Page 64 - 《中国药房》2021年22期
P. 64
0.89％、0.86％、0.45％、0.75％、0.76％、0.61％、0.65％ 表2 葛根素等7种成分的加样回收率试验结果（n＝6）
（n＝6），表明仪器精密度良好。 Tab 2 Results of recovery tests of 7 components such
2.7 稳定性试验 as puerarin（n＝6）
取“2.2.2”项下供试品溶液（编号S8），分别于室温下 称样量， 已知量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率，RSD，
放置 0、2、4、8、12、24 h 时按“2.1”项下色谱条件进样测 待测成分 g μg μg μg ％ ％ ％
定，记录峰面积。结果显示，葛根素、3′-甲氧基葛根素、 葛根素 0.101 3 852.99 850.00 1 696.73 99.26 99.58 0.83
0.098 5 829.41 850.00 1 679.14 99.97
大豆苷、芦丁、橙皮苷、丹酚酸A和槲皮素峰面积的RSD
0.102 1 859.72 850.00 1 694.60 98.22
分别为 0.58％、0.70％、0.94％、0.17％、0.25％、0.61％、 0.105 3 886.67 850.00 1 740.33 100.43
0.66％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳 0.106 6 897.61 850.00 1 749.98 100.28
定性良好。 0.105 7 890.04 850.00 1 734.17 99.31
3′-甲氧基葛根素 0.101 3 251.07 257.00 509.78 100.67 100.31 1.17
2.8 重复性试验 0.098 5 244.13 257.00 501.75 100.24
取正心降脂片样品（编号S8）粉末，每份0.2 g，精密 0.102 1 253.05 257.00 514.20 101.61
称定，共 6 份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按 0.105 3 260.99 257.00 518.84 100.33
0.106 6 264.21 257.00 523.48 100.88
“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法计
0.105 7 261.98 257.00 514.20 98.14
算样品含量。结果显示，葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆 大豆苷 0.101 3 183.05 200.00 380.37 98.66 100.61 1.08
苷、芦丁、橙皮苷、丹酚酸A和槲皮素含量的RSD分别为 0.098 5 177.99 200.00 380.04 101.03
0.102 1 184.49 200.00 385.93 100.72
0.48％、0.38％、0.88％、0.90％、1.02％、0.90％、0.92％
0.105 3 190.28 200.00 391.16 100.44
（n＝6），表明方法重复性良好。 0.106 6 192.63 200.00 394.27 100.82
2.9 加样回收率试验 0.105 7 191.00 200.00 394.94 101.97
精密称取已知各成分含量的正心降脂片样品（编号 芦丁 0.101 3 7 024.23 7 050.00 14 048.85 99.64 100.05 0.82
0.098 5 6 830.08 7 050.00 13 871.24 99.88
S8）粉末，每份 0.1 g，共 6 份，分别加入 1.70 mg/mL 的葛 0.102 1 7 079.71 7 050.00 14 065.48 99.09
根素对照品溶液0.5 mL、1.285 mg/mL的 3′-甲氧基葛根 0.105 3 7 301.60 7 050.00 14 340.02 99.84
素对照品溶液0.2 mL、1.00 mg/mL的大豆苷对照品溶液 0.106 6 7 391.74 7 050.00 14 464.70 100.33
0.105 7 7 329.33 7 050.00 14 486.07 101.51
0.2 mL、1.41 mg/mL 的芦丁对照品溶液 5.0 mL、0.525
橙皮苷 0.101 3 380.82 393.75 777.55 100.76 100.31 1.38
mg/mL的橙皮苷对照品溶液0.75 mL、1.425 mg/mL的丹 0.098 5 370.29 393.75 768.10 101.03
酚酸A对照品溶液0.1 mL、1.26 mg/mL的槲皮素对照品 0.102 1 383.82 393.75 782.18 101.17
0.105 3 395.85 393.75 782.80 98.27
溶液0.5 mL（取各单一对照品，分别用甲醇溶解并稀释，
0.106 6 400.74 393.75 790.19 98.91
即得各单一对照品溶液），按“2.2.2”项下方法制备供试 0.105 7 397.36 393.75 797.94 101.73
品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积 丹酚酸A 0.101 3 119.89 142.50 261.79 99.58 100.31 0.85
并计算加样回收率。结果见表2。 0.098 5 116.57 142.50 261.05 101.39
0.102 1 120.84 142.50 262.46 99.38
2.10 样品含量测定 0.105 3 124.62 142.50 267.30 100.13
取10批正心降脂片样品粉末约0.2 g，精密称定，按 0.106 6 126.16 142.50 268.77 100.08
“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条 0.105 7 125.10 142.50 269.45 101.30
槲皮素 0.101 3 560.58 630.00 1 188.30 99.64 99.85 1.01
件进样测定，记录峰面积并按外标法计算样品含量。每
0.098 5 545.09 630.00 1 170.46 99.27
样品平行测定3次，结果见表3。 0.102 1 565.01 630.00 1 195.83 100.13
2.11 聚类热图分析 0.105 3 582.72 630.00 1 202.50 98.38
0.106 6 589.91 630.00 1 221.92 100.32
将 10 批正心降脂片中 7 种成分的含量测定结果数
0.105 7 584.93 630.00 1 223.50 101.36
据经归一化处理后，导入 Hiplot 科研绘图平台（https：//
hiplot.com.cn/），选择“ward”法，设置距离度量为“euclidean”， 3 讨论
绘制聚类热图（图中，颜色由蓝到红代表含量由低到 本课题组前期分别对Inertsil ODS-3（250 mm×4.6 mm，
高）。结果显示，10 批样品可聚为四类，其中 S1～S3 聚 5 μm）、Agilent TC-5 C18 （250 mm×4. 6 mm，5 μm）、Kro-
为一类，这3批样品中槲皮素含量相对较低，芦丁和橙皮 masil C18 （150 mm×4.6 mm，3.5 μm）等3种不同色谱柱进
苷含量相对较高；S5～S6 聚为一类，这 2 批样品中的大 行了考察。结果显示，采用 Kromasil C18 （150 mm×4.6
部分成分含量均相对较低；S7～S10聚为一类，这4批样 mm，3.5 μm）时，各成分的分离效果相对最好且分离时
品中葛根素、大豆苷、芦丁、丹酚酸A和槲皮素的含量均 间最短，故选择Kromasil C18为色谱柱。
相对较高；S4 聚为一类，该批样品中葛根素、3′-甲氧基 本课题组前期分别对不同检测波长（230、254、280、
葛根素、大豆苷和丹酚酸 A 含量均最高，而芦丁含量最 325 nm）下葛根素等 7 种成分的色谱响应进行了考察。
低。结果见图2。 结果显示，虽然葛根素等7种成分在254、280 nm波长下
·2746 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22 中国药房 2021年第32卷第22期
