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（上海）有限公司]，Milli-Q Advantage A10型超纯水台式               mg/mL的单一对照品溶液，经0.45 μm滤膜滤过，取续滤
        纯水系统（德国Millipore公司）等。                               液即得，备用。
        1.2 药品与试剂                                           2.1.3  供试品溶液的制备          精密称取生三七或其炮制
            人参皂苷Rb 1对照品（批号RFS-R01211810029，纯度               品粉末（过四号筛）3.75 g，置于25 mL量瓶中，加入70％
        98.58％）、人参皂苷Rg 1对照品（批号RFS-R01511812013，             甲醇25 mL，涡旋后超声（功率600 W，频率40 kHz）提取
        纯度99.16％）、三七皂苷R1对照品（批号RFS-S0021181-                 30 min，于 25 ℃下以 13 000 r/min 离心 10 min，取上清
        1027，纯度 98.52％）均购自成都瑞芬思生物科技有限                       液，经0.45 μm滤膜滤过，取续滤液，即得，备用。
        公司；溴化钾（KBr，光谱纯，批号 C11570025）购自上海                    2.1.4  精密度试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号
        麦克林生化科技有限公司；甲醇（美国 Thermo Fisher                     ZH1），按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，以人
        Scientific公司）为质谱纯，乙腈[赛默飞世尔科技（中国）                    参皂苷 Rb1为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相
        有限公司]为色谱纯，水为超纯水。                                    对峰面积。结果显示，12个相同共有峰相对保留时间的
            15 批生三七药材为广州采芝林药业有限公司提供                         RSD 为 0.04％～0.81％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为
        的净制药材，分别产自云南曲靖、文山、红河等3个地区                           0.78％～2.59％（n＝6），表明方法精密度良好。
        （每产地各5批），经广东药科大学中药资源系刘基柱教                           2.1.5  重复性试验      取同一炮制品样品（编号ZH1），共
        授鉴定均为五加科植物三七 P. notoginseng（Burk.）F. H.             6份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项
        Chen 的干燥根和根茎。取三七药材，按其质量的 40％                        下色谱条件进样测定，以人参皂苷Rb1为参照，计算各共
        加水浸润 24 h 至无白心；蒸锅加热至有蒸汽冒出，放入                        有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，12个相
        已润制的生三七药材，蒸制3 h后取出，趁热将其切成厚                          同共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.02％～0.42％（n＝
        约 2～3 mm 的薄片，于 50 ℃烘干，即得 15 批炮制品（依                  6），相对峰面积的 RSD 为 1.48％～2.48％（n＝6），表明
        次编号ZQ1～ZQ5、ZW1～ZW5、ZH1～ZH5），具体来源                    方法重复性良好。
        信息见表1。                                              2.1.6  稳定性试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号
                 表1    15批生三七药材的来源信息                        ZH1），分别于室温下放置0、2、4、8、12、16、18、24 h时按
        Tab 1 Source information of 15 batches of P. notogin-
                                                           “2.1.1”项下色谱条件进样测定，以人参皂苷Rb1为参照，
               seng
                                                            计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显
         生三七编号        产地             批号         炮制品编号       示，12 个相同共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.03％～
         SQ1        云南省曲靖市         YCB0I0001     ZQ1
         SQ2        云南省曲靖市         YCB0I0002     ZQ2        0.48％（n＝8），相对峰面积的 RSD 为 0.92％～2.56％
         SQ3        云南省曲靖市         YCB0I0003     ZQ3       （n＝8），表明上述溶液于室温下放置 24 h 内稳定性
         SQ4        云南省曲靖市         YCB0I0004     ZQ4        良好。
         SQ5        云南省曲靖市         YCB0I0005     ZQ5
         SW1        云南省文山市         YCB0I0006     ZW1        2.1.7 HPLC 指纹图谱的建立          取 15 批生三七及其炮
         SW2        云南省文山市         YCB0I0007     ZW2        制品，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”
         SW3        云南省文山市         YCB0I0008     ZW3        项下色谱条件进样测定，将所得色谱图导入《中药色谱
         SW4        云南省文山市         YCB0I0009     ZW4
         SW5        云南省文山市         YCB0I0010     ZW5        指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》，随机选择以 SW3
         SH1        云南省红河州         YCB0I0011      ZH1       为生三七的参照、ZW3 为炮制品的参照，采用中位数法
         SH2        云南省红河州         YCB0I0012      ZH2       生成对照图谱，设定时间窗宽度为 0.1，经多点校正，得
         SH3        云南省红河州         YCB0I0013      ZH3
         SH4        云南省红河州         YCB0I0014      ZH4       到 15 批生三七及其炮制品的叠加指纹图谱和对照图
         SH5        云南省红河州         YCB0I0015      ZH5       谱。结果显示，15批生三七有16个共有峰，15批炮制品
        2 方法与结果                                             有25个共有峰；经对比，生三七与炮制品中共有12个共
        2.1 HPLC指纹图谱的建立                                     有峰相同，即生三七图谱中的1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、
        2.1.1 色谱条件 以Sunfire C 18 （250 mm×4.6 mm，5.0 μm）     13、16 号峰（共有峰依次编号为峰 A～峰 L）分别与炮制
        为色谱柱，以乙腈（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱                          品图谱中的1、2、4、5、7、10、11、12、22、23、24、25号峰（共
        （0～5 min，10％A；5～25 min，10％A→46％A；25～30              有峰依次编号为峰A～峰L）对应，详见图1、图2。
        min，46％A→100％A；30～50 min，100％A）；流速为 1               2.1.8 HPLC 指纹图谱的相似度评价             采用《中药色谱
        mL/min；检测波长为 203 nm；柱温为 25 ℃；进样量为                   指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》对 15 批生三七及
        10 μL。                                              其炮制品进行相似度评价。结果显示，15批生三七及其
        2.1.2  对照品溶液的制备          精密称取三七皂苷R1、人参              炮制品与对应对照指纹图谱的相似度分别为 0.911～
        皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品各5 mg，分别置于5 mL量                     1.000，0.862～1.000，表明不同产地生三七及其炮制品中
        瓶中，加入甲醇溶解并定容，混匀，制成质量浓度均为 1                          含有的化学成分种类相似，药材质量稳定，详见表2。


        ·2196 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 18                                 中国药房    2021年第32卷第18期
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