Page 36 - 《中国药房》2022年1期

表4 秦艽花中5种成分的加样回收率试验结果（n＝6） 酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷均为环烯醚萜苷类
称样量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收 平均加样回 RSD/ 成分，均具有抗炎、镇痛、保肝等作用 [10－18] 。这些成分的
成分
g mg mg mg 率/％ 收率/％ ％ 生物活性与秦艽花的抗炎、镇痛药理作用相符，提示这5
马钱苷酸 0.500 0 2.272 5 2.293 0 4.595 3 101.30 101.20 1.25
0.500 1 2.273 0 2.293 0 4.625 4 102.59 种成分均是该药材的有效成分。因此，本课题组最终选
0.500 2 2.273 4 2.293 0 4.620 8 102.37 择异荭草苷作为秦艽花药材的定性分析指标成分，并选
0.500 3 2.273 9 2.293 0 4.602 5 101.56 择马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草
0.500 1 2.273 0 2.293 0 4.556 3 99.58
0.500 0 2.272 5 2.293 0 4.560 7 99.79 苷作为秦艽花药材的定量分析指标成分。
獐牙菜苦苷 0.500 0 0.627 5 0.650 0 1.290 1 101.94 101.87 2.19 3.2 TLC鉴别条件的选择
0.500 1 0.627 6 0.650 0 1.280 4 100.43 本课题组前期分别考察了不同展开剂[甲醇-水-冰
0.500 2 0.627 8 0.650 0 1.285 3 101.15
0.500 3 0.627 9 0.650 0 1.308 0 104.63 乙酸（6 ∶ 1 ∶ 1，V/V/V）、乙醇-水-冰乙酸（4 ∶ 1 ∶ 1，V/V/V）、丙
0.500 1 0.627 6 0.650 0 1.304 9 104.20 酮-水-冰乙酸（3 ∶ 1 ∶ 1，V/V/V）]、不同点样量（0.5、1、1.5、2
0.500 0 0.627 5 0.650 0 1.270 0 98.84 μL）、不同显色方式（3％AlCl3乙醇溶液显色和10％硫酸
龙胆苦苷 0.500 0 13.300 0 13.284 0 26.310 3 97.94 98.11 2.22
0.500 1 13.302 7 13.284 0 26.361 6 98.31 乙醇显色）、不同温度（4、20、35 ℃）及不同相对湿度
0.500 2 13.305 3 13.284 0 26.261 8 97.53 （32％、58％和 72％）对鉴别结果的影响。结果表明，异
0.500 3 13.308 0 13.284 0 25.960 8 95.25
0.500 1 13.302 7 13.284 0 26.848 9 101.97 荭草苷以甲醇-水-冰乙酸（6 ∶ 1 ∶ 1，V/V/V）为展开剂展开、
0.500 0 13.300 0 13.284 0 26.269 7 97.63 3％AlCl3乙醇溶液显色时，其分离度较好，比移值适宜，
獐牙菜苷 0.500 0 3.975 0 3.975 0 7.919 0 99.22 98.29 1.60 斑点清晰；且该方法在不同温度和相对湿度下均能对样
0.500 1 3.975 8 3.975 0 7.887 4 98.41
0.500 2 3.976 6 3.975 0 7.928 2 99.41 品溶液有很好的分离效果，说明该方法的耐用性良好。
0.500 3 3.977 4 3.975 0 7.767 8 95.36 3.3 浸出物测定条件的考察
0.500 1 3.975 8 3.975 0 7.930 9 99.50 在前期研究中，本课题组考察了不同浸出方法（冷
0.500 0 3.975 0 3.975 0 7.865 2 97.87
异荭草苷 0.500 0 1.561 0 1.630 0 3.115 2 95.35 96.76 1.86 浸法和热浸法）、不同浸出溶剂（水，30％、50％、70％、
0.500 1 1.561 3 1.630 0 3.126 6 96.03 100％的乙醇，30％、50％、70％、100％的甲醇）对浸出效
0.500 2 1.561 6 1.630 0 3.126 5 96.01 果的影响，且将相应浸出条件下的溶液处理（0.22 μm微
0.500 3 1.561 9 1.630 0 3.135 1 96.52
0.500 1 1.561 3 1.630 0 3.197 0 100.35 孔滤膜滤过，取续滤液）后按“2.4.3”项下色谱条件进样
0.500 0 1.561 0 1.630 0 3.131 0 96.32 测定，计算出各有效成分的含量，然后以浸膏得率和有
表5 样品含量测定结果（n＝3，mg/g） 效成分的浸出含量为共同指标筛选浸出条件。结果，当
编号 马钱苷酸 獐牙菜苦苷 龙胆苦苷 獐牙菜苷 异荭草苷 浸出方式为热浸法且以50％乙醇作为溶剂时，浸出效果
S1 4.61 1.26 25.96 7.77 3.14 最好。因此，在本研究中选择50％乙醇作为浸出物的提
S2 3.22 1.74 16.57 1.24 2.62
S3 3.46 3.00 53.44 2.37 4.19 取溶剂。
S4 5.79 2.49 24.07 6.74 2.58 3.4 供试品溶液制备条件的选择
S5 5.50 8.66 36.67 6.34 14.96 在前期研究中，本课题组以待测物有效成分的相对
S6 3.88 3.19 17.04 3.76 7.14
S7 4.87 3.68 33.10 3.97 5.46 含量为指标，分别对供试品溶液制备的提取溶剂（70％、
S8 3.13 1.98 25.88 4.14 7.94 50％、30％、100％的乙醇，70％、50％、30％、100％的甲
S9 6.62 8.39 48.49 12.13 8.90
S10 4.87 3.68 33.10 3.97 5.46 醇）、提取方式（回流提取、超声提取）、提取溶剂用量
S11 9.36 9.71 54.84 3.92 6.76 （25、50、100 mL）、提取时间（15、30、60 min）进行了考
S12 8.83 4.84 45.56 7.02 8.59 察，最终选择以甲醇溶液 25 mL、超声提取 30 min 为秦
S13 5.42 22.39 74.60 11.01 7.83
S14 8.34 2.33 13.80 2.55 5.06 艽花供试品溶液的制备方法（此条件下各待测成分的相
S15 7.12 4.18 34.61 12.22 2.79 对含量较高）。
S16 5.79 2.49 24.07 6.74 2.58 3.5 HPLC检测条件的选择
平均值 5.68 5.25 35.11 5.99 6.00
本课题组前期对不同流动相（甲醇-0.1％磷酸水溶
3 讨论
液、甲醇-0.2％磷酸水溶液、乙腈-0.1％磷酸水溶液、甲
3.1 定性和定量分析指标的选择 醇-水）、不同检测波长（230、240、270、330、370 nm）、不
据现有研究报道，秦艽花药材中含环烯醚萜苷和黄 同 色 谱 柱（Chromsil C18、Kromasil 100-5-C18、Zorbax
酮类、三萜类等多种成分，具有抗炎镇痛、抗氧化、润肠 Eclipse XDB-C18 ）、不同柱温（25、30、35 ℃）、不同流速
[3]
通便和抑制乙酰胆碱酯酶活性的作用 。异荭草苷为黄 （0.9、1.0、1.1 mL/min）等色谱条件进行了考察，最终确定
酮苷类成分，具有抗氧化、保肝、抗炎等作用 [9－11] ；马钱苷 了“2.4.3”项下色谱条件。

·30 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 中国药房 2022年第33卷第1期