Page 38 - 《中国药房》2022年3期
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典》（一部）藿香正气软胶囊的含量测定项仅对厚朴中的                           2 方法与结果
        厚朴酚、和厚朴酚和陈皮中的橙皮苷作了规定 。有文                            2.1 溶液的制备
                                                 [2]
        献采用高效液相色谱（high performance liquid chroma-           2.1.1  混合对照品溶液的制备           精密称取各对照品（甘
        tography，HPLC）法或超高效液相色谱（ultra-high perfor-          草苷1.31 mg、柚皮苷1.38 mg、橙皮苷1.23 mg、新橙皮苷
        mance liquid chromatography，UPLC）法对该药品中的厚           1.37 mg、川陈皮素1.39 mg、白术内酯Ⅲ1.34 mg、欧前胡
        朴酚、和厚朴酚、橙皮苷、苍术素等成分进行了含量测                            素1.21 mg、和厚朴酚1.29 mg、异欧前胡素1.44 mg、厚朴
        定 [3-4] 。药理学实验研究发现，上述成分具有抗炎、抗氧                      酚1.39 mg），分别置于10 mL量瓶中，加甲醇适量，超声
        化、保护心血管系统和胃肠道、镇痛、抗菌、抗腹泻等药                          （功率100 W，频率40 kHz，下同）15 min，加甲醇定容，配
        理作用   [5-7] 。可见，通过对藿香正气软胶囊中的多种指标                    制成质量浓度分别为甘草苷 131 μg/mL、柚皮苷 138
        成分进行定性定量，不仅可完善该药品的质量控制方                             μg/mL、橙皮苷 123 μg/mL、新橙皮苷 137 μg/mL、川陈皮
        法，也可为后续该药品的药理学研究提供理论依据，从                            素 139 μg/mL、白术内酯Ⅲ134 μg/mL、欧前胡素 121
        而有利于指导临床合理用药。                                       μg/mL、和厚朴酚 129 μg/mL、异欧前胡素 144 μg/mL、厚
            UPLC-串联质谱（mass spectrometry/mass spectrome-     朴酚139 μg/mL的单一对照品贮备液。精密吸取上述各
        try，MS/MS）法是一项以 UPLC 作为分离系统、MS 作为                   单一对照品贮备液适量，加甲醇配制为上述成分质量浓
                           [8]
        检测系统的分析技术 。该分析技术将 UPLC 高速、高                         度依次为1.31、1.38、1.23、1.37、1.39、3.35、1.21、1.29、1.44、
        分离度的优势与 MS 高灵敏度的特性相结合，广泛地应                          1.39 μg/mL的混合对照品贮备液，于4 ℃保存，待用。
                                                   [9]
        用于中药或中药复方中指标成分的定性定量分析 。基                            2.1.2  供试品溶液的制备          取藿香正气软胶囊内容物
        于此，本研究采用 UPLC-MS/MS 法同时测定 12 批藿香                    约 0.3 g，置于 10 mL 棕色量瓶中，精密称定，加乙醇适
        正气软胶囊中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈                           量，超声 1 h，放冷至室温，用乙醇定容，摇匀，转移至离
        皮素、白术内酯Ⅲ、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚                          心管内，以 13 780×g 离心 10 min，取上清液，过 0.22 μm
        朴酚10种成分的含量，以期为藿香正气相关制剂的质量                           微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。
        控制及临床应用提供参考依据。                                      2.2  实验条件
        1 材料                                                2.2.1  色谱条件     以Ultimate XB-C18 （100 mm×2.1 mm，

        1.1  主要仪器                                           1.8 μm）为色谱柱、乙腈（A）-0.1％甲酸溶液（B）为流动相
            本研究所用的主要仪器有 LC-30AD 型 UPLC 仪、                   进 行 梯 度 洗 脱（0～10 min，10％ A→30％ A；10～17.5
        LCMS-8050CL 型三重四极杆 MS 仪、AP125WD 型十万                 min，30％A→75％A；17.5～17.51 min，75％A→100％A；
        分之一电子天平[岛津企业管理（中国）有限公司]，                            17.51～23 min，100％A；23～23.01 min，100％A→10％
        H2050R 型高速冷冻离心机（长沙高新技术产业开发区                         A；23.01～25 min，10％A）；流速为 0.4 mL/min；柱温为
        湘仪离心机仪器有限公司），KQ2200DE 型数控超声波                        30 ℃；进样量为5 μL。
        清洗器（昆山市超声仪器有限公司）等。                                  2.2.2 MS条件 采用电喷雾离子源（electron spray ioni-
        1.2  主要试剂与药物                                        zation，ESI），正负离子扫描，多反应监测（multiple reac-
            本研究所用的主要试剂有甘草苷（批号 111610-                       tion monitoring，MRM）模式；离子源喷雾电压为4.0 kV，
        201908）、柚皮苷（批号 110722-201815）、橙皮苷（批号                接口温度为350 ℃；脱溶剂管温度为150 ℃；加热块温度
                                                            为 500 ℃；雾化气流量为 3.0 L/min；干燥气流量为 15.0
        110721-202019）、新橙皮苷（批号 110721-202019）、川陈
        皮素（批号 ST00690120）、白术内酯Ⅲ（批号 111978-                  L/min；加热气流量为 5.0 L/min；碰撞气为氮气。其他
        201501）、欧前胡素（批号110826-201918）、和厚朴酚（批                MS参数见表1；二级MS图见图1。
                                                              表1 甘草苷等10种待测成分对应的其他MS参数
        号 110730-201915）、异欧前胡素（批号 110826-201918）、
        厚 朴 酚（批 号 110729-202015）对 照 品（纯 度 均 大 于             成分    分子式   保留时间/min 扫描方式 母离子m/z  子离子m/z  碰撞能量/eV
                                                            甘草苷   C21H22O9  5.77  负离子  417.2  135.00 、119.05、255.20  27
                                                                                              a
        98％），其中川陈皮素对照品购于上海诗丹德标准技术                           柚皮苷   C27H32O14  7.22  负离子  579.2  271.05 、459.05、151.00  33
                                                                                              a
                                                                                              a
        服务有限公司，其他对照品均购自中国食品药品检定研                            橙皮苷   C28H34O15  7.53  负离子  609.2  301.10 、286.05  35
                                                                                              a
                                                            新橙皮苷          7.95  负离子   609.2  301.10 、343.10、286.05  35
        究 院 。 藿 香 正 气 软 胶 囊（批 号 20032511、20032512、                C28H34O15
                                                                                              a
                                                            川陈皮素  C21H22O8  14.30  正离子  403.2  373.10 、271.10  －35
        20032513、21040311、21040312、21040313、21051411、                                         a
                                                            白术内酯Ⅲ C15H20O3  14.95  正离子  249.2  163.00 、175.00、185.00  －14
                                                                                              a
        21051412、21051413、21051611、21051612、21051613）由      欧前胡素  C16H14O4  15.74  正离子  271.2  147.05 、203.10、175.25  －30
                                                            和厚朴酚          16.12  负离子  265.2  223.15 、249.15、197.20  30
                                                                                              a
        神威药业集团有限公司提供。甲醇、乙腈、甲酸均为色                                  C18H18O2
                                                                                              a
                                                            异欧前胡素 C16H14O4  16.55  正离子  271.2  147.05 、203.10、131.10  －30
        谱纯，购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司；其他试剂                           厚朴酚   C18H18O2  16.89  负离子  265.2  247.20 、245.20  30
                                                                                              a
        均为分析纯；水为纯净水。                                           a：定量离子对
        ·288 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 3                                    中国药房    2022年第33卷第3期
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