Page 34 - 《中国药房》2022年1期

2.2 TLC鉴别 表2 秦艽花药材中水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇溶
取本品粉末0.5 g，加甲醇10 mL，超声（功率400 W， 性浸出物测定结果（n＝3，％％）
频率 40 kHz）处理 30 min，滤过，取滤液作为供试品溶 编号 水分 总灰分 酸不溶性灰分 醇溶性浸出物
S1 7.67 5.34 0.43 35.11
液。另取异荭草苷对照品，加甲醇制成每l mL含0.1 mg
S2 8.32 5.71 0.58 26.81
的溶液，作为对照品溶液。按照 2020 年版《中国药典》 S3 7.99 5.76 0.52 42.51
（四部）通则“0502薄层色谱法”进行实验 。吸取供试品 S4 7.10 4.40 0.52 35.67
[7]
S5 7.71 5.34 0.27 35.74
溶液 1.5 µL、对照品溶液 1 µL，分别点样于同一聚酰胺
S6 5.89 6.40 0.36 29.01
薄层板上，以甲醇-水-冰乙酸（6 ∶ 1 ∶ 1，V/V/V）溶液为展开 S7 8.87 4.40 0.52 35.83
剂展开；取出，晾干，喷 3％AlCl3乙醇溶液，60 ℃下加热 S8 8.14 5.27 0.50 35.11
S9 5.40 4.71 0.40 37.38
2 min，然后在紫外灯（波长365 nm）下检视。结果，在供 S10 8.28 5.22 0.39 35.54
试品色谱图中，与对照品色谱相应的位置上显相同颜色 S11 7.71 4.49 0.49 34.46
S12 8.24 5.03 0.40 38.04
的荧光斑点（图2）。
S13 6.82 3.76 0.47 40.82
S14 6.91 5.47 0.43 30.84
S15 7.18 4.86 0.39 35.15
S16 8.17 5.20 0.49 38.04
平均值 7.54 5.08 0.45 35.38
RSD 12.36 12.60 17.41 11.18
取平均值。结果显示，16批秦艽花药材中醇溶性浸出物
含量在26.81％～42.51％之间，平均值为35.38％（RSD＝
11.18％，n＝3）。考虑到药材来源的差异，本研究以略低
[8]
1～16：编号为S1～S16的秦艽花样品；S：异荭草苷对照品 于最低测定值设限 ，初步拟定秦艽花药材中醇溶性浸
图2 秦艽花药材的TLC图 出物不得少于 26.0％。秦艽花药材中醇溶性浸出物测
2.3 检查 定结果见表2。
2.3.1 水分 取各批次秦艽花药材粉末（过二号筛）各 2.4 含量测定
约 2 g，按 2020 版《中国药典》（四部）“通则 0832”水分测 2.4.1 混合对照品溶液的制备 精密称取马钱苷酸、獐
定法项下第二法进行检测 。每个样本平行测定 3 次， 牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷对照品适量，
[7]
取平均值。结果显示，16 批秦艽花药材的水分含量在 加甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为0.367、0.104、
5.40％～8.87％之间，平均值为 7.54％（RSD＝12.36％， 2.122、0.636、0.262 mg/mL的混合对照品贮备液。取上述
n＝3）。考虑到药材来源的差异，本研究以略高于最高 贮备液5 mL，用甲醇稀释4倍，即得混合对照品溶液。将
测定值设限 ，初步拟定秦艽花药材的水分不得过 所得溶液置于4 ℃冰箱中保存，备用。
[8]
9.0％。秦艽花药材中水分测定结果见表2。 2.4.2 供试品溶液的制备 取秦艽花药材粉末（过三号
2.3.2 总灰分和酸不溶性灰分 取各批次秦艽花药材 筛）0.5 g，精密称定，置于 50 mL 锥形瓶中，精密加入甲
粉末（过二号筛）各约 4 g，按 2020 版《中国药典》（四部） 醇 25 mL，称定质量，超声（功率 400 W，频率 40 kHz）处
“通则 2302”灰分测定法项下总灰分和酸不溶性灰分测 理30 min；放冷至室温，再次称定质量，用甲醇补足减失
定法进行检测 。每个样本平行测定 3 次，取平均值。 的质量，摇匀，以 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即
[7]
结果显示，16 批秦艽花药材的总灰分含量在 3.76％～ 得。将所得溶液置于4 ℃冰箱中保存，备用。
6.40％之间，平均值为 5.08％（RSD＝12.60％，n＝3）；酸 2.4.3 色谱条件与系统适用性试验 采用 Kromasil
不溶性灰分含量在0.27％～0.58％之间，平均值为0.45％ 100-5-C18 色 谱 柱（250 mm × 4.6 mm，5 μ m）；以 甲 醇
（RSD＝17.41％，n＝3）。考虑到药材来源的差异，本研 （A）-0.2％磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～
究以略高于最高测定值设限 ，初步拟定秦艽花药材中 30 min，25％A→40％A）；检测波长为 240 nm；流速为 1
[8]
总灰分不得过 6.5％、酸不溶性灰分不得过 0.6％。秦艽 mL/min；柱温为 30 ℃；进样量为 10 μL。分别取供试品
花药材中总灰分和酸不溶性灰分测定结果见表2。 溶液（编号 S1）、混合对照品溶液和空白溶液（甲醇），按
2.3.3 醇溶性浸出物测定 取各批次秦艽花药材粉末 上述色谱条件进样测定，记录色谱图。结果显示，理论
（过二号筛）各约2 g，按2020版《中国药典》（四部）“通则 板数按马钱苷酸计大于 3 000，各待测成分峰与其相邻
2201”浸出物测定法项下醇溶性浸出物测定法（热浸法） 峰间的分离度均大于1.5，均达到基线分离，且空白溶液
[7]
进行检测，溶剂为50％乙醇 。每个样本平行测定3次， （甲醇）对5种成分的测定无干扰，色谱图见图3。

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