Page 71 - 《中国药房》2022年5期
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4 4
60 60
50 50
40 40
mAU 30 mAU 30
20 20
10 1 2 10 1
3
0 0
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60
t/min t/min
图1 枸杞类胡萝卜素的HPLC对照指纹图谱(R) 1:玉米黄质;4:玉米黄质双棕榈酸酯
图3 混合对照溶液的色谱图
70 为 0.6 mg/mL 的样品溶液。精密移取样品溶液 1 mL 和
4
60
DPPH 溶液 1 mL 置于 10 mL 比色管中,避光反应 20
50
min 后,采用紫外分光光度计于517 nm波长处测定吸光
1
40 2 3
mAU R S34 度值 Ai;另移取样品溶液 1 mL 和水 1 mL 置于 10 mL 比
30 色管中,避光反应 20 min 后,采用上述方法测定吸光度
↑ 值 Aj;另移取 DPPH 溶液 1 mL 与水 1 mL 置于 10 mL 比
20
10
S1 色管中,避光反应 20 min,采用上述方法测定吸光度值
0
A0。上述试验平行操作3次,取平均值,并计算DPPH自
0 10 20 30 40 50 60
t/min 由基清除率。DPPH 自由基清除率=[1-(Ai-Aj )]/A0×
图2 34批枸杞类胡萝卜素的HPLC叠加指纹图谱 100%。结果显示,34 批枸杞类胡萝卜素的 DPPH 自由
基清除率为1.792%~3.160%,详见表3。
杞类胡萝卜素的HPLC图整体峰形一致,相似度均不低
表3 34批枸杞类胡萝卜素的DPPH自由基清除率测定
于 0.903,提示不同产地枸杞中类胡萝卜素成分差异较
结果(n=3,%%)
小,具有较好的一致性。结果见表2。
编号 DPPH自由基清除率 编号 DPPH自由基清除率
表2 34批枸杞类胡萝卜素的相似度评价结果
S1 2.189 S18 2.083
编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度 S2 2.110 S19 1.862
S1 0.975 S13 0.984 S25 0.927 S3 2.611 S20 1.968
S2 0.903 S14 0.991 S26 0.931 S4 1.792 S21 2.150
S3 0.945 S15 0.913 S27 0.929 S5 2.101 S22 1.881
S4 0.999 S16 0.972 S28 0.938 S6 3.160 S23 2.031
S5 0.921 S17 0.981 S29 0.999 S7 1.864 S24 1.824
S6 0.942 S18 0.997 S30 0.982 S8 2.005 S25 1.887
S7 0.908 S19 0.954 S31 0.974 S9 1.864 S26 1.974
S8 0.921 S20 0.957 S32 0.991 S10 1.946 S27 1.858
S9 0.919 S21 0.943 S33 0.993 S11 2.101 S28 1.864
S10 0.901 S22 0.981 S34 0.965 S12 1.792 S29 1.852
S11 0.947 S23 0.934 S13 2.073 S30 1.992
S12 0.961 S24 0.991 S14 3.010 S31 2.042
S15 3.160 S32 1.874
2.5.3 共有峰的指认 取“2.3.2”项下混合对照品溶液
S16 2.110 S33 1.958
适量,按“2.2”项下色谱条件进样分析,记录色谱图(图 S17 1.834 S34 1.900
3)。与图 1 和图 2 比对可知,34 批枸杞类胡萝卜素的 2.7 枸杞类胡萝卜素的抗氧化活性谱效关系研究
HPLC叠加指纹图谱中有4个共有峰,指认出1号峰为玉 2.7.1 数据处理 参考文献[10]方法,将枸杞类胡萝卜
米黄质、4号峰为玉米黄质双棕榈酸酯。 素指纹图谱的共有峰与DPPH自由基清除率数据进行转
2.6 枸杞类胡萝卜素的抗氧化活性考察 化和归一化处理,再将归一化后的DPPH自由基清除率
称取 DPPH 19.72 mg,加无水乙醇溶解并稀释至 数据作为参考序列[记为Y (k) ],将共有峰数据作为比较序
0.001 9 mg/mL,避光低温保存。精密称取枸杞类胡萝卜 列[记为 Xi(k) ],计算参考序列与比较序列的灰色关联系
[11]
素粉末 1.0 g,置于锥形瓶中,按“2.3.1”项下方法制备溶 数[记为Ai(k) ] ,计算公式为:Ai(k) =[Δi(k)min+ρ×Δi(k)max]/ [Δi(k) +
液;取1 mL置于25 mL量瓶中,加水稀释,制成质量浓度 ρ× Δ i(k)max],其中ρ表示分辨系数(通常取 0.5),Δ i(k)=
中国药房 2022年第33卷第5期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5 ·577 ·