Page 76 - 《中国药房》2021年22期
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2.1.9  相似度评价       采用《中药色谱指纹图谱相似度评                  贮备液 50、100、200、250、500 µL，蒂巴因对照品贮备液
        价系统（2012版）》进行分析，计算15 批罂粟壳药材样品                       5、10、25、50、100 µL，罂粟碱对照品贮备液 10、20、50、
        指纹图谱与对照指纹图谱的相似度。结果显示，相似度                            100、200 µL，那可丁对照品贮备液 10、20、50、100、250
        分 别 为 0.997、0.996、0.995、0.993、0.998、0.997、0.999、    µL，置于5 mL量瓶中，用20％甲醇（含5％乙酸）稀释至
        0.998、0.993、0.996、0.995、0.997、0.996、0.996、0.995，提   刻度，制成系列质量浓度的线性工作溶液，按“2.2.1”项
        示 15 批罂粟壳药材样品指纹图谱与对照指纹图谱的相                          下色谱条件进样测定，记录峰面积。以各待测成分的质
        似度较高，表明不同地区产罂粟壳药材的色谱特征相                             量浓度（X，µg/mL）为横坐标、其峰面积的积分值（Y）为
        似，其化学成分组成大致相同、质量稳定、差异较小。                            纵坐标进行线性回归。结果见表2。
        2.2 聚类分析                                                表2 吗啡等5个成分的回归方程与线性范围
            以 15 批罂粟壳药材中 13 个共有峰的峰面积为变                      Tab 2 Regression equation and linear range of 5 com-
        量，采用SPSS 19.0软件，使用组间联结法以欧氏平方距                              ponents such as morphine
        离为测度进行聚类分析。结果显示，15批罂粟壳药材样                            待测成分        回归方程             r       线性范围，μg/mL
        品可聚为两类，S1～S7 为聚为一类，来源于 FA、FB、FC                      吗啡        Y＝38 540X+73 984  0.999 5  10.21～102.10
                                                             可待因       Y＝30 290X+126 486  0.998 8  10.43～104.30
        农场；S8～S15 聚为一类，来源于 FD、FE 农场。15 批罂
                                                             蒂巴因       Y＝29 203X－25 276  0.999 9   1.54～30.70
        粟壳药材样品的聚类分析树状图见图4。                                   罂粟碱       Y＝44 650X+37 750  0.999 9   2.36～47.28
                                 欧氏平方距离                      那可丁       Y＝74 580X+95 498  0.999 0   2.32～57.90
                       5     10    15     20    25
               S8                                           2.2.5  精密度试验      取“2.2.2”项下混合对照品溶液，按
              S10                                          “2.2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
              S13
               S9                                           结果显示，吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁峰面积
              S11                                           的 RSD 分别为 0.09％、0.10％、1.80％、0.14％、0.11％
              S14
              S12                                          （n＝6），表明仪器精密度良好。
              S15                                           2.2.6  稳定性试验       取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
               S2
               S6                                           S1），分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.2.1”项
               S4                                           下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，吗啡、可
               S1
               S3                                           待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁峰面积的 RSD 分别为
               S7
               S5                                           0.10％、0.15％、1.58％、0.98％、0.87％（n＝6），表明供试
            图4    15批罂粟壳药材样品的聚类分析树状图                        品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。
        Fig 4  Dendrogram of cluster analysis of 15 batches of  2.2.7  重复性试验  精密称取罂粟壳药材样品粉末（编
               Papaveris Pericarpium                        号 S1）0.5 g，共 6 份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶
        2.2  吗啡等5个成分的含量测定                                   液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并
        2.2.1 色谱条件      同“2.1.1”项。                          按外标法计算样品中各成分的含量。结果显示，吗啡、
        2.2.2  溶液的制备       混合对照品溶液的制备同“2.1.2”               可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁的平均含量分别为
        项，供试品溶液的制备同“2.1.3”项。以20％甲醇（含5％                      3.582 5、0.874 8、0.099 5、0. 553 8、0. 559 5 mg/g，RSD 分
        乙酸）为空白溶液。                                           别为 0.68％、0.92％、1.25％、0.98％、1.02％（n＝6），表明
        2.2.3  系统适用性试验         取上述混合对照品溶液、供试                方法重复性良好。
        品溶液（编号 S1）、空白溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进                     2.2.8  加样回收率试验         精密称取罂粟壳药材样品粉
        样测定，记录色谱图。结果显示，在供试品溶液中，吗                            末（编号 S1），共 6 份，每份约 0.4 g，精密称定，置于具塞
        啡、可待因、罂粟碱、那可丁、蒂巴因的色谱峰保留时间                           锥形瓶中，分别精密加入“2.1.2”项下吗啡、可待因、蒂巴
        与混合对照品溶液一致，将保留时间一致的色谱峰进行                            因、罂粟碱、那可丁对照品贮备液适量，按“2.2.2”项下方
        紫外光谱比对，峰纯度均大于 0.99；各色谱峰与相邻色                         法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样测
        谱峰的分离度均大于 1.5，理论板数以吗啡计均不低于                          定，记录峰面积并计算加样回收率。结果显示，吗啡、可
        10 000，空白溶液对测定无干扰。系统适用性试验的                          待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁的平均加样回收率为
        HPLC图见图3。                                           91.10％～99.46％，RSD 为 1.08％～1.74％（n＝6），表明
        2.2.4  线性关系考察        分别精密吸取“2.1.2”项下吗啡              该方法准确度良好。结果见表3。
        对照品贮备液 50、100、200、250、500 µL，可待因对照品                 2.2.9  样品含量测定       精密称取 15 批罂粟壳药材样品


        ·2758 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22                                 中国药房    2021年第32卷第22期
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