Page 77 - 《中国药房》2022年4期

能与诃子有关；特木仁-5味散缺栀子阴性样品色谱图中 表1 特木仁-5味散主成分分析的特征值与累计方差贡
有 10 个共有峰，缺失的峰 2～4、8、14 可能与栀子相关； 献率
特木仁-5 味散缺黄柏阴性样品色谱图中有 9 个共有峰， 主成分 特征值 方差贡献率/％ 累计方差贡献率/％
缺失的峰 4～5、7～8、10、14 可能与黄柏有关；特木仁-5 1 8.918 59.454 59.454
2 2.661 17.738 77.191
味散缺川楝子阴性样品色谱图中有13个共有峰，缺失的
3 1.808 12.053 89.245
峰7、14可能与川楝子有关。
表2 特木仁-5味散主成分分析的初始因子载荷矩阵
2.2.6 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
价系统（2012 版）》对 10 批特木仁-5 味散进行相似度评 峰号 主成分1 主成分2 主成分3
1 －0.004 0.200 0.092
价。结果显示，与对照指纹图谱比对，10 批样品的相似
2 －0.156 0.011 0.106
度分别为 0.999、0.999、0.999、0.997、0.999、0.998、0.998、 3 －0.136 －0.116 0.098
0.998、0.999、0.999，表明10批特木仁-5味散的质量差异 4 －0.229 0.105 －0.091
5 －0.114 －0.096 0.091
较小。
6 －0.225 0.080 －0.093
2.3 化学模式识别分析 7 0.394 －0.132 0.059
2.3.1 系统聚类分析 采用 SPSS 26.0 软件，以平方欧 8 0.190 －0.060 0.073
9 －0.114 0.290 0.049
氏距离为测度，以 10 批特木仁-5 味散指纹图谱的 15 个
10 0.280 0.239 0.055
共有峰峰面积为变量，进行系统聚类分析 [19－20] 。结果显 11 0.094 －0.013 －0.110
示，当平方欧氏距离为5时，10批样品可聚为3类，S4、S9 12 0.192 0.183 －0.087
为一类，S6～S8为一类，其余批次样品为一类。10批特 13 0.050 0.089 －0.105
14 0.101 0.290 0.061
木仁-5味散的系统聚类分析树状图见图4。 15 0.230 －0.088 －0.095
平方欧氏距离
0 5 10 15 20 25 腈（1 ∶ 1，V/V）为流动相 B 进行梯度洗脱（0～10 min，
S6
92％A；10～15 min，92％A→83％A；15～40 min，83％A；
S8
40～45 min，83％A→69％A；45～60 min，69％A；60～
S7
68 min，69％A→67％A；68～80 min，67％A）；流速为
S2
样品编号 S3 1.0 mL/min；柱温为30 ℃；检测波长为253 nm；进样量为
10 μL。
S1
S5 2.4.2 专属性考察 取“2.1”项下混合对照品溶液B、供
S10 试品溶液和缺诃子、栀子、黄柏阴性样品溶液各适量，按
S4
“2.4.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图（图 5）。由
S9
图4 10批特木仁-5味散的系统聚类分析树状图 图5可见，没食子酸、栀子苷、绿原酸、鞣花酸色谱峰均与
相邻色谱峰的分离度良好，阴性样品对测定无干扰。
2.3.2 主成分分析 为更直接评价 15 个共有成分对特
2.4.3 线性关系考察 精密吸取“2.1.1”项下混合对照
木仁-5 味散的分辨能力，以方差贡献率和特征值＞1 为
品溶液B，用甲醇分别稀释2、4、8、16、32倍，分别精密吸
选择主成分的依据 [21－22] ，采用 SPSS 26.0 软件对 10 批特
取混合对照品溶液 B 和稀释后的系列样品溶液 10 μL，
木仁-5 味散进行主成分分析，结果见表 1、表 2。由表 1
按“2.4.1”项下色谱条件进样测定。以待测成分质量浓
可见，前3个主成分的累计方差贡献率为89.245％，说明
度（x）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行回归分析。结
这3个主成分包含了15个共有成分89.245％的信息，能
果显示，没食子酸、栀子苷、绿原酸、鞣花酸在相应质量
较好地反映样品的主要特征，具有代表性。由表1和表
浓度范围内与峰面积的线性关系良好，详见表3。
2可见，主成分1的信息量最大，方差贡献率为59.454％，
2.4.4 精密度试验 取没食子酸、栀子苷、绿原酸、鞣花
主要对应峰 7、8、10～12（鞣花酸）、15；主成分 2 的方差
酸对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成上述成分质
贡献率为 17.738％，主要对应峰 1（没食子酸）、4、6、9、
13、14；主成分 3 的方差贡献率为 12.053％，主要对应峰 量浓度分别为 38.0、106.8、15.7、71.8 μg/mL 的混合对照
2、3、5。由此推测可能影响特木仁-5味散质量差异的不 品溶液，按“2.4.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录
是单一成分，而是多成分协同作用所导致的结果。 峰面积。结果显示，没食子酸、栀子苷、绿原酸、鞣花酸
2.4 多成分含量测定 峰面积的 RSD 分别为 0.72％、0.48％、1.08％、0.38％
参考相关文献 [23－24] ，采用高效液相色谱法进行测定。 （n＝6），表明仪器精密度良好。
2.4.1 色谱条件 以 Cosmosil C18 （250 mm×4.6 mm，5 2.4.5 稳定性试验 取同一批特木仁-5 味散（编号 S5）
μm）为色谱柱，以 0.05％磷酸溶液为流动相 A、甲醇-乙 适量，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，并分别于室

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