Page 35 - 《中国药房》2022年1期
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350            3                            量限均满足检测要求，详见表3。
               300
                                                           2.4.6  精密度试验       取“2.4.1”项下混合对照品溶液，按
               250
                                                          “2.4.3”项下色谱条件于同一天内连续进样测定 6 次，记
               200
              mAU
               150
                                4                          录峰面积。结果显示，马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦
               100
                          1              5                 苷、獐牙菜苷和异荭草苷峰面积的 RSD 分别为 0.65％、
                50          2
                0                                          0.89％、0.80％、0.71％、0.51％（n＝6），表明仪器精密度
                 0    5    10   15   20   25   30          良好。
                               t/min
                           A.混合对照品溶液                       2.4.7  重复性试验       取同一批次秦艽花药材粉末（过三
                              3
               250                                         号筛，编号S1）共6份，每份0.5 g，精密称定，按“2.4.2”项
               200                                         下方法制备供试品溶液，再按“2.4.3”项下色谱条件进样
               150              4                          测定，记录5种成分的峰面积，代入标准曲线计算样品中
              mAU
               100                                         各成分的含量。结果显示，马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆
                50        1               5                苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷含量的 RSD 分别为 0.89％、
                            2
                                                           0.97％、0.71％、0.83％、0.98％（n＝6），表明方法重复性
                0
                 0    5    10   15   20   25   30          良好。
                               t/min
                            B.供试品溶液                        2.4.8  稳定性试验       取秦艽花药材粉末（过三号筛，编
               250                                         号S1）适量，按“2.4.2”项下方法制备供试品溶液，分别于
               200                                         室温下放置0、2、4、6、8、10、12、24 h时，按“2.4.3”项下色

               150                                         谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，马钱苷酸、獐
              mAU
               100                                         牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷峰面积的
                50                                         RSD 分别为 0.76％、0.79％、0.55％、0.69％、1.06％（n＝
                0                                          8），表明供试品溶液在室温下放置24 h内稳定性良好。
                 0    5    10   15   20   25   30
                               t/min                       2.4.9  加样回收率试验         取已知含量的同一批秦艽花
                             C.空白溶液
                                                           药材粉末（过三号筛，编号S1）共6份，每份0.5 g，精密称
           1：马钱苷酸；2：獐牙菜苦苷；3：龙胆苦苷；4：獐牙菜苷；5：异荭
                                                           定，分别精密加入与样品中各成分含量等量的混合对照
        草苷
                 图3   系统适用性试验的HPLC图                        品溶液，按“2.4.2”项下方法制备供试品溶液，再按
                                                          “2.4.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，计算加样
        2.4.4  线性关系考察        将“2.4.1”项下混合对照品贮备
                                                           回收率。结果显示，马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、
        液用甲醇分别稀释2、4、8、16、32、64倍，取混合对照品贮
                                                           獐 牙 菜 苷 和 异 荭 草 苷 的 平 均 加 样 回 收 率 分 别 为
        备液及各稀释液分别按“2.4.3”项下色谱条件进样测定，
                                                           101.20％、101.87％、98.11％、98.29％、96.76％，RSD 分
        记录峰面积。以各待测成分的质量浓度（x）为横坐标、
                                                           别为 1.25％、2.19％、2.22％、1.60％、1.86％（n＝6），表明
        峰面积（y）为纵坐标绘制标准曲线，计算得5种成分的线
                                                           本方法的准确度良好，详见表4。
        性回归方程、线性范围、相关系数（r）。结果显示，各待测
                                                           2.4.10  样品含量测定        精密称取 16 批秦艽花药材粉
        成分在其质量浓度范围内线性关系均良好（r≥0.999 5），
                                                           末，每份约0.5 g，按“2.4.2”项下方法制备供试品溶液，按
        详见表3。
                                                          “2.4.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并根据标
             表3 线性关系及检测限、定量限考察结果
                                                           准曲线计算各成分的含量。每批样品平行测定3次，取
        成分      回归方程    线性范围/（μg/mL）  r  检测限/（μg/mL）定量限/（μg/mL）
        马钱苷酸  y＝13.573x－2.502  5.73～367.00  0.999 8  0.29  1.69  平均值。结果显示，16 批秦艽花样品中马钱苷酸、獐牙
        獐牙菜苦苷 y＝14.881x－2.246  1.63～104.00  0.999 8  0.36  1.35  菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷的含量分别为
        龙胆苦苷  y＝10.199x+16.732  33.16～2 122.00  0.999 5  0.98  1.66  3.13～9.36、1.26～22.39、13.80～74.60、1.24～12.22、2.58～
        獐牙菜苷  y＝12.417x－6.497  9.94～636.00  0.999 7  0.50  1.42
        异荭草苷  y＝17.437x－4.375  4.09～262.00  0.999 7  0.71  1.36  14.96 mg/g。考虑到质量标准制定的适用性和药材来源
        2.4.5  检测限与定量限考察           取“2.4.1”项下混合对照          的差异性，本研究选择含量最高的龙胆苦苷作为该药材
                                                                                                     [8]
        品贮备液适量，用甲醇逐步稀释，然后按“2.4.3”项下色                       含量限定的指标成分，以略低于含量最低值设限 ，初步
        谱条件进样测定，记录峰面积，分别以信噪比3 ∶ 1、10 ∶ 1                   拟定本品中龙胆苦苷的含量不得低于13.8 mg/g，结果见
        测定检测限、定量限。结果显示，5种成分的检测限和定                          表5。


        中国药房    2022年第33卷第1期                                                China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1  ·29 ·
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