Page 62 - 《中国药房》2022年6期

表 2 各组大鼠胃组织中 MDA、NO、EGF、SOD 含量的 2.2.6 重复性考察 取同一批芍药甘草汤提取物（编号
测定结果（x±±s，n＝6） S11），按“2.2.2（2）”项下方法平行制备6份供试品溶液，
组别 MDA/（nmol/mL） NO/（μmol/L） EGF/（pg/mL） SOD/（ng/mL） 按“2.2.3”项下色谱条件进样测定，以甘草酸峰为参照峰
对照组 1.241±0.104 14.048±0.232 78.260±2.314 152.932±10.110 （S），计算各共有峰的相对峰面积和相对保留时间。结
模型组 2.211±0.089 ad 8.968±0.173 ad 46.708±2.092 ad 66.451±2.127 a
S1芍药甘草汤组 1.836±0.174 bd 10.218±0.095 bc 55.315±6.798 bd 108.479±6.488 bd 果显示，各共有峰相对峰面积和相对保留时间的RSD均
S2芍药甘草汤组 1.662±0.062 b 10.372±0.094 b 56.406±5.782 bc 109.946±5.081 bc 不高于2.70％（n＝6），表明本方法重复性良好。
S3芍药甘草汤组 1.696±0.059 b 11.179±0.674 b 57.651±1.815 b 103.771±8.764 bd
S4芍药甘草汤组 1.602±0.050 b 10.563±0.130 b 57.006±1.334 b 130.888±4.269 bc 2.2.7 指纹图谱的建立 取 11 批白芍饮片、炙甘草饮
S5芍药甘草汤组 1.299±0.047 bd 10.718±0.456 b 58.776±1.839 b 140.688±8.647 bd 片，按“2.2.1”项下方法制备提取物，再按“2.2.2（2）”项下
S6芍药甘草汤组 1.553±0.126 bc 10.854±0.291 b 57.564±4.512 b 118.672±2.975 b 方法制备供试品溶液，分别取 10 μL 按“2.2.3”项下色谱
S7芍药甘草汤组 1.597±0.105 b 10.551±0.255 b 58.238±3.030 b 126.861±11.171 b
S8芍药甘草汤组 1.596±0.055 b 10.337±0.645 b 54.103±2.638 bd 128.646±4.261 b 条件进样测定，记录色谱图。将色谱数据导入《中药色
S9芍药甘草汤组 1.603±0.070 b 10.829±0.354 b 57.513±0.860 b 117.195±7.626 b 谱指纹图谱相似度评价系统（2004A 版）》，以 S1 样品图
S10芍药甘草汤组 1.824±0.073 bc 10.131±0.454 bd 57.979±2.981 b 112.228±4.081 b 谱为参照图谱，将时间窗宽度设为 0.1 s，采用多点校正
S11芍药甘草汤组 1.757±0.075 b 10.597±0.282 b 57.642±5.428 b 119.209±6.188 b
胃康灵组 1.673±0.079 b 10.786±0.177 b 61.436±0.928 b 121.356±11.692 b 法进行全峰匹配以生成叠加指纹图谱，采用中位数法生
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与胃康灵 成对照指纹图谱（R），详见图 2。图 2 显示，11 批样品图
组比较，P＜0.05，d：与胃康灵组比较，P＜0.01 谱中共有23个共有峰。

称取芍药甘草汤提取物 0.6 g，置于 100 mL 具塞锥形瓶
中，加入甲醇50 mL，轻轻振荡摇匀后称定质量，超声（功 461.87
2 10 22
率 500 W，频率 59 kHz）处理 45 min，放冷后再次称定质 346.39 12
量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，经 0.45 μm 微孔滤膜 mAU 230.91 1 5 4 8 14 15 20
滤过，取续滤液作为供试品溶液。 3 6 7 9 11 13 16 17 18 19 21 23
S11
S10
115.44 S9 S8
2.2.3 色 谱 条 件 以 Diamonsil C18 （2）（250 mm × 4.6 S7 S6 S5
S4
S3 S2
mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈（A）-0.2％磷酸溶液（B）为 －0.04 S1
0 8.70 17.39 26.09 34.78 43.48 52.18 60.87
流动相进行梯度洗脱（0～5 min，10％A→13％A；5～11 t/min
A.叠加指纹图谱
min，13％A→14％A，11～20 min，14％A→16％A；20～
25 min，16％A→18％A；25～27 min，18％A；27～28 min， 346.39
18％A→20％A；28～34 min，20％A；34～40 min，20％A→
10
30％A；40～50 min，30％A→40％A；50～60 min，40％A→ 230.91 2 22
55％A）；检测波长依次为 285 nm（0～7 min）、230 nm mAU
115.44 12
（7～35 min）、360 nm（35～46 min）、258 nm（46～ 1 4 5 8 9 1415 17 19
3 6 7 11 13 16 18 20 21 23
60 min）；流速为 1 mL/min；柱温为 35 ℃；进样量为 －0.04 R
0 8.70 17.39 26.09 34.78 43.48 52.18 60.87
10 μL。 t/min
2.2.4 精密度考察 取同一芍药甘草汤供试品溶液（编 B.对照指纹图谱
号 S11），按“2.2.3”项下色谱条件连续进样 6 次，以甘草 图2 11批芍药甘草汤的HPLC叠加指纹图谱和对照指
酸峰（因甘草酸峰分离良好且在各批次样品中出峰稳 纹图谱
定）为参照峰（S），计算各共有峰的相对峰面积和相对保 2.2.8 共有峰指认 取“2.2.2”项下混合对照品溶液适
留时间。结果显示，各共有峰相对峰面积和相对保留时 量，按照“2.2.3”项下色谱条件进样测定，记录色谱图（图
间的 RSD 均不高于 2.90％（n＝6），表明本方法精密度 3）。通过对比混合对照品图谱与对照指纹图谱中各成
良好。 分峰的保留时间，共指认出7个共有峰，分别为没食子酸
2.2.5 稳定性考察 取同一芍药甘草汤供试品溶液（编 （峰5）、芍药内酯苷（峰9）、芍药苷（峰10）、甘草苷（峰12）、
号 S11），分别于室温下放置 0、2、4、6、12、24 h 时按 芹糖异甘草苷（峰14）、异甘草苷（峰15）、甘草酸（峰22）。
“2.2.3”项下色谱条件进样测定，以甘草酸峰为参照峰 2.2.9 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
（S），计算各共有峰的相对峰面积和相对保留时间。结 价系统（2004A版）》对11批芍药甘草汤的指纹图谱进行
果显示，各共有峰相对峰面积和相对保留时间的RSD均 相似度评价。结果显示，11批样品的色谱图与对照指纹
不高于2.89％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置24 图谱的相似度均大于0.9，详见表3。这说明11批样品化
h内稳定性良好。 学成分的一致性良好。

·696 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 中国药房 2022年第33卷第6期