Page 77 - 《中国药房》2022年1期

2.6 大黄总蒽醌的含量测定 1
100
2.6.1 色谱条件 色谱柱为 Dikma C18柱（250 mm×4.6 70 2
mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液（85∶15，V/V）， mAU 50 3 4
流速为 1.0 mL/min，检测波长为 254 nm，柱温为 35 ℃， 25 5
0
进样量为10 μL 。 0 5 10 15 20 25
2.6.2 大黄总蒽醌对照品溶液的制备 称取芦荟大黄 t/min
A.大黄总蒽醌对照品溶液
素对照品2.05 mg、大黄酸对照品2.17 mg、大黄素对照品 40
2.10 mg、大黄酚对照品2.15 mg，大黄素甲醚对照品1.10 30 1 4
mg，分别置于25 mL量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度， mAU 20 2 3
摇匀，即得单一对照品溶液。精密量取上述单一对照品 10
5
溶液各2 mL，置于10 mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度，即 0
0 5 10 15 20 25
得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚质 t/min
量浓度分别为 16.40、17.36、16.80、17.20、8.80 μg/mL 的 B.供试品溶液
大黄总蒽醌对照品溶液。 100
2.6.3 供试品溶液的制备 参考文献[10]方法进行制
备。取溃平宁胃漂浮片10片，研细，精密称取30 mg，加 mAU 50
入 8％盐酸溶液 10 mL，超声（功率 150 W，频率 40 kHz）
处理 2 min，再加入三氯甲烷 10 mL，水浴加热回流 60 0
0 5 10 15 20 25
min，放冷，再转移至分液漏斗中；以少量三氯甲烷洗涤 t/min
C.缺大黄阴性样品溶液
容器，并将洗涤液转移至分液漏斗中；取三氯甲烷层溶
1：芦荟大黄素；2：大黄酸；3：大黄素；4：大黄酚；5：大黄素甲醚
液，剩余溶液再以三氯甲烷萃取 3 次，每次 10 mL；合并 图2 大黄总蒽醌的高效液相色谱图
三氯甲烷层溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至
器精密度良好。
10 mL量瓶中定容，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
2.6.8 重复性试验 取同一批溃平宁胃漂浮片适量，按
2.6.4 缺大黄阴性样品溶液的制备 按照处方制法，制
“2.6.3”项下方法平行制备 5 份供试品溶液，再按“2.6.1”
备缺大黄阴性样品，研细，精密称取 0.1 g，按照“2.6.3”
项下色谱条件进样分析，记录峰面积，并根据回归方程
项下方法制备，即得。
计算大黄总蒽醌含量。结果显示，溃平宁胃漂浮片中大
2.6.5 专属性考察 取大黄总蒽醌对照品溶液、供试品
黄总蒽醌的平均含量为 32.73 mg/g，RSD＜3％（n＝5），
溶液、缺大黄阴性样品溶液10 μL，按“2.6.1”项下色谱条
表明该方法重复性良好。
件进样分析，记录色谱图。结果显示，大黄总蒽醌与其
2.6.9 稳定性试验 取同一批溃平宁胃漂浮片适量，按
他成分能够达到基线分离且阴性样品无干扰，表明该方
“2.6.3”项下方法制备供试品溶液，于室温条件放置0、2、
法专属性良好，详见图2。
6、12、24 h 时按“2.6.1”项下色谱条件进样分析，记录峰
2.6.6 线性关系考察 将“2.6.2”项下大黄总蒽醌对照
面积。结果显示，芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、
品溶液分别进样 2、4、6、8、10、16、20 μL，再按“2.6.1”项
大黄素甲醚峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝5），表明供试
下色谱条件进行分析，记录峰面积。以峰面积（y）为纵
品溶液在室温放置24 h内稳定性良好。
坐标、大黄总蒽醌各成分含量（x/μg）为横坐标进行回归
2.6.10 加样回收率试验 精密称取已知含量的溃平宁
分析，结果见表2。
胃漂浮片（大黄总蒽醌含量为32.73 mg/g，其中含芦荟大
表2 大黄总蒽醌的线性关系考察结果
黄素4.916 mg/g、大黄酸6.241 mg/g、大黄素9.210 mg/g、
成分 回归方程 R 2 线性范围/μg
芦荟大黄素 y＝4 682 186.88x－24 521.30 0.999 6 0.033～0.328 大黄酚 10.150 mg/g、大黄素甲醚 2.208 mg/g）0.1 g，共 9
大黄酸 y＝3 816 180.99x－20 872.79 0.999 6 0.035～0.347 份。取 3 份加入 0.85 mL 芦荟大黄素对照品溶液、1.00
大黄素 y＝2 872 429.55x－15 205.41 0.999 8 0.034～0.336
大黄酚 y＝4 349 626.55x－22 150.86 0.999 8 0.034～0.344 mL 大黄酸对照品溶液、0.72 mL 大黄素对照品溶液、
大黄素甲醚 y＝2 580 669.66x－7 129.28 0.999 9 0.018～0.176 0.75 mL大黄酚对照品溶液、1.10 mL大黄素甲醚对照品
2.6.7 精密度试验 取“2.6.2”项下大黄总蒽醌对照品 溶液（各对照品溶液的质量浓度分别为0.457 1、0.503 1、
溶液适量，按“2.6.1”项下色谱条件连续进样5次，记录峰 1.025 0、1.102 0、0.159 5 mg/mL，下同）；另取 3 份加入
面积。结果显示，芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、 1.10 mL芦荟大黄素对照品溶液、1.25 mL大黄酸对照品
大黄素甲醚峰面积的 RSD 均小于 2％（n＝5），表明该仪 溶液、0.90 mL 大黄素对照品溶液、0.90 mL 大黄酚对照

中国药房 2022年第33卷第1期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 ·71 ·