Page 20 - 《中国药房》2021年23期

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4
（×10） （×10）
100 100 CHOP 27 kDa
caspase-12 55 kDa
SSC-A 50 SSC-A 50
cleaved-caspase-3 17 kDa

0 0 caspase-3 35 kDa
10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7
M1-GFP（FITC） M1-GFP（FITC）
A.对照组 B. M1病毒低剂量组
β-tubulin 55 kDa
（×10） （×10）
4
4
100 100
对照组 M1病毒低 M1病毒中 M1病毒高
剂量组 剂量组 剂量组
图3 各组细胞中内质网应激相关蛋白以及凋亡相关蛋
SSC-A 50 SSC-A 50 白表达的电泳图
Fig 3 Electrophoretogram of the expression of endo-
plasmic reticulum stress-related proteins and
0 0 apoptosis-related proteins in cells of each group
10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7
M1-GFP（FITC） M1-GFP（FITC） 本课题组前期研究证实，M1病毒可杀伤胶质瘤、黑
C. M1病毒中剂量组 D. M1病毒高剂量组
图2 各组细胞感染的流式散点图 色素瘤等多种肿瘤细胞 [13，15] 。将M1病毒注射在大鼠、小
Fig 2 Flow cytometry scatter plot of the infection of 鼠、石蟹猴等多种模型动物体内后，该病毒可在正常组
cells in each group 织中迅速消退，而在肿瘤组织中富集扩增；且受试动物
精神状态良好，无明显的体质量减轻或者食欲减退的现
3.3 M1 病毒对内质网应激通路相关蛋白及凋亡相关
象 [10，13，16] 。此外，本课题组也开发了M1病毒的脂质体制
蛋白表达的影响
剂，结果发现，该制剂可减少中和抗体的生成，从而发挥
与对照组比较，M1病毒中、高剂量组细胞中CHOP、
[17]
更好的治疗效果 。由此可知，M1 病毒具备良好的临
caspase-12、cleaved-caspase-3（中剂量组除外）蛋白的表
床应用潜力。基于此，本研究拟进一步探讨 M1 病毒诱
达水平均显著升高（P＜0.01）。结果见表3、图3。
导宫颈癌细胞凋亡的作用及机制。
表3 各组细胞中CHOP、caspase-12、cleaved-caspase-3、
本研究通过 MTT 实验发现，M1 病毒可显著降低
caspase-3蛋白表达水平的检测结果（x±±s，n＝3）
C-33A细胞的存活率且呈剂量依赖趋势；进一步研究发
Tab 3 Protein expression of CHOP， caspase-12，
现，经 M1 病毒作用后，细胞凋亡率及感染率均显著升
cleaved-caspase-3 and caspase-3 in cells of
高。这提示M1病毒感染可能具有促宫颈癌细胞凋亡的
each group（x±±s，n＝3）
作用。
组别 CHOP/β-tubulin caspase-12/β-tubulin cleaved-caspase-3/β-tubulin caspase-3/β-tubulin
对照组 0.22±0.06 0.15±0.03 0.27±0.02 0.64±0.15 大量外源性病毒累积于内质网，从而诱发内质网应
M1病毒低剂量组 0.41±0.12 0.40±0.28 0.27±0.04 0.70±0.15 激反应，进一步激活下游的凋亡通路 。内质网应激介
[12]
M1病毒中剂量组 0.71±0.17 ＊ 0.53±0.20 ＊ 0.35±0.05 0.61±0.12
M1病毒高剂量组 0.90±0.07 ＊ 0.68±0.08 ＊ 0.69±0.02 ＊ 0.59±0.19 导的细胞凋亡途径主要有3条：第一条是通过内质网应
＊
注：与对照组比较，P＜0.01 激的转录因子 CHOP 介导的；第二条是通过 c-Jun 氨基
Note：vs. control group，P＜0.01 末端激酶（JNK）通路介导的；第三条是通过凋亡相关的
＊
4 讨论 关键分子caspase-12介导的 。本研究结果显示，经M1
[18]
目前宫颈癌的治疗方法主要包括放疗、化疗、靶向 病毒作用后，C-33A 细胞中 CHOP、caspase-12、cleaved-
治疗、生物治疗等。其中，放化疗是治疗晚期宫颈癌的 caspase-3（中剂量组除外）蛋白的表达水平均显著升
重要方式，但毒副作用大；靶向治疗是药物进入体内后 高。这提示 M1 病毒可通过激活内质网应激通路，促进
与特定的致癌位点相结合后发挥抗肿瘤作用；生物治疗 C-33A细胞凋亡。
是通过机体的防御机制，应用生物大分子或小分子化合 综上所述，M1病毒可诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡，
[14]
物调节机体生物反应，发挥抗肿瘤作用 。其中，靶向 其作用机制可能与激活内质网应激通路有关。本课题
治疗和生物治疗的安全性高，目前已成为治疗肿瘤的有 组将进一步在体内模型上验证上述结论，以期为临床应
效手段。 用M1病毒治疗晚期宫颈癌提供理论依据。

·2830 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 23 中国药房 2021年第32卷第23期