的酪氨酸
儿醇基补骨脂素、大黄酚、反-N-（4-羟基苯乙基）阿魏酸 酶活性，而祛白片100 μg/mL作用24、48 h均无酶活性促
酰胺、补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、橙黄决明素、D-芝麻 进作用，反而呈明显的酶活性抑制作用，与本文研究结
素、异欧前胡内酯、柳杉醇、罂酸。在以上 14 种化合物 果趋势不同，但与本研究结果并不矛盾。由于祛白片全
中，补骨脂类化合物占比最大，其中补骨脂色烯查尔酮 方经乙酸乙酯萃取后，乙酸乙酯中富集了溶解性较好的
在正、负离子模式下相对百分含量均最高。研究显示， 成分，不溶或微溶于乙酸乙酯的成分含量极低，因此，无
补骨脂类化合物长期用于治疗白癜风 [21－22] ，故笔者推测 论是化合物种类还是化合物相对百分含量均与祛白片
祛白片乙酸乙酯部位抗白癜风作用可能是多种补骨脂 全方存在较大差异。本研究以乙酸乙酯部位为研究对
类化合物共同作用的结果，但这一观点有待下一步研究 象，探究祛白片的有效部位，并通过研究乙酸乙酯部位
明确。 成分及活性进而发现活性化合物，这也是本研究的根本
4.2 祛白片乙酸乙酯部位对脱黑色素细胞模型的药效 目的之一。此外，以上研究结果引发笔者思考优化祛白
学分析 片原有制备工艺，即将祛白片水煎液用乙酸乙酯萃取后
本研究通过倒置生物显微镜观察发现，与模型对照 制备成制剂，既保留原有药效，又减小服用剂量和不良
组、溶媒对照组分别比较，祛白片乙酸乙酯部位给药组、 反应（除去杂质）。

中国药房 2022年第33卷第7期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 7 ·859 ·