Page 52 - 《中国药房》2021年22期

续表2
Continued tab 2 10
保留时 含量 5
序号 化学成分 分子量 分子式 log2FC P
间，min 变化 白芥子
49 香豆素（coumarin） ＊ 24.124 146.036 7 C9H6O2 0.16 0.971 / 1.131 98*t[1] 0 炒白芥子
50 对羟基苯甲醛（4-hydroxybenzaldehyde） 29.477 122.036 9 C7H6O2 －3.74 0.001 降低 －5
51 芥子酸（sinapic acid） ＊ 36.942 224.068 4 C11H12O5 －1.93 0.010 降低
52 β-细辛脑（β-asarone） 48.208 208.110 1 C12H16O3 0.06 0.818 / －10
53 茉莉酸（jasmonic acid） 48.767 210.125 8 C12H18O3 0.05 0.187 / －15
54 十二烷基伯胺（dodecylamine） 49.725 185.214 3 C12H27N －0.51 0.015 / －20 －15 －10 －5 0 5 10 15
1.001 19*t[1]
化学成分进行分析，通过TIC图（图1、图2）可知，炒制后 图 4 白芥子和炒白芥子化学成分含量的 OPLS-DA 得
白芥子中的一些化学成分发生了变化，如4-乙酰氨基丁 分图
酸（成分5）、腺苷酸（成分23）等成分的含量显著升高，对 Fig 4 OPLS-DA scoring plot of the contents of chemical
羟基苯甲醛（成分50）、D-葡萄糖-6-磷酸（成分10）、烟酰 constituents in S. alba before and after stir-
胺核苷酸（成分24）等成分的含量显著降低，这些化学成 frying
分含量的变化可能是白芥子炒制后功效发生改变的重
要原因之一。 1
3.2 白芥子炒制前后化学成分含量的PCA结果 0.8
采用 SIMCA 14.1 软件对白芥子炒制前后的化学成 0.6 R 2
Q 2
0.4
分含量进行PCA（其得分图如图3所示），可得白芥子和
0.2
炒白芥子样品均处于置信区间内，且两种样品被完全分
0
开，说明白芥子和炒白芥子的化学成分含量有较明显的
－0.2
差异。 －0.4
－0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
图 5 白芥子和炒白芥子化学成分含量的 OPLS-DA 置
10
换检验结果（n＝200）
5
白芥子 Fig 5 OPLS-DA dispacement test results of the con-
炒白芥子
0
t[2] tents of chemical constituents in S. alba before
－5
and after stir-frying（n＝200）
－10
当 VIP＞1 时，表明该变量对所建模型的贡献率高于平
－15
[13]
－20 －15 －10 －5 0 5 10 15 均水平 。笔者根据VIP＞1和P＜0.05筛选出白芥子炒
t[1]
制前后含量差异有统计学意义的化学成分，以log2FC为
图3 白芥子和炒白芥子样品的PCA得分图 横坐标、以显著性检验P值的负对数（－log10P）为纵坐标
Fig 3 PCA scoring plot of S. alba before and after
绘制火山图（图6），图中偏离中心越远的点，表示差异倍
stir- frying
数越大。结果显示，所鉴定出的54种化学成分中，共有
3.3 白芥子炒制前后化学成分含量的OPLS-DA结果 19种的含量发生了明显变化：10种化学成分的含量在炒
OPLS-DA 被广泛应用于代谢组学数据的分析，由 制后显著降低，9种化学成分的含量在炒制后显著升高，
于其分析方法能够将组间差异最大化，故常被用于差异 与炒制前比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），如表 2
[12]
代谢物的筛选 。笔者采用SIMCA 14.1软件，对白芥子 所示。采用SIMCA 14.1软件对白芥子与炒白芥子的化
炒制前后的化学成分含量进行 OPLS-DA（其得分图如 学成分含量变化进行聚类分析，发现两种样品可被明显
图4所示），并对其进行200次置换检验（检验结果如图 5 区分为两大类，如图7所示。
所示）。结果可得，所建立的 OPLS-DA 模型的 R（X）＝ 4 讨论
2
2
2
0.686，R（Y）＝0.990，Q =0.967（＞0.5），表明该模型可用 据文献报道，白芥子中主要含有多糖类、挥发油类、
[13]
于白芥子炒制前后化学成分含量的模式识别 。 脂肪酸类、生物碱类、黄酮类等化学成分，共有60余种单
[5]
本研究采用 OPLS-DA 模型中的变量重要性投影 体化合物得到分离和结构确证 。本研究利用 UPLC-
（VIP）值进行样品之间差异代谢物的筛选。根据每一变 Q-Exactive Obitrap MS联用技术对白芥子炒制前后的化
量的系数置信区间和变量权重的VIP值，可衡量各共有 学成分进行分析，并采用Compound Discover 3.2软件进
峰的表达模式对样本分类判别的影响强度和解释能力： 行鉴定，以mzCloud数据库、中药成分高分辨MS OTCML

·2734 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22 中国药房 2021年第32卷第22期