Page 71 - 《中国药房》2022年5期
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               60                                                 60
               50                                                 50
               40                                                 40
              mAU  30                                            mAU  30

               20                                                 20
               10   1      2                                      10   1
                             3
               0                                                  0
                 0    10   20   30    40   50    60                0    10    20   30    40   50    60
                                t/min                                              t/min
          图1 枸杞类胡萝卜素的HPLC对照指纹图谱(R)                             1:玉米黄质;4:玉米黄质双棕榈酸酯
                                                                       图3 混合对照溶液的色谱图
           70                                              为 0.6 mg/mL 的样品溶液。精密移取样品溶液 1 mL 和
                                          4
           60
                                                           DPPH 溶液 1 mL 置于 10 mL 比色管中,避光反应 20
           50
                                                           min 后,采用紫外分光光度计于517 nm波长处测定吸光
                  1
           40              2  3
          mAU                                       R S34  度值 Ai;另移取样品溶液 1 mL 和水 1 mL 置于 10 mL 比
           30                                              色管中,避光反应 20 min 后,采用上述方法测定吸光度
                                                    ↑      值 Aj;另移取 DPPH 溶液 1 mL 与水 1 mL 置于 10 mL 比
           20
           10
                                                    S1     色管中,避光反应 20 min,采用上述方法测定吸光度值
            0
                                                           A0。上述试验平行操作3次,取平均值,并计算DPPH自
             0     10     20    30     40    50    60
                                t/min                      由基清除率。DPPH 自由基清除率=[1-(Ai-Aj )]/A0×
          图2 34批枸杞类胡萝卜素的HPLC叠加指纹图谱                         100%。结果显示,34 批枸杞类胡萝卜素的 DPPH 自由

                                                           基清除率为1.792%~3.160%,详见表3。
        杞类胡萝卜素的HPLC图整体峰形一致,相似度均不低
                                                           表3    34批枸杞类胡萝卜素的DPPH自由基清除率测定
        于 0.903,提示不同产地枸杞中类胡萝卜素成分差异较
                                                                 结果(n=3,%%)
        小,具有较好的一致性。结果见表2。
                                                            编号       DPPH自由基清除率     编号          DPPH自由基清除率
            表2   34批枸杞类胡萝卜素的相似度评价结果
                                                            S1           2.189      S18            2.083
        编号      相似度      编号     相似度      编号     相似度         S2           2.110      S19            1.862
        S1       0.975   S13     0.984   S25     0.927      S3           2.611      S20            1.968
        S2       0.903   S14     0.991   S26     0.931      S4           1.792      S21            2.150
        S3       0.945   S15     0.913   S27     0.929      S5           2.101      S22            1.881
        S4       0.999   S16     0.972   S28     0.938      S6           3.160      S23            2.031
        S5       0.921   S17     0.981   S29     0.999      S7           1.864      S24            1.824
        S6       0.942   S18     0.997   S30     0.982      S8           2.005      S25            1.887
        S7       0.908   S19     0.954   S31     0.974      S9           1.864      S26            1.974
        S8       0.921   S20     0.957   S32     0.991      S10          1.946      S27            1.858
        S9       0.919   S21     0.943   S33     0.993      S11          2.101      S28            1.864
        S10      0.901   S22     0.981   S34     0.965      S12          1.792      S29            1.852
        S11      0.947   S23     0.934                      S13          2.073      S30            1.992
        S12      0.961   S24     0.991                      S14          3.010      S31            2.042
                                                            S15          3.160      S32            1.874
        2.5.3  共有峰的指认        取“2.3.2”项下混合对照品溶液
                                                            S16          2.110      S33            1.958
        适量,按“2.2”项下色谱条件进样分析,记录色谱图(图                         S17          1.834      S34            1.900
        3)。与图 1 和图 2 比对可知,34 批枸杞类胡萝卜素的                     2.7 枸杞类胡萝卜素的抗氧化活性谱效关系研究
        HPLC叠加指纹图谱中有4个共有峰,指认出1号峰为玉                         2.7.1  数据处理      参考文献[10]方法,将枸杞类胡萝卜
        米黄质、4号峰为玉米黄质双棕榈酸酯。                                 素指纹图谱的共有峰与DPPH自由基清除率数据进行转
        2.6 枸杞类胡萝卜素的抗氧化活性考察                                化和归一化处理,再将归一化后的DPPH自由基清除率
            称取 DPPH 19.72 mg,加无水乙醇溶解并稀释至                   数据作为参考序列[记为Y (k) ],将共有峰数据作为比较序
        0.001 9 mg/mL,避光低温保存。精密称取枸杞类胡萝卜                    列[记为 Xi(k) ],计算参考序列与比较序列的灰色关联系
                                                                      [11]
        素粉末 1.0 g,置于锥形瓶中,按“2.3.1”项下方法制备溶                   数[记为Ai(k) ] ,计算公式为:Ai(k) =[Δi(k)min+ρ×Δi(k)max]/ [Δi(k) +
        液;取1 mL置于25 mL量瓶中,加水稀释,制成质量浓度                      ρ× Δ i(k)max],其中ρ表示分辨系数(通常取 0.5),Δ i(k)=


        中国药房    2022年第33卷第5期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5  ·577 ·
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