Page 49 - 《中国药房》2022年7期

2.5.3 重复性试验 精密称取同一批益心巴迪然吉布 平方欧氏距离
0 5 10 15 20 25
亚颗粒（编号 S10）6 份，按“2.3”项下方法制备供试品溶 S7
液，按“2.1”项下色谱条件进样分析，分别记录各共有峰 S8
的保留时间和峰面积，以TL为参照峰（S）计算得各共有 S10
S6
峰相对保留时间的 RSD 均小于 0.2％（n＝6），相对峰面
S9
积的RSD均小于2.0％（n＝6），表明该方法重复性良好。 S3
2.5.4 指纹图谱建立及相似度评价 取 10 批益心巴迪 S4
然吉布亚颗粒适量，按“2.3”项下方法制备供试品溶液， S1
S2
按“2.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图，将数据导
S5
入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）》，采
图3 10批益心巴迪然吉布亚颗粒的聚类分析结果
用中位数矢量法进行多点校正，设定时间窗宽度为0.60
min，生成10批益心巴迪然吉布亚颗粒的指纹图谱，见图 3 讨论
2。结果显示，10批益心巴迪然吉布亚颗粒共有13个共 3.1 色谱条件的优化
有峰，通过与混合对照品溶液比较，指认出2号峰为LG、 本研究前期考察了不同流动相（乙腈-0.2％磷酸溶
6 号峰为 APG、7 号峰为 RA、8 号峰为 DG、11 号峰为 液、乙腈-0.5％甲酸溶液）、不同色谱柱（Agilent ZORBAX
TL。进一步进行相似度评价发现，10 批益心巴迪然吉 Extend-C18、Shim-Pack ODS）对有效成分色谱峰分离的
布亚颗粒的相似度为 0.598～0.990，说明该制剂各批次 影响，结果显示，当流动相为乙腈-0.5％甲酸溶液、色谱
间存在一定差异。相似度评价结果见表4。 柱为Shim-Pack ODS时，各成分色谱峰的分离效果和峰
形较好。同时，在进行梯度洗脱时，笔者采用了反常规
116.68
的方法，在59～70 min时将乙腈（A相）比例从26％降至
87.41 R 8％，在 70～100 min 时又将其升高至 27％，从而可以将
S10
S9 TL色谱峰与旁边的杂质峰完全分开。
mAU 58.13 S8 3.2 有效成分选择及指纹图谱研究
S7
S6
S5 益心巴迪然吉布亚颗粒是由香青兰药材组成的单
28.86 S4
方制剂，其质量标准中没有含量测定项，故本研究选取
S3
S2
－0.42 S1 该颗粒剂中含量较高的 5 种有效成分（LG、APG、RA、
0 15.94 31.89 47.83 63.78 79.72 95.67 111.61 DG、TL）含量为指标，并结合指纹图谱研究来评价其质
t/min
量。结果显示，10批益心巴迪然吉布亚颗粒的相似度为
图2 10批益心巴迪然吉布亚颗粒的HPLC指纹图谱及
0.598～0.990，表明该制剂各批次间存在一定差异。进
对照指纹图谱（R）
一步进行聚类分析发现，S6～S10可聚为一类，相似度均
表4 10批益心巴迪然吉布亚颗粒指纹图谱的相似度评 大于0.8，且这几种样品中RA、DG、TL含量较低；S1～S5
价结果 可聚为一类，相似度在0.598～0.976之间，且这几批样品
样品 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 对照 中RA、DG、TL含量较高。由此可知，该制剂各批次间的
S1 1.000 0.997 0.998 0.632 0.988 0.543 0.553 0.491 0.493 0.585 0.598
S2 0.997 1.000 0.997 0.650 0.992 0.559 0.570 0.505 0.507 0.601 0.616 差异可能与上述几种成分的含量差异有关。这种差异
S3 0.998 0.997 1.000 0.648 0.991 0.560 0.573 0.510 0.512 0.609 0.617 的产生可能与香青兰药材产地、采收时期等有关；另外，
S4 0.632 0.650 0.648 1.000 0.729 0.883 0.911 0.808 0.807 0.958 0.976 该制剂生产过程中的药材煎煮、浓缩、制粒等因素也可
S5 0.988 0.992 0.991 0.729 1.000 0.629 0.642 0.572 0.572 0.679 0.695
S6 0.543 0.559 0.560 0.883 0.629 1.000 0.869 0.958 0.975 0.901 0.910 能会造成上述几种成分差异。笔者前期研究发现，香青
S7 0.553 0.570 0.573 0.911 0.642 0.869 1.000 0.880 0.835 0.961 0.961 兰药材茎、叶中上述有效成分的含量差异较大，因此，制
S8 0.491 0.505 0.510 0.808 0.572 0.958 0.880 1.000 0.982 0.863 0.857 药企业在生产该制剂时，应尽可能固定药材的来源和投
S9 0.493 0.507 0.512 0.807 0.572 0.975 0.835 0.982 1.000 0.847 0.843
S10 0.585 0.601 0.609 0.958 0.679 0.901 0.961 0.863 0.847 1.000 0.990 料比例，以期达到提高制剂稳定性的目的。
对照 0.598 0.616 0.617 0.976 0.695 0.910 0.961 0.857 0.843 0.990 1.000 综上所述，本研究建立了益心巴迪然吉布亚颗粒中
2.5.5 聚类分析 以 10 批益心巴迪然吉布亚颗粒指纹 5 种有效成分的含量测定方法及其指纹图谱，可为该颗
图谱中5种有效成分的含量为评价指标，运用SPSS 22.0 粒剂的质量控制提供依据。
统计分析软件进行聚类分析，以组间连接为聚类方法， 参考文献
测量区间为平方欧氏距离，结果见图3。结果显示，10批 [ 1 ] 卫生部.药品标准：维吾尔药分册[S].乌鲁木齐：新疆科技
益心巴迪然吉布亚颗粒在平方欧氏距离为 10 的条件下 卫生出版社，1999：181.
可聚为2类，其中S6～S10聚为一类，S1～S5聚为一类。 [ 2 ] 李杰.民族药用植物香青兰近年研究概况[J].中国民族医

中国药房 2022年第33卷第7期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 7 ·811 ·