Page 65 - 《中国药房》2022年7期

2 方法与结果 2.3 HPLC法测定柚皮苷和野漆树苷含量
2.1 药材（饮片）中水分含量测定 2.3.1 溶液的制备 （1）混合对照品溶液：精密称取柚
取表 1 中样品，除杂后处理成合适大小，粉碎，过 3 皮苷、野漆树苷对照品各适量，置于同一10 mL量瓶中，
号筛，即得样品粉末。取样品粉末1.0 g，精密称定，置于 以甲醇溶解并定容，制备成上述成分质量浓度分别为
红外水分测定仪中，于 105 ℃下测定样品中水分的含 2.08、1.03 mg/mL的混合对照品溶液，使用0.22 μm微孔
量，每个样品平行测定3次，取平均值。结果显示，爪类 滤膜过滤，收集滤液，即得。（2）供试品溶液：取表1中样
药材的水分含量为 6.64％～10.14％，均值为 9.01％；橘 品的粉末各 0.5 g，精密称定，置于 100 mL 具塞锥形瓶
红胎的水分含量为6.75％～8.73％，均值为8.28％；柚果 中，精密加入石油醚 50 mL，超声（功率 500 W，频率 40
的水分含量为5.50％～9.76％，均值为8.59％；饮片的水 kHz，下同）处理 30 min，静置 20 min，弃去上清液，置于
分含量为7.35％～10.34％，均值为8.49％。以上结果均 80 ℃恒温水浴锅中挥干瓶中剩余的石油醚，精密加入甲
符 合 相 关 标 准 规 定（爪 类 药 材 的 水 分 含 量 不 高 于 醇50 mL，称定质量，超声，静置，冷却至室温；再次称定
[3]
[1]
11.0％ ，橘红胎的水分含量不高于 9.0％ ，柚果的水分 质量，并以甲醇补足减失的质量，摇匀，用 0.22 μm 微孔
含 量 不 高 于 13.0％ [1，4] ，饮 片 的 水 分 含 量 不 高 于 滤膜滤过，取续滤液，即得。（3）阴性样品溶液：取甲醇适
[1]
13.0％ ）。结果见表2。 量，用0.22 μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
表 2 化橘红药材（饮片）中水分含量及化橘红药材（饮 2.3.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱条件参考文
片对应药材）的直径测定结果 献[13]设置。采用 Thermo Bos Hypersil C18色谱柱（250
水分含 直径/ 水分含 直径/ 水分含 直径/ 水分含 直径/ mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇为流动相A、冰乙酸-水（4∶61，
编号 编号 编号 编号
量/％ cm 量/％ cm 量/％ cm 量/％ cm V/V）为流动相 B 进行梯度洗脱（0～35 min，25％A→
1 8.46 5 25 9.35 14 49 10.05 － 73 7.39 5 55％A；35～38 min，55％A→25％A；38～45 min，25％
2 8.52 4 26 8.78 15 50 10.34 － 74 8.42 5
3 8.52 6 27 7.92 21 51 10.10 － 75 7.82 7 A）；紫外检测波长为 283 nm；柱温为 35 ℃；流速为 1.0
4 8.47 7 28 9.62 21 52 9.22 － 76 8.78 6 mL/min；进样量为10 μL。取“2.3.1”项下各溶液适量，分
5 8.37 5 29 9.85 19 53 9.36 － 77 8.82 7 别按此色谱条件进样测定，记录色谱图（见图 1）。结果
6 8.52 5 30 6.64 20 54 7.77 － 78 8.96 7
7 8.42 4 31 9.13 18 55 8.17 － 79 9.00 7 表明，柚皮苷、野漆树苷的色谱峰峰形良好，与相邻峰
8 9.38 15 32 10.14 20 56 7.88 － 80 8.91 7 间的分离度均大于 1.5；理论板数以柚皮苷峰计不低于
9 9.73 20 33 8.21 21 57 7.82 － 81 7.35 6 3 000，对称因子在 0.95～1.05 之间，且阴性样品溶液对
10 10.09 21 34 8.74 6 58 8.17 － 82 8.29 7
11 8.81 13 35 8.33 6 59 8.33 － 83 8.57 7 测定无干扰，说明本实验的系统适用性较好。
12 9.51 17 36 8.78 6 60 8.02 － 84 8.06 8 2.3.3 方法学考察 参考文献[13]以及2020年版《中国
13 8.51 17 37 9.76 10 61 7.51 － 85 8.06 － 药典》（四部）分析方法验证指导原则 进行方法学考
[14]
14 7.39 3 38 8.78 6 62 7.98 － 86 8.25 －
15 6.75 3 39 9.63 7 63 8.10 7 87 9.27 － 察。以各待测成分峰面积的对数值（y）为纵坐标、进样
16 9.13 18 40 8.37 5 64 7.94 7 88 9.80 － 量的对数值（x）为横坐标进行回归方程拟合，得到柚皮
17 8.19 6 41 8.49 3 65 7.73 6 89 9.62 － 苷、野漆树苷的线性回归方程分别 y＝7.238 7x+5.992 7
18 8.36 18 42 7.98 5 66 7.88 7 90 9.18 －
19 8.73 3 43 9.09 8 67 7.77 7 91 8.17 － （r＝0.999 5）、y＝7.031 2x+4.163 4（r＝0.999 5），线性范
20 8.53 5 44 9.22 6 68 8.02 6 92 8.21 － 围分别为 0.02～2.08、0.01～1.03 mg/mL。精密度试验
21 8.40 4 45 5.50 8 69 8.82 5 93 8.57 － 中，柚皮苷、野漆树苷峰面积的 RSD 分别为 1.18％、
22 8.67 6 46 7.98 7 70 8.54 4
23 9.57 5 47 8.74 － 71 8.52 4 1.50％（n＝5），表明仪器精密度良好；重复性试验中，柚
24 9.09 20 48 8.65 － 72 7.88 5 皮苷、野漆树苷含量的 RSD 分别为 1.30％、1.44％（n＝
－：收集样品为饮片，未能测得原药材直径 6），表明本方法的重复性良好；稳定性试验（室温放置
2.2 药材直径测量 24 h）中 ，柚 皮 苷 、野 漆 树 苷 峰 面 积 的 RSD 分 别 为
参照文献[12]方法，使用游标卡尺测量46批药材和 0.57％、1.58％（n＝6），表示供试品溶液在24 h内稳定性
22 批饮片对应原药材的直径。其中，橘红胎、柚果药材 良好；加样回收率试验中，柚皮苷、野漆树苷的平均加样
采用横向与纵向直径的平均值代表其直径；五爪、七爪 回收率分别为 98.77％、98.43％，RSD 分别为 0.91％、
压片类药材通过测量周长计算其直径。结果显示，68批 1.15％（n＝6），表明本方法的准确度较好；柚皮苷的检测
样品的直径为3～21 cm，均值为9.1 cm。其中橘红胎的 限为3.288 5 μg/mL、定量限为10.951 6 μg/mL，野漆树苷
直径为 3～7 cm，均值为 4.7 cm；柚果的直径为 3～10 的检测限为 0.218 2 μg/mL、定量限为 0.717 3 μg/mL，表
cm，均值为 6.3 cm；毛橘红爪的直径为 13～21 cm，均值 明本方法的灵敏度较高。
为 17.4 cm；光橘红爪的直径为 14～21 cm，均值为 18.9 2.3.4 样品含量测定 分别称取 93 批样品的粉末各
cm。结果见表2。 0.5 g，分别按“2.3.1（2）”项下方法制备供试品溶液，然后

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