Page 101 - 《中国药房》2022年7期

5、6 mL，分别置于50 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀。分 90 87.30
别取上述溶液2 mL，按“2.1.3（3）”项下方法显色，于485 80 75.77
nm 波长处测定吸光度。以葡萄糖质量浓度为横坐标 70 70.33 69.85
（X）、吸光度为纵坐标（Y）进行线性回归，得回归方程为 Y/分
60 57.48
Y＝5.604 1X－0.006 6（r ＝0.999 6），表明葡萄糖质量浓
2
50
度在0.002 4～0.014 4 mg/mL范围内线性关系良好。
（5）精密度试验：取供试品溶液（编号 S1），按“2.1.3 40
15 20 25 30 35
（3）”项下方法显色，显色后重复测定6次吸光度，结果吸 炒制时间/min
光度的RSD为0.05％（n＝6），表明仪器精密度良好。 A.随炒制时间变化综合得分图（固定炒制温度140 ℃）
（6）稳定性试验：取供试品溶液（编号 S1），按“2.1.3 90 85.96
（3）”项下方法显色，显色后分别在0、20、40、60、80、100、 80 79.90 79.58
120 min 时测定吸光度，结果吸光度的 RSD 为 0.87％
70 66.36
（n＝7），表明供试品溶液在120 min内稳定。 Y/分
（7）重复性试验：取样品（编号 S1）0.5 g，共 6 份，按 60 57.30
“2.1.3（2）”项下方法制备供试品溶液，按“2.1.3（3）”项下 50
方法显色，显色后测定吸光度并按标准曲线法计算含
40
量，结果多糖含量的 RSD 为 0.58％（n＝6），表明方法有 110 120 130 140 150
炒制温度/℃
较好的重复性。 B.随炒制温度变化综合得分图（固定炒制时间25 min）
（8）加样回收率试验：取已知含量的样品（编号S1）， 图1 单因素实验结果
共 6 份，每份 0.25 g，分别精密加入 D-无水葡萄糖 6 mg，
表3 金樱子盐炙工艺正交试验的因素与水平
按“2.1.3（2）”项下方法制备供试品溶液，按“2.1.3（3）”项
水平 A/℃ B/min C/（次/min）
下方法显色，显色后测定吸光度并计算加样回收率，结
1 130 20 10
果多糖的平均加样回收率为 99.32％，RSD 为 2.35％ 2 140 25 15
（n＝6），表明方法准确度良好。 3 150 30 20
2.1.4 单因素实验 根据实际情况炒锅转数有 10、15、 表4 金樱子盐炙工艺正交试验的设计与结果
20 次/min 共 3 种条件，固定炒锅转数为 15 次/min，对炒 因素 外观性状 多糖含 水分/
试验号 Y/分
制时间与温度进行单因素实验。取 10 份 S1 样品，每份 A/℃ B/min C/（次/min） 空列 评分/分 量/％ ％
1 1 1 1 1 34.87 3.05 16.45 62.67
100 g，分别加入食盐水[水盐比例8∶1（mL/g）]，拌匀闷润
2 1 2 2 2 40.00 2.97 14.08 66.64
120 min，按“2.1”项下方法计算综合得分（Y），实验结果 3 1 3 3 3 39.96 2.91 13.50 63.36
如图1。根据实验结果可知，炒制时间25 min、炒制温度 4 2 1 2 3 41.19 3.03 10.40 79.50
5 2 2 3 1 49.54 3.08 9.58 93.13
140 ℃时综合评分最高。
6 2 3 1 2 43.96 2.93 8.14 79.42
2.1.5 正交试验设计 依据单因素实验结果，采用正交 7 3 1 3 2 41.67 2.81 8.66 67.32
试验的 3 因素 3 水平设计，以炒制温度（A）、炒制时间 8 3 2 1 3 45.36 2.73 7.12 68.20
（B）、炒锅转数（C）为自变量，综合评分（Y）为因变量，优 9 3 3 2 1 40.24 2.67 6.34 60.24
K1 192.67 209.49 210.30 216.03
化金樱子的盐炙工艺。试验设计因素与水平见表 3，正
K2 252.04 227.97 206.37 213.39
交试验设计与结果见表 4。利用 SPSS 26.0 软件进行方 K3 195.76 203.01 223.81 211.06
差分析，结果见表 5。根据极值（r）大小与方差分析可 R 19.79 8.32 5.81 1.66
知，炒制温度（A）对试验工艺影响最大，其次是炒制时间 表5 金樱子盐炙工艺正交试验方差分析结果
（B）、炒锅转数（C），其中炒制温度与炒制时间的影响有 因素 偏差平方和 自由度 F a P
统计学意义，炒锅转数的影响无统计学意义。根据分析 A 744.900 2 179.935 0.006
B 111.764 2 26.997 0.033
结果确定最佳炮制的工艺条件是 A2B2C3，即将金樱子与 C 55.765 2 13.470 0.069
适量食盐水拌匀，置于140 ℃预热炒锅内，炒制25 min， 误差 4.140 2
炒锅转数为20次/min。 a：F0.05 （2，2）＝19.0
2.2 金樱子盐炙前后HPLC指纹图谱与色度值研究 梯度洗脱（0～48 min，4％A→9％A；48～70 min，9％A→
2.2.1 盐金樱子的制备 取10批金樱子样品各100 g，按 13％A；70～110 min，13％A→21％A）；流速为1.0 mL/min；
“2.1.5”项下优化工艺制备盐金樱子，编号为Y1～Y10。 检测波长为280 nm；进样量为10 μL；柱温为30 ℃。
2.2.2 色谱条件 以Hypersil ODS C18 （250 mm×4.6 mm， 2.2.3 混合对照品溶液的制备 精密称定没食子酸、儿
5 μm）为色谱柱，以乙腈（A）-0.1％磷酸溶液（B）为流动相， 茶素、鞣花酸对照品适量，置于同一25 mL量瓶中，加甲

中国药房 2022年第33卷第7期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 7 ·863 ·