Page 57 - 《中国药房》2022年7期
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significantly（P＜0.05）. Compared with model group，serum levels of TG，TC，Cr and BUN，renal coefficient，the scores of renal
        tubular injury and glomerular sclerosis，protein and mRNA expression of Notch1，Jagged1 and Hes1 in renal tissue were all
        decreased in low-dose，medium-dose and high-dose groups of Compound danshen tablets（P＜0.05），and most indexes showed a
        dose-dependent trend；the degree of renal lesions was reduced. CONCLUSIONS Compound danshen tablets possess obvious
        hypolipidemic effect，and can protect the renal function of hyperlipidemia model rats by down-regulating Notch1/Jagged1 signal
        pathway.
        KEYWORDS    Compound danshen tablets；hyperlipidemia；renal function；Notch1/Jagged1 signal pathway；blood lipid


            高脂血症是由脂肪代谢紊乱引起的一种血浆脂质                          购自郑州市惠济区华兴实验动物养殖场，动物生产许可
                  [1]
        失衡性疾病 ，以血液中总胆固醇（total cholesterol，TC）、             证号：SCXK（豫）2019-0002。所有大鼠饲养于河南中医
        三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low                药大学医学机能实验室，实验单位使用许可证号：SYXK
        density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）水平升高或高密      （豫）2020-0004。实验过程严格遵守“3R”原则。实验期
        度 脂 蛋 白 胆 固 醇（high density lipoprotein-cholesterol，  间 动 物 饲 养 室 环 境 温 度 为 20～22 ℃ ，相 对 湿 度 为
        HDL-C）水平降低为主要临床表现           [2－3] ，是心脑血管疾病的        55％～60％，正常光照，大鼠自由饮水采食。高脂饲料
        主要诱发因素。Moorhead等 于1982年提出“脂质肾毒                     由郑州市惠济区华兴实验动物养殖场提供，配方比例为
                                 [4]
        说”后，高脂血症与慢性肾脏病（chronic kidney diseases，            10％白糖、10％猪油、10％蛋黄粉、2％胆固醇、68％基础
        CKD）的关系越来越受到学者关注。有研究表明，血脂                          饲料。
        异常升高可引起肾小球硬化及固有细胞凋亡，在肾损伤                           1.2 主要仪器
        发生过程中起重要作用 。临床上常用他汀类药物控制                               BS110S型电子天平购自北京赛多利斯天平有限公
                            [5]
        血脂水平，但该药长期使用也会对肾功能造成一定影                            司；MR-96TB型酶标仪购自骋克仪器（上海）有限公司；
        响，且停药后血脂水平易反弹，故寻找既能有效降血脂                           RM2235 型石蜡切片机购自德国 Leica 公司；D3024R 型
        又能保护肾脏的药物意义重大。Notch信号通路是存在                         台式高速冷冻型微量离心机购自大龙兴创实验仪器（北
        于真核生物中的一条高度保守的细胞间信号通路，可影                           京）股份公司；YD-6D 型组织包埋机、YD-A 型组织摊片
        响细胞增殖、分化、迁移、生长和凋亡等过程。在急慢性                          机、YD-B 型组织烤片机购自金华市科迪仪器设备有限
        肾损伤进程中均存在 Notch 信号通路的异常激活，且肾                       公司；CX23 型光学显微镜购自日本 Olympus 公司；Step
        小球、肾小管上皮 Notch 信号通路的激活均与肾小球硬                       One Plus型实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）仪购
        化、蛋白尿及肾纤维化有关，而Notch信号通路中的某些                        自美国ABI公司。
                                        [5]
        成分也被认为是肾损伤的重要标志物 。血脂异常升高                           1.3  主要药物与试剂
        会损伤肾脏，这一过程也存在 Notch 信号通路的异常激                           复方丹参片（0.6 g/片，批号 G20A045）购自广州白
        活，因此，通过下调Notch信号通路以改善肾功能成为高                        云山和记黄埔中药有限公司；辛伐他汀片（10 mg/片，批
        血脂状态下保护肾脏的重要思路之一。 复方丹参片是                           号1810409）购自华润双鹤利民药业（济南）有限公司；氨
        以丹参为君药，辅以三七、冰片制成的一种复方制剂，具                          基甲酸乙酯（批号 20200326）购自天津百伦斯生物技术
        有活血化瘀、理气止痛之功效，并对肾脏具有保护作                            有限公司；DAPT（批号 D7230）购自北京索莱宝科技有
          [6]
        用 。（2S）-N-[N-（3，5-二氟苯乙酰基）-L-丙氨酰]-2-苯基              限公司；苏木精染色液（批号20211008）、伊红染色液（批
        甘氨酸叔丁酯（简称为DAPT）是较早发现的特异性γ-分                        号 20211009）均购自福州飞净生物科技有限公司；TC
        泌酶抑制剂，可通过抑制γ-分泌酶复合体阻断 Notch 信                      （批号 A111-1-1）、TG（批号 A110-1-1）、肌酐（creatinine，
                                  [7]
        号通路传导，延缓肾损伤进程 。本实验采用腹腔注射                           Cr，批号 C011-1-1）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN，
        蛋黄乳液后饲喂高脂饲料诱导制备高脂血症大鼠模型，                           批号C013-1-1）酶联免疫吸附试验检测试剂盒均购自南
        研究复方丹参片对大鼠的降血脂及肾功能保护作用；考                           京建成生物工程研究所；磷酸盐缓冲液（PBS，批号
        虑到血脂水平及Notch信号通路在肾损伤方面的重要作                         ZLI-9061）、柠檬酸盐缓冲液（批号ZLI-9064）、兔SP试剂
        用，本实验选择辛伐他汀联合 DAPT 为阳性对照药，以                        盒（批号 SP-9001）、DAB 显色试剂盒（批号 ZLI-9018）、
        降血脂和阻断Notch信号通路的双重作用为阳性衡量标                         生物素标记的羊抗兔二抗（批号ZB-2306）均购自北京中
        准来探讨复方丹参片的肾功能保护作用机制。                               杉金桥生物技术有限公司；兔抗大鼠 Notch 信号受体 1
        1 材料                                               （Notch1）抗 体（克 隆 号 bs-1335R）、Notch 信 号 配 体 1
        1.1  动物来源                                          （Jagged1）抗体（克隆号 bs-1448R）、发状分裂相关增强
            雄性 SD 大鼠 60 只，体质量 180～200 g，鼠龄 8 周，            子 1（Hes1）抗体（克隆号bs-3948R）均购自北京博奥森生


        中国药房    2022年第33卷第7期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 7  ·819 ·
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