Page 47 - 《中国药房》2021年21期

表1 五味子干燥品的制备方法 得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于
Tab 1 Preparation methods of dried S. chinensis pro- 3％（n＝6），表明本方法的重复性较好。
ducts 2.4.3 稳定性试验 取同一供试品溶液（样品编号为

样品编号 加工方法 干燥时间，d 水分含量，％ S1），分别于室温下放置 0、4、8、12、18、24 h 时按“2.3”项
S1～S3 50 ℃烘干：取净五味子鲜果适量，置于50 ℃鼓风干燥箱中烘干 2.7 10.24 下条件进样测定，记录峰面积。以1号峰（五味子醇甲）
S4～S6 晒干：取净五味子鲜果适量，常温下晒干 7. 9.96
S7～S9 微波“杀青”后50 ℃烘干：取净五味子鲜果适量，置于微波炉 3. 9.23 为参照峰，计算得各共有峰相对保留时间和相对峰面积
（350 W）中“杀青”3 min，取出后置于鼓风干燥箱中50 ℃烘干
的 RSD 均小于 3％（n＝6），表明该供试品溶液在室温下
S10～S12 烫漂“杀青”后50 ℃烘干：取净五味子鲜果适量，置于沸水中烫 3. 10.25
漂2 min，捞出后置于50 ℃鼓风干燥箱中烘干 放置24 h内稳定性良好。
S13～S15 蒸制“杀青”后50 ℃烘干：取净五味子鲜果适量，隔水蒸30 min 4. 10.32 2.4.4 指纹图谱的生成及相似度评价 取“2.1”项下15
（上汽后开始计时），取出后置于50 ℃鼓风干燥箱中烘干
份五味子干燥品各适量，分别按“2.2.2”项下方法制备供
浓度分别为1.90、1.96、1.09、1.94、1.96、1.92、2.02 mg/mL
试品溶液后，按“2.3”项下色谱条件进样测定，记录色谱
的各单一对照品贮备液，备用。精密吸取上述7种单一
图。将15份五味子干燥品的色谱图分别导入《中药色谱
对照品贮备液适量，置于同一 10 mL 量瓶中，加甲醇定
指纹图谱相似度评价系统》（2012 版）中，设置时间窗宽
容，摇匀，制成上述成分质量浓度分别为 0.095、0.098、
度为0.1 min，通过多点校正和色谱峰匹配生成样品叠加
0.109、0.097、0.098、0.096、0.101 mg/mL的混合对照品溶
指纹图谱，采用中位数法生成对照指纹图谱（R），并以对
液，备用。
照指纹图谱为参照对各样品的图谱进行相似度评价。
2.2.2 供试品溶液的制备 取 15 份五味子干燥品粉末
结果显示，15份五味子干燥品共得到7个共有峰。相似
（过三号筛，下同）约5 g，精密称定，置于250 mL圆底烧
度评价结果显示，除晒干品（S4～S6）外，其余各样品与
瓶中，分别加 85％乙醇 100 mL 加热回流提取 3 次，每次
对照指纹图谱的相似度均在 0.900 以上。这表明，不同
分别提取 3、2、1 h；收集合并 3 次提取液的滤液，然后水
加工方法对五味子药材的化学成分谱产生了一定的影
浴蒸干溶剂，再将其转移至60 ℃烘箱中烘干，然后用甲
响，尤其是晒干样品与其他方法加工样品的成分差异相
醇溶解并定容至 25 mL，以微孔滤膜（0.45 μm）滤过，即
对较大。15 份五味子干燥品的叠加指纹图谱和对照指
[6]
得 。
纹图谱（R）见图1，相似度评价结果见表2。
2.3 色谱条件
在文献[2，7]的基础上设置本研究的色谱条件。以 7 600
7 200
6 800
Diamonsil C18为色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈 6 400 7
6 000
（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱（0～10 min，38％A→ 5 600 5
5 200 3 4 6
44A％；10～18 min，44％A→45％A；18～28 min，45％A→ 4 800 1 2 R
4 400
mV 4 000 S15
S14
48％A；28～35 min，48％A→60％A；35～37 min，60％A→ U， 3 600 S13
3 200 S12
S11
47％A；37～65 min，47％A→48％A；65～67 min，48％A→ 2 800 S10
2 400 S9
S8
60％A；67～76 min，60％A→61％A；76～78 min，61％A→ 2 000 S7
1 600
S6
1 200 S5
85％A；78～95 min，85％A→98％A；95～105 min，98％A）； 800 S4
S3
400 S2
柱温为 30 ℃，流速为 1.0 mL/min；检测波长为 217 nm； 0 S1
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
进样量为10 μL。 t，min
图1 15份五味子干燥品的叠加指纹图谱和对照指纹图
2.4 HPLC指纹图谱的建立及分析
谱（R）
2.4.1 精密度试验 取同一供试品溶液（样品编号为
Fig 1 Superimposed fingerprint of 15 dried S. chinen-
S1），按“2.3”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面
sis products and control fingerprint（R）
积。以1号峰（五味子醇甲）为参照峰，计算得各共有峰
相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6）， 2.4.5 聚类分析 将 15 份五味子干燥品的 7 个共有峰
表明仪器精密度良好。 峰面积除以称样量所得比值导入 SPSS 23.0 软件中，将
2.4.2 重复性试验 取同一五味子干燥品（样品编号为 测量度设置成平方欧氏距离，采用组间连接聚类分析法
S1）粉末 6 份，每份约 5 g，精密称定，分别按“2.2.2”项下 进行聚类分析，得到聚类分析树状图（图2）。结果显示，
方法制备供试品溶液，然后按“2.3”项下色谱条件进样测 当平方欧氏距离为10时，15份五味子干燥品可被聚为3
定，记录峰面积。以1号峰（五味子醇甲）为参照峰，计算 类：第 1 类包括 S7～S12，即微波“杀青”后 50 ℃烘干和
中国药房 2021年第32卷第21期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 21 ·2601 ·