Page 28 - 《中国药房》2022年1期
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移至聚偏二氟乙烯膜上(电流200 mA,转膜时间2 h),用 3.3 田蓟苷对 AS 模型小鼠血浆中 IL-1β、IL-6、MCP-1
5%脱脂奶粉或5%牛血清白蛋白封闭1 h;加入TGF-β 1一 和TNF-α水平的影响
抗(稀释比例1∶1 000)、Smad2/3一抗(稀释比例1∶1 000), 与正常组比较,模型组小鼠血浆中 IL-1β、IL-6、
p-Smad2/3一抗(稀释比例1∶1 000)、GAPDH一抗(稀释 MCP-1 和 TNF-α水平均显著升高(P<0.01)。与模型组
比例 1 ∶ 5 000),4 ℃孵育过夜;TBST 洗膜 10 min×3 次, 比较,除田蓟苷低剂量组小鼠血浆中TNF-α水平降低不
加入相应二抗(稀释比例1 ∶ 20 000),室温孵育1 h;加入 显著外(P>0.05),其余各组小鼠血浆中上述指标水平
ECL显色,凝胶成像系统成像、显影。用Image J 1.8.0软 均显著降低(P<0.05 或 P<0.01)。各组小鼠血浆中
件分析,以目的蛋白与内参(GAPDH)蛋白条带灰度值 IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α水平测定结果见表4。
的比值表示目的蛋白的表达水平。 表4 各组小鼠血浆中IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α水平
2.9 统计学方法 测定结果(x±±s,n=8,pg/mL)
采用SPSS 22.0软件进行统计分析。结果以x±s表 组别 IL-1β IL-6 MCP-1 TNF-α
示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采 正常组 5.74±0.99 59.11±11.73 1 127.37±49.86 396.10±49.51
模型组 79.00±9.96 a 375.2±65.41 a 3 423.32±260.02 a 1 040.85±125.06 a
用LSD检验。检验水准α=0.05。 田蓟苷低剂量组 50.13±7.45 b 278.32±24.12 c 2 868.90±326.72 c 914.52±109.51
3 结果 田蓟苷中剂量组 42.11±4.82 c 244.55±36.07 c 2 277.83±395.71 c 689.98±95.85 c
田蓟苷高剂量组 30.83±3.61 c 209.64±40.98 c 2 084.84±243.86 c 617.62±114.38 c
3.1 田蓟苷对AS模型小鼠血浆中血脂水平的影响 辛伐他汀组 21.30±3.67 c 220.18±37.87 c 1 862.56±290.32 c 580.19±126.98 c
与正常组比较,模型组小鼠血浆中 TG、TC、LDL-C a:与正常组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.05;c:与模型组
水平均显著升高(P<0.01),HDL-C 水平显著降低(P< 比较,P<0.01
0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠血浆中TG水平均 3.4 田蓟苷对AS模型小鼠主动脉病理形态学的影响
显著降低(P<0.05或P<0.01);田蓟苷高剂量组和辛伐 正常组小鼠主动脉层次清晰,内膜完整,无泡沫细
他汀组小鼠血浆中 TC 水平均显著降低(P<0.05 或 P< 胞与胆固醇结晶形成;管腔未发生明显狭窄,且无脂质
0.01);田蓟苷中、高剂量组和辛伐他汀组小鼠血浆中 斑块生成。模型组小鼠主动脉层次紊乱,有脂质斑块生
LDL-C 水平均显著降低(P<0.05 或 P<0.01)。各组小 成,且斑块面积较大并呈现向管腔发展的占位性病变;
鼠血浆中血脂指标水平测定结果见表2。 管腔严重狭窄,斑块脂质核心大,存在大量泡沫细胞和
表 2 各组小鼠血浆中血脂水平测定结果(x±±s,n=8, 胆固醇结晶。田蓟苷各剂量组和辛伐他汀组小鼠主动
mmol/L) 脉层次有所改善,斑块面积减小;管腔狭窄程度明显减
组别 TG TC LDL-C HDL-C 轻,斑块脂质核心小,斑块内泡沫细胞和胆固醇结晶减
正常组 0.56±0.07 2.71±0.25 0.20±0.05 1.44±0.15 少。各组小鼠主动脉病理形态学观察结果见图1。
模型组 1.43±0.24 a 31.92±1.01 a 14.35±0.91 a 0.17±0.02 a
田蓟苷低剂量组 1.21±0.10 b 31.17±0.66 13.87±0.93 0.19±0.02 3.5 田 蓟 苷 对 AS 模 型 小 鼠 主 动 脉 中 ICAM-1、
田蓟苷中剂量组 0.98±0.11 c 31.07±0.58 12.65±1.06 b 0.21±0.05 VCAM-1和 PCNA蛋白表达的影响
田蓟苷高剂量组 0.84±0.07 c 30.77±1.08 b 10.09±1.07 c 0.24±0.10
辛伐他汀组 0.78±0.11 c 30.37±0.76 c 8.62±1.69 c 0.23±0.06 与正常组比较,模型组小鼠主动脉中 ICAM-1、
a:与正常组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.05;c:与模型组 VCAM-1 和 PCNA 蛋白表达的阳性率均显著升高(P<
比较,P<0.01 0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠主动脉中上述蛋白
3.2 田蓟苷对AS模型小鼠血浆中Ox-LDL水平的影响 表达的阳性率均显著降低(P<0.05 或 P<0.01)。各组
与正常组比较,模型组小鼠血浆中 Ox-LDL 水平显 小鼠主动脉中 ICAM-1、VCAM-1 和 PCNA 蛋白表达的
著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠血浆 免疫组化图见图2,蛋白表达的阳性率测定结果见表5。
中Ox-LDL水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。各组 3.6 田蓟苷对AS模型小鼠主动脉中MMP-2、MMP-9、
小鼠血浆中Ox-LDL水平测定结果见表3。 TGF-β1、Smad2和Smad3 mRNA表达的影响
表 3 各组小鼠血浆中 Ox-LDL 水平测定结果(x±±s, 与 正 常 组 比 较 ,模 型 组 小 鼠 主 动 脉 中 MMP-2、
n=8,ng/mL) MMP-9、TGF-β 1、Smad2、Smad3 mRNA 的表达水平均显
组别 Ox-LDL 组别 Ox-LDL 著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠主动
正常组 5 734.09±1 350.12 田蓟苷中剂量组 10 615.51±1 925.50 c 脉中上述因子 mRNA 的表达水平均显著降低(P<0.05
模型组 14 640.69±2 803.79 a 田蓟苷高剂量组 8 660.31±1 904.50 c
田蓟苷低剂量组 11 609.18±1 485.47 b 辛伐他汀组 8 397.32±1 161.14 c 或 P<0.01)。 各 组 小 鼠 主 动 脉 中 MMP-2、MMP-9、
a:与正常组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.05;c:与模型组 TGF-β 1、Smad2和Smad3 mRNA的表达水平测定结果见
比较,P<0.01 表6。
·22 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 中国药房 2022年第33卷第1期